气相色谱法检测葡萄酒酒精含量

气相色谱法检测葡萄酒酒精含量

一、实验目的

1、测定葡萄酒酒精含量。

2、学习气相色谱法测定的原理和步骤。

二、实验原理

试样被气化后，随同载气进入色谱柱，利用被测定的各组分在气液两相中具有不同的分配系数，在柱内形成迁移速度的差异而得到分离。分离后的组分先后流出色谱柱，进入氢火焰离子化检测器，根据色谱图上各组分峰的保留值与标样相对照进行定性；利用峰面积(或峰高)，以内标法定量。

三、仪器和试剂

乙醇：色谱纯（GR），作标样用。

正丙醇：色谱纯（GR），作内标用。

乙醇标准溶液（A）：用 5个100 mL容量瓶分别吸取2.00，3.00，3.50，4.00，4.50 mL 乙醇，再分别用水定容至 100 mL。

乙醇标准溶液（B）：用5个 10 mL容量瓶分别准确量取 10.00 mL不同浓度的乙醇溶液标准（A），再分别加入 0.50 mL正丙醇内标溶液，混匀。该溶液用于标准曲线的绘制。

气相色谱仪：配有氢火焰离子化检测器（FID）。

色谱柱（不锈钢或玻璃）： 2m × 2 mm或3 m × 3 mm，固定相：Chromosorb 103，60～80目。或采用同等分析效果的其他柱材料。

微量注射器。

冷凝器、蒸馏瓶、10 mL容量瓶、100 mL容量瓶、移液管

四、实验步骤

1、样品制备

用一洁净、干燥的 100 mL容量瓶准确量取100mL样品（液温 20℃）于 500 mL蒸馏瓶中，用 50mL水分三次冲洗容量瓶，洗液并入蒸馏瓶中，再加几颗玻璃珠，连接冷凝器，以取样用的原容量瓶作接收器（外加冰浴）。开启冷却水，缓慢加热蒸馏。收集馏出液接近刻度，取下容量瓶，盖塞。于 20 ℃水浴中保温 30 min，补加水至刻度，混匀，备用。

吸取 10.00 mL上述溶液准确稀释4倍，然后吸取10mL于10 mL容量瓶中，准确加入0.50 mL 正丙醇内标溶液，混匀。

2、分析步骤

色谱条件

柱温：200℃；

气化室和检测器温度：240℃；

载气流量（氮气）：40 mL／min；

氢气流量：40 mL／min；

空气流量：500 mL／min。

不同仪器，通过试验选择最佳操作条件，即使乙醇和正丙醇获得完全分离，并使乙醇在 1 min左右流出（典型色谱图见图 1）。

图1 典型色谱图

3、标准曲线的绘制：分别吸取 0.3μL乙醇标准溶液 B，快速从进样口注入色谱仪，以标样峰面积和内标峰面积比值对酒精浓度做标准曲线（或建立相应的回归方程）。

4、试样的测定：吸取0.3μL的试样，按3操作。

五、实验结果

用试样组分峰面积与内标峰面积的比值查标准曲线得出的值（或用回归方程计算出的值），乘以稀释倍数，即为酒样中的酒精含量。所得结果应表示至一位小数。

精密度

在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的1％。