(2019培训用)常见肠道寄生虫的虫卵鉴定及主要病原学检测

血吸虫卵
姜片虫卵
（直 接 涂 片 中）
Kato-Katz 厚 涂 片 中）
肝片吸虫卵
曼氏迭宫绦虫卵
长膜壳绦虫卵
短膜壳绦虫卵
长、短 膜 壳 绦 虫 卵
带绦虫卵
带绦虫卵
长膜壳绦虫卵
镜下易混淆的几种虫卵
未 受 精 蛔 虫 卵
曼 氏 迭 宫 绦 虫 卵
肺 吸 虫 卵
血
吸
蛲
虫
虫
卵
卵
易误认为虫卵的物质
• 7、结果登记：要将镜检结果即时记录在原始登 记表上，在记录每克粪便虫卵数时要将观察到 的数乘以24，再乘以粪便系数（成形便1、半成 形便1.5、软便2、粥样便3、水泻便4）。
注意事项: • 1、亲水性透明玻璃纸在使用前需全部浸入透
明液中，浸泡24小时以上。 • 2、把刮片上的细粪渣填入定量板时，必须填
二、寄生虫卵 形态特征
• 常用术语
• 虫卵形态特点 虫卵的形状 圆形：长膜壳绦虫卵、带绦虫卵 椭圆形：蛔虫卵、钩虫卵、姜片虫卵、片形 吸虫卵 纺锤形：鞭虫卵、曼氏迭宫绦虫卵（或椭圆） 梨形：肝吸虫卵 不对称形：肺吸虫卵、蛲虫卵
虫卵的形状
虫卵的大小 蠕虫卵大小相差很大，大小悬殊19μm～240μm。 受精蛔虫卵：45～75×35～50μm 同种蠕虫卵大小也有差异 大型虫卵>100um：姜片虫、片形吸虫、血吸 虫（曼氏、埃及）、部分棘口吸虫 中型虫卵50-100um：线虫卵、日本血吸虫、 并殖吸虫、长膜壳绦虫、曼氏迭宫绦虫 小型虫卵<50um ：华支睾吸虫、后睾吸虫、 异形吸虫、带绦虫、短膜壳绦虫
虫卵的附属物 卵盖：有：吸虫（除血吸虫）、假叶目 绦虫（曼绦、阔绦）；
无：线虫、血吸虫、圆叶目绦虫 （带、长、短） 透明栓：鞭、毛圆 波浪形蛋白质膜：蛔（未脱膜） 小棘：肝、血、阔节
有盖蠕虫卵大小比较
无盖蠕虫卵大小比较
蠕虫卵与异物的区别
区别点
虫卵
异物
外形
有一定的形状
形状不固定
大小
有一定大小
大小不等
（四）饱和盐水漂浮法 • 适用范围：适用于检查线虫卵（除未受精蛔虫卵）、
带绦虫卵及膜壳绦虫卵，不适宜吸虫卵和原虫包囊。 对检查钩虫卵尤佳，是诊断钩虫病首选方法。 • 器材准备：浮聚管（高3.5cm，直径2cm）、载玻片、 竹签、食盐、滴管、烧杯、显微镜等。 • 操作步骤：用竹签取蚕豆大小粪便一块，放置于浮 聚管内，然后加入少许预先准备好的饱和盐水，用 竹签将粪便调匀，再慢慢加入饱和盐水，以液面略 高于瓶口但不溢出为宜，再在管口覆盖一载玻片， 静置15分钟后，将载玻片提起并迅速翻转，立即镜 检，并及时记录镜检结果。
（直 接 涂 片 中）
（Kato-Katz 厚 涂 片 中）
蛲虫卵
（直 接 涂片 中） （ Kato-Katz 厚 涂 片 中） （透 明 胶 带 纸 下）
蛲虫卵
华支睾吸虫卵（肝吸虫卵）
（Kato-Katz厚 涂 片 中）
（直 接 涂 片中）
华支睾吸虫卵（肝吸虫卵）
并 殖 吸 虫 卵（肺 吸 虫 卵）
• 适用范围：用于粪便中各种寄生虫虫卵的检查。 • 器材及试剂的准备： • 1、塑料定量模板：规格为30mm×40mm×1mm的聚苯乙
烯模板，中央孔为圆台形，其短径3mm，长径4mm，高 1mm，容积为38.75mm3。 • 2、软性塑料刮片：两头刮片型。
• 3、尼龙绢片:规格为80-100目,裁剪成8cm×8cm大小。
（六）肛门拭子检查法
• 适用范围：主要适用于在肛周产卵的 蛲虫和带绦虫虫卵的检查。
• 常用的方明胶纸法：预先将长约法6cm、宽约 2cm 的 透 明 胶 纸 贴 在 载 玻 片 上 ， 并 编 上 号码，到达检查现场后，将编有号码一 端的约2/3胶纸掀起，反折到载玻片的 另一面，接着就在受检者肛门周围皮肤 上反复粘贴，然后再将胶纸按原样平贴 到载玻片上，带回镜检。
• 5、取一张浸泡好的亲水玻璃纸，抖掉多余的浸 泡液，盖在粪样上，用另一块载玻片覆于玻璃 纸上垂直均匀用力压制，使粪便均匀地展开至 玻璃纸边缘。
• 6、待粪便透明后及时镜检。镜检时要仔细检查 每一视野，并特别注意受精蛔虫卵与未受精蛔 虫卵的鉴别。一旦发现蛔虫卵、鞭虫卵、钩虫 卵及其他吸虫卵，都要计数，以便计算感染度。
• 6、如欲检查原虫包囊则换水间隔时间延 长为6小时。使包囊充分沉于水底，同时 加盖玻片及用碘液染色。编号：每份粪 样取3张载玻片进行编号（与待检粪样编 号相同）。
注意事项： • 1、尽量将粪便搅匀后过滤。 • 2、注意换水时间，特别是作血吸虫卵检查
时，应缩短换水时间或用5％NaOH溶液代 替清水，以避免毛蚴孵化。 • 3、换水时应避免沉渣浮起，使虫卵随上清 液流失。 • 4、由于粪量较大，应特别避免污染环境。
灵
植
芝
物
孢
种
子
子
其它杂质
四、粪便主要的病原学检测法 （一）直接涂片法
• 适用范围：用于多种蠕虫卵或一些原虫滋养 体检查。
• 材料准备：载玻片、竹签、生理盐水、吸管、 显微镜等。
• 操作步骤：先滴一滴生理盐水洁净的载玻片 上，再用竹签挑取约绿豆大小的粪便块，在 生理盐水中涂抹均匀；然后放在低倍镜下检 查，如果用高倍镜观察，需加盖玻片。
盐水至管口，并按饱和盐水浮聚法操作检查。
几种常用检查方法适用病种
病种
方法 粪便检查法
肛周擦拭法
饱和盐水浮聚法
注意事项:
• 1、在配制饱和盐水时盐量要足（每100毫升沸 水需加盐30-40克，或在向沸水中加盐时不断 搅拌直至食盐不再溶化为止），以保证饱和盐 水的比重达到1.2左右。
• 2、在用竹签调粪便时，要尽可能调成糊状， 使粪便中的虫卵能真正释放到饱和盐水中。
• 3、加饱和盐水的量要适宜，既不能溢出，也 不能不满。
• 4、在翻转载玻片时动作要迅速，避免载玻片 上的液体滴落。
（五）钩蚴培养法
• 适用范围：在无显微镜条件下或需 作虫种鉴定时使用。
• 器材准备：滤纸条、竹签、 1cm×10cm试管、铅笔、冷开水、 放大镜、培养箱。
钩蚴培养法
操作步骤:
• 1、取1cm×10cm试管一支加入冷开水约1ml， 将滤纸剪成与试管等宽但较试管稍短的“T”形纸 条，横条部分用铅笔写受检者姓名，
满中央孔全孔并抹平；压制涂片时尽量使粪便 均匀展开至玻璃纸边缘，但应避免粪渣溢出。 • 3、粪样要新鲜，量要满足三检的要求。
• 4、涂片放置时间长短是确保镜检质量的关键。 一般室温25℃、75%湿度以下，涂片放置时间 不宜超过2小时；若温度低，空气湿度大，涂 片放置时间可适当延长。总之，涂片放置时间 取决于粪样透明度，只要透明了，就应及时镜 检，否则透明过度，薄壳虫卵易变形看不清楚， 会造成漏检或误判。
常见肠道寄生虫粪便虫卵 鉴定及主要病原学检测
江苏省寄生虫病防治研究所 徐祥珍
一、粪便中常见的肠道寄虫卵 • 线虫卵：蛔虫卵、钩虫卵、鞭虫卵、蛲虫卵 • 吸虫卵：华支睾吸虫（肝吸虫）、卫氏并殖吸
虫（肺吸虫）、姜片虫卵、日本血吸虫卵 • 绦虫卵：猪带绦虫卵、牛带绦虫卵、长膜壳绦
虫卵、短膜壳绦虫卵、曼氏迭宫绦虫卵 • 棘头虫卵：猪巨吻棘头虫卵
不均：蛲、肺 纹理：长膜壳、带绦（其实是胚膜）
虫卵的内容物 卵细胞：单：蛔（受精未分裂）、鞭
多：钩、蛔（受精分裂） 颗粒：蛔（未受精） 卵黄细胞（一卵细胞及多个卵黄细胞）：肺、
姜、片形、曼绦、阔节绦 细胞分裂期：钩、蛔（受精）、血（未成熟） 幼虫：线虫幼虫：蛔（感染期）、蛲 毛蚴：肝、血（成熟） 六钩蚴：带、长、短
改良加藤厚涂片法操作图示
操作步骤: • 1、编号：每份粪样取3张载玻片进行编号（与待
检粪样编号相同）。 • 2、打开待检粪样的包装，将尼龙绢片置于待检粪
样上，用塑料刮片轻压尼龙绢片并在其上轻刮， 使细粪渣透过尼龙绢片的微孔滤出至绢片表面。 • 3、将定量板放在载玻片中部，然后用刮片将绢片 表面细粪渣填入定量板中央孔内，使填满全孔并 抹平。 • 4、小心移去定量板，使粪样留在载玻片上。
注意事项： • 1、采样时间要早，最好是安排在清晨小孩
未解大便前，如果是夏季，要嘱咐儿童家长 早晨不要洗澡。 • 2、镜检时要注意做好蛲虫卵与空气泡的鉴 别（主要是看大小和有无内容物）。 • 3、要及时镜检，以免影响镜检结果。
• 棉签拭子法：先将棉签用生理盐水浸透，挤去过 多的水分，在受检者肛周和会阴部皮肤拭擦，将 此棉签放入盛有清水的离心管中，充分搅动，取 出 棉 签 ， 经 离 心 沉 淀 （ 1500rpm ， 离 心 2min ） 后 倒去离心管中的上清液，吸沉渣镜检。也可将擦 拭肛周的棉签放入盛有饱和盐水的试管或青霉素 小瓶中，充分搅动，使虫卵洗入盐水中，迅速提 起棉签，在试管内壁挤去盐水后弃之。再加饱和
颜色
少数无色透明，大多有一定颜色
无固定颜色
卵壳
卵壳光滑整齐，同种卵壳厚薄一致 无卵壳结构，边缘不整齐
光泽 内容物
有固定的折光和光泽
无
有固定的内部结构和特征(如卵细胞、 幼虫、毛蚴等)
无固定的构造和特征
人体常见寄生虫卵的鉴别
15
三、虫 卵 图 像
受精蛔虫卵
（直 接 涂 片 中）
（Kato-Katz 厚 涂 片 中）
• 5、用椭圆孔塑料定量板，每孔所容粪便重量 平均41.7mg，每片所得虫卵数乘以24，再乘粪 便系数，即得每克粪便的虫卵数。
改良加藤厚涂片制作技术考核评分表
选手编号
得分
评委（签名）
（三）自然沉淀法(水洗沉淀法)
• 适用范围：用于蠕虫卵及原虫包囊的检 查。
• 器材准备：500~1000ml沉淀杯、烧杯、 60目筛子、载玻片、盖玻片、长滴管、 显微镜等。
未受精蛔虫卵和受精蛔虫卵
（直 接 涂 片 中）
（ Kato-Katz 厚 涂 片 中）
脱去蛋白膜受精蛔虫卵 与有蛋白膜受精蛔虫卵
脱去蛋白膜受精蛔虫卵 与 未 受精 蛔 虫 卵
正在发育的受精蛔虫卵
感染性蛔虫卵
钩虫卵
（直 接 涂 片中）
变 形 钩 虫 卵
（Kato-Katz 厚 涂 片 中）
鞭虫卵
• 2、取粪便蚕豆大小，均匀涂在纸条上2/3部分， 将纸条插入试管，下端浸入水中（注意勿使粪便 混入水中），加塞置于20℃~30℃条件下培养。
• 3、培养过程中每天用滴管沿管壁滴入冷开水，以 补充管内蒸发掉的水分，加水时勿冲在粪膜上。
• 4、5天后用肉眼或放大镜检查试管底水中 有无钩蚴。钩蚴虫体透明，作蛇形活动。如 为阴性，应继续培养至第7天；如气温太低， 可将培养管放入温水（30℃左右）中数分钟 后，再行观察。如需作虫种鉴定，可吸取培 养管底部的沉淀物滴于载玻片上镜下观察， 气温较低时可将试管放入温水（30℃左右） 中数分钟后，再作检查。
常见蠕虫卵大小比较
虫卵的颜色 无色透明：钩虫、蛲虫、短膜壳绦虫卵
淡黄色：姜片虫、日本血吸虫、片形吸虫卵
黄褐色或棕黄色：蛔虫、肝吸虫、带绦虫（胚膜）卵
褐色：鞭虫卵、长膜壳绦虫、曼氏迭宫绦虫（或淡黄 色）
金黄色：肺吸虫卵
虫卵的卵壳 厚度：厚：蛔虫、鞭虫、蛲虫、长膜壳、肺吸虫
中：血、肝、片形吸虫 薄：钩虫、姜片虫、带绦（壳易脱落）、 短绦、曼绦 均匀度：均匀：钩、蛔、姜、
直接涂片法
注意事项： • 1、涂片的厚度要掌握好，一般以透过涂片约
可辨认书上的字迹为宜。 • 2、为了提高检出率，防止漏检，要连续作三
次涂片。 • 3、检查时应注意虫卵与粪便中异物的鉴别，
虫卵都具有一定的形状和大小，且卵壳表面光 滑，具固有的色泽，有些虫卵还内含卵细胞或 幼虫。
（二）改良加藤厚涂片法 （Kato-Katz法）
自然沉淀法
操作步骤: • 1、取新鲜粪便20~30g（鸡蛋大小）置于
烧杯中，加少量清水搅拌成糊状。 • 2、经60目筛子过滤到沉淀杯中，去粗渣； • 3、将沉淀杯加满清水，静置20~30分钟。 • 4、倒去上清液，再加水后静置15分钟，
如此反复2~3次。
• 5、最后缓缓倒去上清液，静置数分钟后， 用吸管吸取沉淀物，涂片3张镜检；
• 4、透明液的配制：取100ml蒸馏水、100ml纯 甘油、3%的孔雀绿（或亚甲蓝）1ml，混匀。
• 5、亲水性透明玻璃纸：规格为30mm×25mm、 厚40µm，使用前需在透明液中浸泡24小时以上。
• 6、载玻片：规格为75mm×25.5mm，厚1.0mm～ 1.2mm。
• 7、其它：原始登记表、镊子、剪刀、记号笔、 标本盒、吸水纸、光学显微镜和一次性手套等。