降压物质检查法

降压物质检查法

本法系比较组胺对照品S与供试晶T引起麻醉猫或狗血压下降的程度，以判定供试晶中所含降压物质的限度是否符合规定。

组胺对照品溶液的配制精密称取磷酸组胺对照品适量，按组胺计算，加水溶解使成每lml中含10mg的溶液，分装于适宜的容器内，4—8℃贮存，如无沉淀析出，可在3个月内使用。

对照品稀释液的配制临用前，精密量取组胺对照品溶液适量，用氯化钠注射液配成每lml中含组胺05μg的稀释液。

供试品溶液的配制按正文规定的剂量，配成适当浓度的供试品溶液；试验时，一般要求供试品溶液与对照品稀释液的注入体积应相等。

检查法取健康合格、体重2kg以上的猫或体重5kg以上的狗，雌者无孕．用适宜的麻醉剂如巴比妥类麻醉后，固定于保温手术台上，分离气管并插入插管以使呼吸畅通．必要时可行人工呼吸．在一侧颈动脉插入连接测压计的动脉套管，管内充满适宜的抗凝剂溶液，以记录血压，也可用其他适当仪器记录血压。在一侧股静脉内插入静脉插管，供注射药液用。试验中应住意保持动物体温。全部手术完毕后，将测压计调节到与动物血压相当的高度一般为133～160kPa，开启动脉夹，待血压稳定后，即可进行药液注射．各次注射速度应相同，每次注射后立即注入一定量的氯化钠注射液，相邻两次注射的间隔时间应一定3—5分钟，每次注射应在前一次反应恢复稳定以后进行。自静脉轮流注入上述对照晶稀释液，剂量按动物体重每lkg注射组胺005μg、01μg及015μg，每个剂量应各重复2～3次，如01μg 剂量所致的血压下降值均不小267kPa，同时相应各剂量所致反应的平均值有差别，可认为该动物的灵敏度符合规定。

取对照品稀释液按动物体重每lkg注射组胺o1μg的剂量ds，供试品溶液按正文中规定的剂量dr，照下列次序注射一组4个剂量：ds、dT、dT、ds，。然后以第一与第三、第二与第四剂量所致的反应分别比较;如dT所致的反应值均不大于ds所致反应值的一半，即认为供试品的降压物质检查符合规定。否则应按上述次序继续注射一组4个剂量，并按相同方法分别比较两组内各对ds、dT剂量所致的反应值；如dT所致的反应值均不大于ds所致的反应值，仍认

为供试品的降压物质检查符合规定；如dT所致的反应值均大于ds所

致的反应值，即认为供试晶的降压物质检查不符合规定；否则应另取动物复试。如复试的结果仍有dT的反应值大于ds所致的反应值，即认为供试品的降压物质检查不符合规定。

所用动物经灵敏度检查仍符合规定，可继续用于降压物质检查。

二、操作规程（猫血压法）

1实验材料及用具2溶液配制

3实验动物4检查法及实验操作

5结果判断6试验记录格式及要求

7技术要点及注意事项

（1）组胺标准品的配制，应注意计算组胺的实际重量（mg）称取重×0362实际组胺重量

·称重时，减量法，注意玻璃屑不要落入。

·第1次配制时，配制成1mg/ml的组胺溶液，用注射用水或蒸馏水配制，可置冰箱保存，三个月内如无沉淀、浑浊，可用。实验前取

1ml（1mg/ml）→50ml20ug/ml

再取25ml20ug/ml→100ml（05ug/ml，（用生理盐水配制）

（2）麻醉

120mg/kg苯巴比妥钠

15ml/kg戊巴比妥钠

30ml/kg戊巴比妥钠（无苯巴比妥钠时）

（麻醉时：腹腔注意不要注入膀胱，否则吸收差，达不到麻醉目的）

（3）体温

天气冷时，要加温。

（4）气管：样品较少时，可不需切开气管

（5）动物：怀孕动物不宜用

（6）灵敏度测定：

005μg/kg01μg/kg015μg/kg

体积02ml/kg，静脉给药，用05-10ml生理盐水冲洗。

（7）对样品体积的要求

配制时同标准品，将样品每kg应注入的量配在02ml溶液中。

（特殊情况，如氨基酸、大输液及其他，则可根据具体要求，一般不超过1ml/kg。）（8）给药顺序：

S1T1T2S2（T1同S2比，T2同S1比），

如有T超过S1/2，按S1T1T2S2，S3T3T4S4顺序做八针

（9）结果判断：

T均小于S的1/2，则符合规定，

T均大于S，则不符合规定

如T有超过S1/2，复试T均小于S，则符合规定

（10）一只动物使用次数

只要灵敏度符合规定，可继续进行

（11）复试条件：

有部分dt所致的反应值大于ds，则另取动物复试

∷新药研究中安全性项目剂量的确定；

∷新药标准中安全性项目易出现的问题；

∷替代法的应用