禽病学讲义-第二章 家禽的病毒性传染病(2-鸡新城疫)

禽病学（Avian Medicine）讲义
第二章家禽的病毒性传染病
第二节鸡新城疫（Newcastle Disease, ND）
一、概述：鸡新城疫又称亚洲鸡瘟，是由禽副粘病毒科的新城疫病毒（NDV）引起的一种主要侵害鸡、火鸡、野禽及观赏鸟类的高度接触传染性，致死性疾病。

家禽发病后的主要特征是呼吸困难（咳嗽），下痢，伴有神经症状（扭头、转圈），成鸡严重产蛋下降，黏膜和浆膜出血，感染率和致死率高。

（注：AI也叫欧洲鸡瘟）
二、病原学
（1）NDV属于副粘病毒科，禽腮腺炎病毒属／副粘病毒属，核算为单股负链RNA。

成熟的病毒粒子呈球形，直径为120-300nm。

病毒表面有刺激宿主产生血凝抑制和病毒中和抗体的抗原成分（主要为HN蛋白和F蛋白）。

（2）血清型：1个（ILTV也是只有1个血清型）
（3）NDV血凝素可以凝集鸡和人等多种动物的红细胞（注：每一个红细胞表面可以结合许多病毒粒子，这些病毒粒子又可以集合旁边的红细胞，最后形成一个大网，即红细胞凝集试验；没有NDV红细胞在生理盐水中会沉淀，变成一个红点，倾斜V形板会移动，即红细胞沉淀试验；加抗体后，病毒和抗体先作用，再和红细胞加在一起后不能凝集，即血凝抑制试验）。

溶血素可溶解鸡和人等的红细胞。

在感染发生时，病毒吸附（结合较紧密，只有神经氨酸酶才能切割开）和穿入（病毒进入到宿主细胞内，才能生长繁殖，使宿主发病，最后造成死亡）时两个关键阶段。

鸡是NDV最适的试验动物和自然宿主。

（4）NDV在室温条件下可存活一周左右，在56˚C存活30～90min（即高温容易灭活），4˚C可存活一年，－20˚C可存活十年以上，（故新城疫往往在冬春季节发生，而炎热的夏天疾病相对较少）一般消毒药均对NDV有杀灭作用。

（5）病原学特征：
病毒存在于病鸡的所有组织器官、体液、分泌物和排泄物中，以脑、脾、肺含量最高（故可引起神经症状和呼吸道症状），以骨髓保毒时间最长。

NDV可分为三类：速发型（强毒株）、中发型（中等毒力毒株）和缓发型（弱毒株），其中速发型又有嗜神经型和嗜肠道型之分。

有关病毒基因型毒问题：只有一个学清型；90年代以来分离的强毒株大多属于基因VII型。

一般消毒药物均对NDV有杀灭作用。

（该病毒有囊膜，类似于宿主细胞膜，对脂溶性试剂和消毒药高敏）
三、流行病学
（1）易感动物：
NDV可感染240种以上的禽类，但主要是发生在鸡和火鸡；
珍珠鸡、雉鸡及野鸡（等多种家禽）也易感性感；
水禽对本病有抵抗力。

（有些水禽也可感染，如1997年2000年分别在鹅和鸭体内分离到该病毒）
（2）传染源：主要是病鸡和带毒鸡的粪便及口腔粘液。

（3）传播方式：
被病毒污染的饲料、饮水和尘土经消化道、呼吸道或结膜传染易感鸡是主要的传播方式；
空气和饮水传播及机械携带。

（4）流行季节：
本病一年四季均可发生，以冬春寒冷季节较易流行；
不同年龄、品种和性别的鸡均能感染，但幼雏发病率和死亡率明显高于大龄鸡；
纯种鸡比杂交鸡易感，死亡率也高。

（5）传播途径：
直接接触：粪便（“粪-口”途径）；呼吸道分泌物；
间接接触：饲料、水；设备、衣物；养殖场周围的鸟类、苍蝇等；
污染强毒或灭活不彻底的疫苗。

（6）流行病学特点：
尽管目前对ND采取了：强制性免疫、扑杀（还并未严格执行，只是紧急免疫）、限用中等毒力疫苗（I系疫苗）、生物安全（包括在养殖场内设立隔离通道、消毒池，人员和物流要分开，定期对鸡舍和使用过的机械消毒，以防止外来病毒入侵和及时、高效清除室内病毒）等措施，但仍然是危害禽类的主要传染病，并且呈现新的流行趋势。

新的流行特点：非典型ND；ND新基因（亚）型出现；宿主范围扩大，对水禽具有高致病性毒株的出现。

（7）潜在的流行风险：
水禽携带的class I弱毒株（在立体生态养殖的模式下，即鸡、猪、鸭混养模式下）有可能演变成强毒株；
RNA病毒在复制过程中，RNA聚合酶缺乏校正功能，因此病毒以“准种”方式存在。

在疫苗的选择压力下，肯能通过点突变的方式筛选出疫苗无保护的毒株；
散养禽群为病毒提供生存空间；
野生水禽与放养家禽密切接触，为病毒传播提供便利；
走私的宠物鸟类可能携带病毒。

（7）流行区域：亚洲、中东、非洲、中美和南美、以及部分欧洲国家。

（8）世界动物卫生组织（OIE）将其列为法定报告的动物疫病，我国将其列为一类动物疫病。

（9）发病率和死亡率都可高达100％。

但临床表现情况与病毒毒力、家禽种类及其易感性、环境因素、免疫状况关系密切，尤其是部分迁徙鸟类可以携带病毒但并不表现出临床症状。

（10）当前流行特点：
免疫鸡群发生鸡新城疫流行，经多次免疫的鸡群仍然发生本病，甚至血液循环HI抗体高达213的鸡群带毒并发病；
病鸡群出现亚临床症状或非典型症状，常发生在免疫鸡群；
发病率和死亡率低，发病率一般在10％～30％，发病鸡群的病死率通常在5％～45％；
鸡群发生非典型新城疫时，HI试验（血凝抑制试验）检测出的抗体大于212；
剖检病变不明显。

典型新城疫发病时的病变主要表现为腺胃粘膜、肌胃角质膜下出血，肠粘膜出血，十二指肠枣核样溃疡病变，盲肠扁桃体肿大、坏死及出血等，而免疫鸡群在发生鸡新城疫时多数无上述明显病变；
对种鸡及蛋鸡则表现为对产蛋率的严重影响，造成产蛋率的大幅度下降，一般下降20％～50％，有时甚至导致停产，造成巨大经济损失。

（11）ND发生与流行的主要原因：
近年来新城疫发生，表现为压临床症状或非典型症状，其主要原因除了可能因呼吸道、消化道粘膜免疫产生的分泌型抗体水平低以外，是由于新城疫病毒在高免疫压力下发生变异，导致疫苗的效力下降；
另外，过早免疫、家禽本身有免疫抑制病（包括传染性法氏囊病、马立克、以及禽流感、网状内皮增生）发生、免疫方法不正确（途径、剂量、使用方法等不正确。

最正确的使用方法为点眼滴鼻，即做好呼吸道粘膜免疫，需要揉眼睛、捂鼻子，使疫苗完全吸收，否则，鸡一甩头，滴入的疫苗就会
甩出；也可采用在饮水中添加疫苗的方法，但效果大打折扣，通常只有50％）、疫苗选择不恰当等也是引发新城疫的重要原因。

（12）鸡新城疫是危害我国养禽业的重要疫病。

近年来，我国对新城疫采取了密集的强化免疫预防措施，高发病率和高死亡率的鸡新城疫已不多见，但近年来新城疫在流行病学上出现了一些新特点：在养鸡生产中，特便是在成年产蛋鸡饲养阶段，疫苗用量达到推荐剂量的6倍，有的甚至是8～9倍，但免疫后往往频繁发生新城疫。

（13）新城疫的发病率仍然居高不下（还伴发细菌病、球虫子感染），特别是集约化养殖场生非典型性新城疫，个体散养时有新城疫发生，严重影响里我国的鸡业健康发展。

（14）目前，我国疫苗毒株主要为II系（B1）、IV系（La Sota）和I系（Maktesuar），和主要流行株基因VI型和VII型毒株有较大的区别，且各地区的具体流行株又存在不同程度的差异，这可能是近年来常发生高抗体水平鸡群发病、导致免疫失败及发生非典型新城疫的重要原因之一。

（15）疫苗生产、运输和贮存的失误：
种毒保存不好，导致各批疫苗毒力、抗原效价不稳定，生产出的疫苗质量不合格，接种后不能产生相依的免疫力等；
疫苗在运输过程中由于运输时间长，使疫苗的效价下降；
在疫苗保管时，疫苗存放过久或超过有效期，疫苗受阳光曝晒或稀释后长时间未使用；
活疫苗由于保存温度忽高忽低反复冻融，或是灭火疫苗结冰导致疫苗油乳分层等，这些因素都可造成疫苗失效。

四、临床症状
（1）本病潜伏期为2-15d，平均5-6d（发病死亡高峰期）；发病的早晚及症状表现依病毒的毒力、宿主年龄、免疫状态、感染途径及剂量、并发感染、环境及应激情况而有所不同。

•速发嗜内脏型新城疫（VVND；Doyle，1927）
•速发嗜肺脑型新城疫（NVND；Beach，1942）
•中发型新城疫（MND；Beaudette and Black，1946）
•缓发型新城疫（LND；Hitchner Johnson，1984）
•无症状型或缓发嗜肠型新城疫（LEND；Lancaster，1981）
（注：以上各型油毒力决定，其中后两种用于研发疫苗）
（2）典型新城疫：
突然发病，发病率和死亡率90％；
张口呼吸，甩头怪叫；
嗉囊积液，倒提病鸡可见从口中流出酸臭液体；
腹泻，粪便呈黄绿色，带粘液；
后期可见震颤、转圈、头颈扭转等神经症状；
产蛋鸡迅速减蛋，软壳蛋数量增多。

（鸡群突然发病，发病率和死亡率可达90％以上。

随后出现甩头，张口呼吸，气管内水泡音，结膜炎，精神萎顿，嗜睡，嗉囊内积有液体和气体，口腔内有粘液，倒提病鸡可见从口中流出酸臭液体。

（呼吸道症状）
病鸡拉稀，粪便呈黄绿色。

体温升高，食欲废绝，鸡冠和肉髯发紫。

后期可见震颤、转圈、眼和翅膀麻痹，头颈扭转，仰头呈观星状以及跛行等神经症状。

面部肿胀也是本型的一个特征。

产蛋鸡迅速减蛋，软壳蛋数量增多，很快绝产。

）
（3）非典型新城疫：
多见于免疫鸡群、有母源抗体的雏鸡群和新城疫常在的鸡场；
病情比较缓和，死亡率都不高（<30％）；
安静时可听见呼吸罗音（发出“呼噜”声）、咳嗽；
后期可见头颈扭转、麻痹等神经症状；
产蛋鸡出现不同程度的减蛋（10％～50％），以及种蛋精率和孵化率下降（一般半个月后开始回升，约定2～3个恢复正常水平），同时软壳蛋、畸形蛋、小蛋、褪色蛋多（主要是对产蛋性能的影响）；
消化道病变（尤其肌胃、腺胃出血）较少见到，剖检时易漏检；
偶见气管轻度充血，有少量粘液。

（多发生于有一定抗体水平的免疫鸡群。

病情比较缓和，发病率和死亡率都不高。

临床表现以呼吸道症状为主，病鸡张口呼吸，有“呼噜”声，咳嗽，口流粘液，排黄绿色稀粪，继而出现歪头，扭脖或呈仰面观星状等神经症状。

成鸡产蛋量突然下降5％～12％，严重者可达50％以上，并出现畸形蛋、软壳蛋和糙皮蛋。

）
五、病理变化
（1）典型症状：
腺胃乳头出血，腺胃与肌胃交界处及腺胃与食道交界处呈带状出血；
肌胃角质膜下出血；
十二指肠粘膜充血、出血，肠壁上有枣核样溃疡、坏死灶；
盲肠扁桃体肿大、出血、坏死；
气管内有卡他性渗出物或充血、出血；
卵泡充血、出血（甚至像紫葡萄样，严重影响产蛋性能）。

（消化道粘膜和浆膜出血，特别是腺胃乳头和贲门部出血。

心包、气管、喉头、肠和肠系膜充血或出血。

直肠和泄殖腔粘膜出血。

卵巢坏死、出血，卵泡破裂性腹膜炎等。

消化道淋巴滤泡的肿大出血和溃疡是ND的一个突出特征。

消化道出血分布于：腺胃前部—食道移行部；腺胃后部—肌胃移行部；12自肠移行部；盲肠扁桃体，在左右回盲口各一处，枣核样隆起，出血（而不是充血），坏死。

）
（2）非典型症状：
剖检可见气管轻度充血，有少量粘液。

鼻腔有卡他性渗出物。

气囊浑浊。

少见腺胃乳头出血等典型病变。

六、诊断
（1）临床调查：尤其是免疫情况
（2）临床症状、病变
（3）实验室检查：
病毒分离和鉴定
免疫学手段
分子生物学手段
（4）传统ND诊断方法：
血清学诊断方法：
红细胞凝集（HA）
红细胞凝集抑制（HI）试验
病毒中和试验（VNT）
酶联免疫吸附试验（ELISA）
传统诊断方法：
病毒的分离鉴定
病毒毒力测定： 1日龄雏鸡脑内接种致病指数（ICPI）、6周龄静脉接种致病指数（IVPI）、鸡胚平均死亡时间（MDT）等。

（注：缺点血清学方法无法区分毒株之间的差异和测定毒力；而毒力测定方法必须使用SPF鸡和鸡胚，试验操作时间长。

）
分子检测技术：
分子技术最吸引人的是它能快速、准确并且是确定地对ND进行全方位的诊断。

由于NDV是RNA病毒，所以PT-PCR是大多数病毒分型、确定分值技术的基础。

反转录酶将基因组RNA转录成cDNA，cDNA可以作为模版。

特异性基因区域的扩增主要用以下几种方式来进行：通用引物、病变型特异引物、套式PCR。

对于PCR产物的进一步研究主要包括：限制性内切酶分析、探针杂交、裂解位点核苷酸序列分析。

（5）早期发现，早期诊断（鉴别），早期隔离是重要的措施，以控制传染源。

（“早、快、严、小”）
（6）当鸡群突然采食量下降，出现呼吸道症状和拉绿色稀粪，成年鸡产蛋量突然下降，因首先考虑到新城疫的可能性。

通过鸡群的仔细观察，发现呼吸道、消化道鸡神经症状，结合尽可能多的临床病理学剖检，如见到消化道粘膜出血、坏死和溃疡为特征的示病性病理变化，可初步诊断为新城疫。

（7）确诊要进行病毒分离和鉴定。

也可通过血清学诊断来判定。

例如：病毒中和试验、ELISA试验、免疫荧光、琼脂双扩散试验、神经氨酸酶抑制试验等。

但迄今为止，血凝抑制试验（HI）仍不失为一种快速准确的传统实验室手段。

七、防治
（1）新城疫在我国的发生已近视年的历史，并仍将会在未来长期存在，对其防控以至最终的消除将会是一项长期艰巨而复杂的任务。

（2）作为一种病毒类疾病，目前在世界范围内没有行之有效的治疗药物，因此控制新城疫的重要措施就是搞好疫苗接种工作和综合饲养管理。

（3）长远之计：从使用弱毒疫苗到不用活疫苗，到不是用疫苗，到监测、扑杀，到净化、根除。

（4）防控要点：
患病禽依据农业部相关措施扑杀、消毒；
严格的生物安全措施；
病原根除计划。

（但在实际实施种还存在很多困难）
（5）生物安全措施及疫病根除计划：
我国饲养模式（既有散养也有规模化养殖）决定了短期内很难杜绝该病毒的流行。

目前复杂的疫情决定了疫病根除的可能还需要很长的路要走。

规范化的养殖可以在小范围内控制该病的发生。

（6）注意：
接种疫苗后，即使有抗体，也不能完全阻止强毒的复制和排毒；
目前疫苗仍然能够产生保护，但同基因型的毒株间可以有效降低排毒；
疫苗的选择，I系疫苗使用的风险。

（7）使用疫苗时的注意事项：
采用饮水方法免疫最好先禁水瓶3-4h，使用蒸馏水或冷开水，条件允许可以添加脱脂奶粉。

为保证鸡群饮水疫苗的有效剂量，一般以4-5倍剂量为宜。

饮疫苗前将饮水器具清洗干净，加水量以后1h内饮完为度。

采用滴鼻、点眼的免疫方法，不要把疫苗瓶在手中握的时间太长，要轻微摇晃。

滴鼻点眼时要确实，避免疫苗被甩头甩掉，从而免疫不成功。

（也可采用喷雾免疫；此外滴口效果也很好！）
疫苗应该选用高质量，低抗原应急的疫苗，可在疫苗内加入白介素-2，与疫苗同用。

（8）发病后措施：
受威胁禽紧急接种。

隔离发病禽，彻底消毒。

饲喂免疫增强剂，抗菌药物，提高禽群抵抗能力，防止继发感染。

（9）一旦发生典型新城疫，应立即隔离和淘汰早期病鸡，全群紧急接种3倍剂量LaSota（IV系）活毒疫苗（如把3倍剂量IV系活苗与ND油乳剂灭火苗同时应用，效果更好）。

对发病鸡群投服多维和适当抗生素，可增强抵抗力，控制细菌感染，减少疾病损失。

（10）综合防控措施：
研制优质的疫苗（研发ICPI小于0.4的活苗和基因VII／弱毒株的灭活疫苗）
加强饲养管理，消除免疫抑制的影响（包括IBD、RE、禽白血病和传染性贫血因子等免疫抑制病的预防与控制）
制定合理的免疫程序（包括饲养管理、防疫、消毒、免疫及监测等多个环节）
搞好家禽的粘膜免疫
（新城疫的防制必须与其它疾病的预防相配合，避免混合感染，才能取得良好的防制效果。

）
（11）参考免疫程序：
肉仔鸡：
7日龄LaSota或Clone-30弱毒苗滴鼻、点眼；24-26日龄LaSota喷雾免疫或I系苗肌肉注射。

7日龄ND-IV系或Clone-30弱毒苗点眼＋0.3ml ND灭活苗皮下注射；15日龄LaSota弱毒苗点眼，或喷雾，或许倍量饮水。

蛋鸡和肉种鸡：
7日龄LaSota滴鼻点眼，同时ND灭活苗0.3ml肌肉注射；28日龄LaSota喷雾免疫或2倍量饮水；9周龄LaSota喷雾免疫；必要时可以考虑用I系苗注射补强；开产前2-3周ND＋EDS＋IB三联灭活苗肌肉注射，同时LaSota点眼或喷雾；开产后6-10周用ND＋IB活苗喷雾一次；44周龄时复免一次ND灭活苗效果更佳。