禽白血病说明书101214
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2～8℃保存，有效期为 12 个月。
地址：北京市海淀区上地开拓路 5 号中关村生物医药园 邮编：100085 客服电话：010-82780259/转 806
技术支持：010-82898361 传真：010-62782819 公司网址：www.wdwkbio.com 公司邮箱：info@wdwkbio.com
终止液（若终止液出现絮状结
稀释好的阴性对照 100 μL；在
晶，可 37℃加热，待其溶解后
C1 和 D1 抗体包被孔中加入稀
使用）；
释好的阳性对照 100 μL； 8.3 在各样品孔中加入处理好的被
8.11 在酶标仪上读取 OD650 值（应在 加入终止液后 5 min 内完成读
检样品 100 μL；
混合，加入孔中，100 μL/孔，
则，应进行重复试验。
盖上盖板膜，室温（25±2℃）
10.2 如果 S/P＜0.17，说明样品中无
下，避光作用 15 min；
禽白血病病毒 P27 蛋白；如果
8.10 揭开盖板膜，每孔中加入 100μL
3
S/P≥0.17，说明样品中有禽白
血病病毒 P27 蛋白。
11 注意事项
11.10 勿将底物溶液暴露于强光下。 11.11 本品终止液为硫酸，避免终止
液同眼、皮肤接触。 11.12 移液系统应保证准确清洁，应
提供准确溶液体积的同时不造 成交叉污染。 11.13 样品的运输须按国家的有关规 定进行。
12 规格与包装
（1）96 羽份/盒 （2）480 羽份/盒
13 贮存与有效期
试剂盒组份
规格
数量
试剂盒外观完整，内装试剂齐全。 包被有 P27 蛋白单克隆抗体的酶标板 透明、干燥且用铝箔袋真空包装，阴 性对照、阳性对照、酶标抗体、底物 A 液、底物 B 液、浓缩洗涤液、终止 液均为透明澄清溶液，无臭、无味， 无沉淀物。注：阴阳对照若有微量结 晶，属正常现象，不影响实验结果。
5 需要而未提供的设备和材料
S/P=（SC-NC）/（PC-NC） SC 为被检样品与抗体反应孔 OD 值。
8.8 揭开盖板膜，甩去孔内液体，用 洗涤工作液洗涤酶标板，
10 判定
300 μL/孔，洗涤 4 次，拍干；
10.1 NC 值＜0.200 且 0.500＜PC 值
8.9 将底物 A 液与底物 B 液按 1:1
≤2.000，试验结果才有效。否
4 性状
2 原理
本试剂盒是采用双抗体夹心酶联 免疫吸附试验（DAS-ELISA）的原理 来检测 ALV 的 P27 抗原。检测时，在 相应的反应孔中加入阴阳对照和待测 样品，若样品中含有 P27 抗原，则与 吸附板孔表面的单克隆抗体结合形成 抗原抗体复合物，反之则不能结合。 洗涤后，加入酶标抗体，酶催化底物 反应呈现蓝色，颜色深浅与样品中 P27 抗原的含量成正相关。 3 组份
5.1 设备 5.1.1 酶标仪（检测波长650 nm） 5.1.2 微量移液器 5.1.3 计时器
1
5.1.4 棉签、-20℃冰箱（泄殖腔拭 子检测）
5.1.5 离心机（胎粪检测） 5.2 试剂
5.2.1 0.01 mol/L pH=7.4 PBS： NaCl………………………8.0 g KCl………………………0.2 g Na2HPO4………………1.14 g KH2PO4…………………0.24 g
11.1 本品仅供体外检测使用。 11.2 不同批号试剂盒中的组份不可
混用。 11.3 勿使用过期的试剂盒，已开封
的组份应在有效期内使用。 11.4 在每次使用时，酶标板上均应
分别设立阳性对照和阴性对照 各 2 孔。 11.5 必须使用符合药典规定的水 （如蒸馏水、去离子水或纯水） 稀释洗涤液。 11.6 试剂盒各组份在使用前应预先 平衡至室温（25±2℃），否则 将直接影响实验结果。 11.7 未使用的酶标板应放回铝箔袋 并封口，2～8℃保存。 11.8 应避免使用金属类物质盛装和 搅拌试剂。 11.9 浓缩洗涤液和终止液在低温 （2～8℃）储存时可能出现结 晶，须室温完全溶解混匀后使 用。
单抗包被板 阴性对照 阳性对照 酶标抗体 底物 A 液 底物 B 液
25×浓缩洗涤液 终止液
使用说明书 盖板膜
96 孔
2 mL 2 mL 50 mL 25 mL 25 mL 50 mL 50 mL
份
5或1
1 1 1 1 1 1 1 1 5或1
注：480 羽规格的试剂盒，单抗包被板是 5 块。
96 羽规格的试剂盒，单抗包被板为 1 块。
数）。
8.4 盖上盖板膜，室温（25±2℃） 下，孵育 60 min；
8.5 揭开盖板膜，甩去孔内液体，用 洗涤工作液洗涤酶标板， 300 μL/孔，洗涤 4 次，拍干；
8.6 立即加入酶标抗体，100 μL/孔； 8.7 盖上盖板膜，室温（25±2℃）
下，孵育 60 min；
9 计算
由阴性对照与抗体反应孔 OD 均 值 NC=（A1+B1）/2 和阳性对照与抗 体反应孔 OD 均值 PC=（C1+D1）/2， 计算公式如下：
8.1 酶标板上对照和待测样品添加模式如附图所示；
附图 酶标板上对照和待测样品添加模式图
1
2
3
4
5
6
7
8
9 10 11 12
A N S1 S2 S3 S4
BN
C
P
Байду номын сангаас
2
DP E F G H
注：N-表示加阴性对照；P-表示加阳性对照；S1, S2, S3, S4 等表示加各种被检样品。
8.2 在 A1 和 B1 抗体包被孔中加入
加入去离子水溶解并定容至 1L。
6 工作液的准备
6.1 洗 涤 工 作 液 ： 用 去 离 子 水 按 1:25（1 份浓缩液+24 份去离子 水）稀释。
7 样品处理
7.1 蛋清 取全蛋，破碎后，直接取 100 μL
进行检测； 7.2 泄殖腔拭子
取棉签于待检鸡只泄殖腔取样 后，放入 1 mL PBS 溶液（0.01 mol/L， pH 值 7.4，见 5.2.1）中，-20℃以下冰 箱中冻融一次，待其恢复至室温后， 取 100 μL 进行检测； 7.3 疫苗
101108
禽白血病病毒 ELISA 抗原检测试剂盒说明书
（编号：KITD102.01）
1 概述
本试剂盒系用针对禽白血病病毒 P27 蛋白的单克隆抗体包被的酶标板 与阴、阳性对照、辣根过氧化物酶标 记的抗 P27 抗体、底物溶液、终止液 和洗涤液等组装而成。用于检测禽白 血病 P27 抗原，属于外用诊断类生物 制品。
疫苗稀释液将疫苗溶解，再用 0.01 mol/L pH=7.4 PBS 稀释 10-20 倍 后，取 100 μL 进行检测； 7.4 胎粪
无需稀释，可以直接用于检测， 若样品中含有沉淀或杂质，需在 2000 rpm~3000 rpm，离心 10 min，取 100 μL 上清进行检测。
8 检测步骤
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终止液（若终止液出现絮状结
稀释好的阴性对照 100 μL；在
晶，可 37℃加热，待其溶解后
C1 和 D1 抗体包被孔中加入稀
使用）；
释好的阳性对照 100 μL； 8.3 在各样品孔中加入处理好的被
8.11 在酶标仪上读取 OD650 值（应在 加入终止液后 5 min 内完成读
检样品 100 μL；
混合，加入孔中，100 μL/孔，
则，应进行重复试验。
盖上盖板膜，室温（25±2℃）
10.2 如果 S/P＜0.17，说明样品中无
下，避光作用 15 min；
禽白血病病毒 P27 蛋白；如果
8.10 揭开盖板膜，每孔中加入 100μL
3
S/P≥0.17，说明样品中有禽白
血病病毒 P27 蛋白。
11 注意事项
11.10 勿将底物溶液暴露于强光下。 11.11 本品终止液为硫酸，避免终止
液同眼、皮肤接触。 11.12 移液系统应保证准确清洁，应
提供准确溶液体积的同时不造 成交叉污染。 11.13 样品的运输须按国家的有关规 定进行。
12 规格与包装
（1）96 羽份/盒 （2）480 羽份/盒
13 贮存与有效期
试剂盒组份
规格
数量
试剂盒外观完整，内装试剂齐全。 包被有 P27 蛋白单克隆抗体的酶标板 透明、干燥且用铝箔袋真空包装，阴 性对照、阳性对照、酶标抗体、底物 A 液、底物 B 液、浓缩洗涤液、终止 液均为透明澄清溶液，无臭、无味， 无沉淀物。注：阴阳对照若有微量结 晶，属正常现象，不影响实验结果。
5 需要而未提供的设备和材料
S/P=（SC-NC）/（PC-NC） SC 为被检样品与抗体反应孔 OD 值。
8.8 揭开盖板膜，甩去孔内液体，用 洗涤工作液洗涤酶标板，
10 判定
300 μL/孔，洗涤 4 次，拍干；
10.1 NC 值＜0.200 且 0.500＜PC 值
8.9 将底物 A 液与底物 B 液按 1:1
≤2.000，试验结果才有效。否
4 性状
2 原理
本试剂盒是采用双抗体夹心酶联 免疫吸附试验（DAS-ELISA）的原理 来检测 ALV 的 P27 抗原。检测时，在 相应的反应孔中加入阴阳对照和待测 样品，若样品中含有 P27 抗原，则与 吸附板孔表面的单克隆抗体结合形成 抗原抗体复合物，反之则不能结合。 洗涤后，加入酶标抗体，酶催化底物 反应呈现蓝色，颜色深浅与样品中 P27 抗原的含量成正相关。 3 组份
5.1 设备 5.1.1 酶标仪（检测波长650 nm） 5.1.2 微量移液器 5.1.3 计时器
1
5.1.4 棉签、-20℃冰箱（泄殖腔拭 子检测）
5.1.5 离心机（胎粪检测） 5.2 试剂
5.2.1 0.01 mol/L pH=7.4 PBS： NaCl………………………8.0 g KCl………………………0.2 g Na2HPO4………………1.14 g KH2PO4…………………0.24 g
11.1 本品仅供体外检测使用。 11.2 不同批号试剂盒中的组份不可
混用。 11.3 勿使用过期的试剂盒，已开封
的组份应在有效期内使用。 11.4 在每次使用时，酶标板上均应
分别设立阳性对照和阴性对照 各 2 孔。 11.5 必须使用符合药典规定的水 （如蒸馏水、去离子水或纯水） 稀释洗涤液。 11.6 试剂盒各组份在使用前应预先 平衡至室温（25±2℃），否则 将直接影响实验结果。 11.7 未使用的酶标板应放回铝箔袋 并封口，2～8℃保存。 11.8 应避免使用金属类物质盛装和 搅拌试剂。 11.9 浓缩洗涤液和终止液在低温 （2～8℃）储存时可能出现结 晶，须室温完全溶解混匀后使 用。
单抗包被板 阴性对照 阳性对照 酶标抗体 底物 A 液 底物 B 液
25×浓缩洗涤液 终止液
使用说明书 盖板膜
96 孔
2 mL 2 mL 50 mL 25 mL 25 mL 50 mL 50 mL
份
5或1
1 1 1 1 1 1 1 1 5或1
注：480 羽规格的试剂盒，单抗包被板是 5 块。
96 羽规格的试剂盒，单抗包被板为 1 块。
数）。
8.4 盖上盖板膜，室温（25±2℃） 下，孵育 60 min；
8.5 揭开盖板膜，甩去孔内液体，用 洗涤工作液洗涤酶标板， 300 μL/孔，洗涤 4 次，拍干；
8.6 立即加入酶标抗体，100 μL/孔； 8.7 盖上盖板膜，室温（25±2℃）
下，孵育 60 min；
9 计算
由阴性对照与抗体反应孔 OD 均 值 NC=（A1+B1）/2 和阳性对照与抗 体反应孔 OD 均值 PC=（C1+D1）/2， 计算公式如下：
8.1 酶标板上对照和待测样品添加模式如附图所示；
附图 酶标板上对照和待测样品添加模式图
1
2
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A N S1 S2 S3 S4
BN
C
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Байду номын сангаас
2
DP E F G H
注：N-表示加阴性对照；P-表示加阳性对照；S1, S2, S3, S4 等表示加各种被检样品。
8.2 在 A1 和 B1 抗体包被孔中加入
加入去离子水溶解并定容至 1L。
6 工作液的准备
6.1 洗 涤 工 作 液 ： 用 去 离 子 水 按 1:25（1 份浓缩液+24 份去离子 水）稀释。
7 样品处理
7.1 蛋清 取全蛋，破碎后，直接取 100 μL
进行检测； 7.2 泄殖腔拭子
取棉签于待检鸡只泄殖腔取样 后，放入 1 mL PBS 溶液（0.01 mol/L， pH 值 7.4，见 5.2.1）中，-20℃以下冰 箱中冻融一次，待其恢复至室温后， 取 100 μL 进行检测； 7.3 疫苗
101108
禽白血病病毒 ELISA 抗原检测试剂盒说明书
（编号：KITD102.01）
1 概述
本试剂盒系用针对禽白血病病毒 P27 蛋白的单克隆抗体包被的酶标板 与阴、阳性对照、辣根过氧化物酶标 记的抗 P27 抗体、底物溶液、终止液 和洗涤液等组装而成。用于检测禽白 血病 P27 抗原，属于外用诊断类生物 制品。
疫苗稀释液将疫苗溶解，再用 0.01 mol/L pH=7.4 PBS 稀释 10-20 倍 后，取 100 μL 进行检测； 7.4 胎粪
无需稀释，可以直接用于检测， 若样品中含有沉淀或杂质，需在 2000 rpm~3000 rpm，离心 10 min，取 100 μL 上清进行检测。
8 检测步骤