5氟尿嘧啶载药微球的制备工艺及性能研究

5-氟尿嘧啶载药微球的制备工艺及性能研究。

李航袁华仲谦任杰

同济大学材料科学与工程学院纳米与生物高分子材料研究所上海200092

摘要!以PLA为载体材料以5-Fu为模型药物制备5-Fu PLA载药微球通过正交设计优化微球制备工艺另外检测了载药微球的回收率稳定性缓释性能等物理性质用紫外分光光度计测定药物含量激光粒度仪分析粒径结果表明载药微球的平均粒径为133.2 32.5n m平均包封率为11.3 5.0缓释时间延长至801001具有良好的缓释功能

关键词!正交试验法"聚乳酸"溶剂挥发法"体外缓释中图分类号!T@317"O631文献标识码!A 文章编号!1001-9731#2007$02-0298-04

1引言

5-氟尿嘧啶5-fl uor ouracil简称5-Fu是目前临床最常用的抗肿瘤药物之一已广泛用于各种实体瘤的治疗其局部浓度维持时间与疗效呈正相关1但其血浆半衰期极短I

n2

仅有0.81需频繁给药且毒副作用较大不易为患者所接受若将它制成具有一定载药量的缓释微球经注射使药物浓集于实体瘤周围可减少给药次数降低毒副作用提高疗效24

生物可降解材料聚乳酸Pol y l acti de PLA是一种具有优良的生物相容性及生物可降解性的聚合物PLA在体内代谢最终产物是CO2和~2O中间产物乳酸也是体内正常糖代谢的产物所以不会在重要器官聚集5PLA于1997年被美国FDA批准作为药用辅料并被广泛地用于药物缓控释系统而研究最多的是PLA微球

采用溶剂挥发法制备5-氟尿嘧啶的聚乳酸载药微球并对其制备条件进行优化以期获得5-氟尿嘧啶的注射粉针剂既能对药物进行缓释又能避免肿瘤药物对正常细胞的毒副作用

2试验材料

5-氟尿嘧啶常州市剑湖东风化工厂聚乳酸M W=14000g mol上海市同杰良生物材料有限公司TWeen-80丙酮二氯甲烷为AR级国药集团化学试剂有限公司

~01-3型恒温磁力搅拌器上海梅颖浦仪器仪表制造有限公司FA-1104型电子天平上海民桥精密科学仪器有限公司FD-1型冷冻干燥机北京博医康

实验仪器有限公司W ZS-50F2型微量泵浙江大学医学仪器有限公司ZRS-8C型智能药物溶出试验仪天津大学无线电厂U-1800型紫外分光光度计日本东京日立电器公司透析袋截留分子量8000 14000g mol国药集团化学试剂有限公司

3实验方法

3.15-Fu载药微球的制备工艺

采用溶液挥发法制备载药微球一定质量的5-Fu 粉末与PLA溶解在二氯甲烷C~

2C l2

与丙酮A ce-t one的混和溶液中超声使颗粒状药物均匀悬浮在油相中将油相以一定速度滴加到高速搅拌的溶有一定量TWeen-80的水相中乳化后即可得到载药微球室温下搅拌481挥发有机溶剂并在低温冰箱中121使微球固化三蒸水润洗3次以除去游离的和吸附在微球表面的药物最后冷干后得到包药微球的粉针剂3.2因素和水平的确定

选取水相中表面活性剂的含量TWeen-80con

油相的配比C~

2C l2Acet one

投药量5-Fu和水

油相体积比V

W V o4

个因素每个因素选取3个水

平选用L

934

表进行正交试验具体见表1

表1正交试验设计因素及水平

T abl e1Fact ors and l evel s of ort1o g onal desi g n ex-p eri m ents

水平因素

A

TWeen-80con

m g m l

B

C~2C l2A cet one

m l m l

C

5-Fu

m g

D

V W V o 110515521

22010101031

3301551541 3.3评估指数的测定

3.3.1粒径D的测定

将微球乳液置于超声振荡器中使其分散均匀取少量乳液于美国Beck m an Coult er公司LS230型激光粒度仪进行测试

3.3.2包封率enca p sul ati on effi ci enc y EE的测定

取适量的包药微球用二氯甲烷C~

2C l2

溶解用稀盐酸萃取3次收集上层5-Fu的稀盐酸溶液定容至

8922007年第2期38卷

。基金项目!上海市科委纳米专项资助项目0452n m059

收到初稿日期!2006-08-07收到修改稿日期!2006-10-07通讯作者!任杰

作者简介!李航1982-女辽宁锦州人在读硕士师承任杰教授从事纳米与生物高分子材料研究

50m l用U-1800型紫外分光光度计测定265n m处的吸光度A带入5-Fu在0.1mol L的稀盐酸中的标准曲线方程和包封率计算公式

包封率EE I5-Fu包药微球的实际载药量

理论载药量>100 3.45-Fu标准曲线的测定

取0.01g5-Fu粉末用0.1mol L的稀盐酸溶解并将其定容到100m l然后用移液管分别移出0.51 23456m l再定容到25m l用U-1800型紫外分光光度计测定265n m处的吸光度A用O ri g i n7.0软件线性回归后得到5-Fu在0.1mol L的稀盐酸中的标准曲线方程

3.5回收率的测定

3.5.1日内回收率

配制高中低3种浓度的5-Fu的稀盐酸的标准溶液称取适量空白微球然后将微球超声后悬浮于25m l5-Fu的稀盐酸的标准溶液静置30m i n后离心取上清液测定其在265n m处的吸光度A带入5-Fu 在0.1mol L的稀盐酸中的标准曲线方程和回收率计算方程得回收率计算平均值作为日内平均回收率计算标准差作为日内精密度

回收率=回收量

添加量>100

3.5.2日间回收率

做过日内精密度后隔5d再重复3.5.1步骤测定回收率然后计算日间平均回收率计算标准差作为日间精密度

3.6稳定性考察

选择第5组包药微球将其放置在干净的小玻璃药瓶内4和25干燥条件下至3550d测定微球包封率的变化3.75-Fu裸药释放!包药微球释药曲线

3.7.15-Fu在p~7.4的磷酸盐缓冲溶液PBS中

的标准曲线方程

测定方法同3.4中步骤

3.7.25-Fu裸药释放曲线的测定

将载药微球密封在透析袋内采用转篮法转速为

100r m i n以200m l371的p~7.4的PBS为释放介质以一定时间间隔取样同时加入等体积新鲜的释放介质保持漏槽状态样品于2651n m处测定吸光度根据标准曲线方程来计算释药量按0.51 1.5234810.51用紫外分光光度计分别测定外侧PBS中5-Fu在265n m处的吸光度带入5-Fu在p~7.4的PBS中的标准曲线方程中计算累积释药百分比

3.7.3包药微球释药曲线

精密称取正交试验法制备的第48组包药微球各两组每组50m g在溶出杯中加入200m l p~7.4的PBS其它的条件与3.7.2相似

4结果与讨论

4.1正交试验结果

按照正交试验表L

934

进行试验测定各评估指标结果见表2由表2可知从粒径的角度A2B3C1D1是最优化的实验方案与第6组A2B3C1D2最为接近结合表3的F检验4个因素的影响大小依次是C＞B＞D＞A并且5-Fu P＜0.01

具有极显著性的意义油相中C~

2C l2Acet one

的比例P＜0.05具有较显著的影响而乳化剂含量和V水V油P＞0.1对微球的粒径没有显著的影响

表2正交试验结果

T abl e2T1e results of ort1o g onal desi g n ex p eri m ents

编号

因素

A B C D

K

D!n m"

S

EE!"

111111037.31 212221228.78 313331743.47 4212311317.16 5223119212.09 623129421.40 731321803.23 8321312117.06 9332110011.58

G1133.0132.0106.0131.7S16.529.2315.210.33 G2133.0145.0111.7132.0S216.8812.6412.511.14 G3133.7122.7182.0136.0S310.6212.156.2612.56 R k0.722.376.04.3R s10.362.928.992.24

分析可知粒径随5-Fu增多而增大5-Fu药物以晶体的形式存在同时我们采用溶剂挥发法药物直接以晶体形式包裹进载体所以药物投入量越多包药微球的粒径越大另外油相的体积比也对粒径有较

992

李航等5-氟尿嘧啶载药微球的制备工艺及性能研究