磷的测定(钼锑抗分光光度法_)
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Sino-Dutch Demonstration Researcher and Training Centre for Water Treatment
721分光 光度计
Sino-Dutch Demonstration Researcher and Training Centre for Water Treatment
Sino-Dutch Demonstration Researcher and Training Centre for Water Treatment
实验原理
钼锑抗分光光度法的原理
植物样品经消煮使各种形态的磷转变成磷酸 盐。在一定酸度下,待测液中的正磷酸与钼酸铵 和酒石酸锑钾生成一种三元杂多酸,后者在室温 下能迅速被抗坏血酸还原为蓝色络合物,可用吸 光光度法测定。
数据处理
Wp =
×1000
式中: Wp ——植物磷的质量分数,g/kg; c——从校准曲线或回归方程求得的显色液中磷的质 量浓度, mg/L; V1——消煮液定容体积, ml; V2——吸取测定的消煮液体积, ml; V3——显色液体积, ml; m——称样量,g;
Sino-Dutch Demonstration Researcher and Training Centre for Water Treatment
六、思考题
１、用分光光度计测吸光度时，如果比色皿中有气 泡对结果有什么影响？
Sino-Dutch Demonstration Researcher and Training Centre for Water Treatment
五、注意事项
１、室温低于13℃时，可在20～30℃水浴中，显色15min 2、操作所用的玻璃器皿，可用1+5的盐酸浸泡2h，或用不含 磷酸盐的洗涤剂刷洗 3、比色皿用后应以稀硝酸或铬酸洗液浸泡片刻，以除去吸附 的磷钼蓝显色物
Sino-Dutch Demonstration Researcher and Training Centre for Water Treatment
消煮液2~5ml
20ml水
NaOH至 刚呈黄色
1滴 H2SO4 褪色
5ml钼锑抗 显色剂 30min显色，700nm 测OD值
水定容
Sino-Dutch Demonstration Researcher and Training Centre for Water Treatment
２．标准曲线的绘制 取六支50mL具塞比色管，分别加入磷酸盐标准使用液0、1.00、2.00、4.00、 6.00、8.0ml，加蒸馏水至20ml,同上显色并定容，得 0,0.1, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8 mg/L P标准系列溶液, 放置30min显色后，于700nm 处，以零浓度溶液为参比，测量吸光度绘制以磷含量（µg）对吸光度的校准曲线。 读取吸光度,然后绘制校准曲线或直线回归方程。
植物磷的测定
（钼锑抗分光光度法 ）
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实验目的
１、了解磷测定方法 ２、掌握分光光度计的使用、标准曲线的绘制及计 算方法 3、熟悉钼锑抗分光光度法测定磷的原理和过程
PO43+ 钼酸盐 + 抗坏血酸
H+
蓝色络合物（磷钼蓝）
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实验步骤
１、预处理 （１）样品消煮 HNO3-HClO4消煮法 （２）植物磷的测定
1~2滴指示剂
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实验原理
钼锑抗分光光度法的原理
植物样品经消煮使各种形态的磷转变成磷酸 盐。在一定酸度下,待测液中的正磷酸与钼酸铵 和酒石酸锑钾生成一种三元杂多酸,后者在室温 下能迅速被抗坏血酸还原为蓝色络合物,可用吸 光光度法测定。
数据处理
Wp =
×1000
式中: Wp ——植物磷的质量分数,g/kg; c——从校准曲线或回归方程求得的显色液中磷的质 量浓度, mg/L; V1——消煮液定容体积, ml; V2——吸取测定的消煮液体积, ml; V3——显色液体积, ml; m——称样量,g;
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六、思考题
１、用分光光度计测吸光度时，如果比色皿中有气 泡对结果有什么影响？
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五、注意事项
１、室温低于13℃时，可在20～30℃水浴中，显色15min 2、操作所用的玻璃器皿，可用1+5的盐酸浸泡2h，或用不含 磷酸盐的洗涤剂刷洗 3、比色皿用后应以稀硝酸或铬酸洗液浸泡片刻，以除去吸附 的磷钼蓝显色物
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消煮液2~5ml
20ml水
NaOH至 刚呈黄色
1滴 H2SO4 褪色
5ml钼锑抗 显色剂 30min显色，700nm 测OD值
水定容
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２．标准曲线的绘制 取六支50mL具塞比色管，分别加入磷酸盐标准使用液0、1.00、2.00、4.00、 6.00、8.0ml，加蒸馏水至20ml,同上显色并定容，得 0,0.1, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8 mg/L P标准系列溶液, 放置30min显色后，于700nm 处，以零浓度溶液为参比，测量吸光度绘制以磷含量（µg）对吸光度的校准曲线。 读取吸光度,然后绘制校准曲线或直线回归方程。
植物磷的测定
（钼锑抗分光光度法 ）
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实验目的
１、了解磷测定方法 ２、掌握分光光度计的使用、标准曲线的绘制及计 算方法 3、熟悉钼锑抗分光光度法测定磷的原理和过程
PO43+ 钼酸盐 + 抗坏血酸
H+
蓝色络合物（磷钼蓝）
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实验步骤
１、预处理 （１）样品消煮 HNO3-HClO4消煮法 （２）植物磷的测定
1~2滴指示剂