恶性血液系统肿瘤的识别与多药耐药逆转的研究和应用 - 东南大学

项目名称：恶性血液系统肿瘤的识别与多药耐药逆转的研究和应用

项目完成人：王雪梅，陈宝安，熊冬生，程坚，姜晖，燕红，许文林，张海军，王飞

完成单位：东南大学，中国医学科学院血液学研究所，南京大学，江苏大学

申报奖种：科技进步奖（直报）

项目简介：

恶性血液系统肿瘤等相关生物物质的高灵敏检测与高分辨成像一直是医药卫生相关领域关注的重点，探求具有自主知识产权的特异性高、敏感性强、成本低、受试者依从性好的新型筛查方法，已成为一个亟待解决的科学和技术难题。同时，多药耐药的发生是恶性血液系统肿瘤患者复发的主要原因，目前大多数耐药逆转剂因特异性差、毒副作用强而影响其在临床的广泛应用。从传统中药中开发耐药逆转剂是我们的一大优势，且具有毒副作用小、多靶点的优点，拥有广阔的实际应用前景。本项目团队在长达十余年的时间里不断探索，在恶性血液系统肿瘤相关生物物质的高灵敏检测与高分辨成像和多药耐药逆转相关机制与应用中积累了丰富经验。

1，建立了肿瘤荧光高分辨成像标记与多模式高灵敏检测新方法：我们创新性地发现和提出了通过活体原位荧光纳米簇高灵敏成像标记来实现肿瘤等病变部位的准确靶向定位与精确标记的生物成像诊断的全新策略；同时，建立了多模式细胞/活体瞬态分析与成像新技术和可视化监测新方法，实现多维成像、化疗以及生物治疗一体化，能够实时监测并快速发现细胞及活体内生物物质的动态变化。

2，基于新型四硫富瓦烯衍生物等分子探针及复合纳米结构的非标记光学/电学检测技术建立了血液系统肿瘤等多种肿瘤细胞及相关致病微生物快速识别与高灵敏检测新技术与新方法：我们采用生物超分子识别与自组装技术，利用自主研发的四硫富瓦烯衍生物等新颖分子探针和纳米传感界面，系统研究和建立了血液系统肿瘤等恶性肿瘤细胞/组织及相关致病微生物的特异性识别检测与实时动态分析新方法。

3，发现并建立了基于纳米簇分子和功能仿生界面的肿瘤快速检测与靶向治疗的新方法：我们研究发现了贵金属纳米簇或团簇分子如新型金属碳硼烷衍生物分子探针对癌细胞具有特殊亲和力且毒性较低，能有效地识别并抑制肿瘤生长，建立了基于新型碳硼烷衍生物分子探针及其纳米结构药物识别并抑制肿瘤的新方法。

4，在人慢性粒细胞白血病急性红白血病变细胞株（K562）基础上，建立了一株具有典型多药耐药表型的人慢性粒细胞白血病急性红白血病变耐药细胞株（K562/A02），并阐明了其耐药机理，该细胞株已广泛用于白血病耐药及逆转机制研究中。

5，研究和发现了对汉防己甲素(tetrandrine,Tet)和衍生物5溴汉防己甲素

(5-Brtetrandrine,5-BrTet)及多种耐药逆转剂联合逆转白血病细胞耐药的机制，通过系统的基础研究揭示和阐明了Tet逆转耐药的性能与机制，并首次将BrTet应用于白血病细胞株, 研究了其在体内的作用效果及安全性。研究结果表明相同浓度下，BrTet的逆转耐药作用是Tet 的4倍，并且其效果安全可靠。进一步系统的研究和观察了Tet或5-BrTet单独及与其他耐药逆转剂联用对白血病细胞耐药逆转的效果。

6，研究发现纳米技术可通过有效的改善化疗药物给药途径，拮抗和抵消肿瘤细胞主动外排药物的作用从而提高了肿瘤细胞内的药物浓度，初步显示了良好和可行的应用前景。我们特别探索了新型Fe3O4等生物相容性优良的纳米材料在逆转恶性血液肿瘤中的作用机理。利用磁性纳米颗粒携载BrTet以增加其疗效，研究表明Nano-Fe3O4，BrTet等均可逆转

K562/A02细胞对DNR的耐药性，联合用药具有协同作用，并能克服目前耐药逆转剂毒副作用大的缺点，为临床应用提供理论和实验依据。

7，在我们前期研究工作基础上，进一步将Tet等药物进行临床研究，自身对照的方式对30余例难治性白血病和2例多发性骨髓瘤患者应用Tet等药物进行多药耐药逆转治疗，CR率达42%，25例临床症状和体征明显减轻，血象及生化指标明显改善，治疗有效率69%。Tet临床用于逆转多药耐药的剂量可高于常规剂量，达240mg/d，无明显毒副作用，具有一定的疗效。后进一步在江苏省肿瘤医院等十余所医院选择病例进行临床研究，临床应用效果明显。