单细胞藻类培养液的成分

单细胞藻类培养液的成分

单细胞藻类培养液的成分有下列七类。

(一)大量元素

1．氮(N)

单胞藻培养液常用的氮源有硝酸钾(KNO3)、硝酸钠(NaNO3)、尿素(NH2CONH2)、硝酸铵(NH4NO3)、硝酸钙[Ca(NO)3)2]、氯化铵(NH4C1)、硫酸铵[(NH4)2SO4]、发酵人尿……等。其中以硝酸钠和硝酸钾最常用。但不同的藻类对硝酸态氮和铵态氮的吸收利用情况是不同的，必须根据不同的藻类选择合适的氮源。

2．磷(P)

单胞藻培养液常用的磷源有磷酸二氢钾(KH2PO4)、磷酸二氢钠、(NaH2PO4)、磷酸氢二钾(K2HPO4)、磷酸氢二钠(Na2HPO4)4种。海水单胞藻培养液应用磷酸二氢钾，如用磷酸氢二钾所配培养液会产生大量沉淀。

3．铁(Fe)

单胞藻培养液常用的铁源有三氯化铁(FeCl3)、硫酸铁(FeSO4)、硫酸高铁[Fe2(SO4)3]、氧化铁(FeO)、柠檬酸铁(FeC6H5O7)、柠檬酸铁铵[Fe(NH4)3(C6H5O7)]等。其中最常用的是三氯化铁和柠檬酸铁。无机铁在水中容易形成一种胶体复合物，无可逆反应，不能为生物利用。铁也容易产生沉淀。所以尽管铁在数量上所需很少，但要满足藻类需要却很困难。要保持溶液中可利用态铁的数量，通常采用3种方法，这些方法都取得一定的成功，但都不够十分完善。

在培养液内加入土壤抽出液：由于自然有机质(一般称为腐殖酸)的作用阻止了铁的沉淀和溶胶化

(Pringsheim，1963)。

在培养液内加入某种有机酸或其盐类以形成可溶性铁化合物：已证明较有效的有柠檬酸盐和酒石酸盐：迈尔(Myers，1947)证实应用硫酸铁和柠檬酸钠能使小球藻生长十分良好。

应用络合剂：最常用的为乙二胺四乙酸(EDTA)，络合剂能防止铁和微量营养元素沉淀，并按照质量作用定律释放出足够数量的离子供藻细胞利用。

由于无机铁容易形成胶体复合物和沉淀，而有机铁，如柠檬酸铁、酒石酸铁等则是可溶性的，易为藻类细胞利用，在培养液配方中可使用有机态铁代替无机态铁。

因藻类对铁元素需要量不大，也有部分科学工作者，把铁列为微量元素。

4．钾(K)

单胞藻培养液中钾的来源常用的有氯化钾(KCl)、硝酸钾(KNO3)、磷酸二氢钾(KH2PO4)、磷酸氢二钾(K2HPO4)等。一般培养液中由于氮、磷元素的加入，也附带加入了钾营养元素。除此以外，可再加入氯化钾。

5．镁(Mg)

培养液中镁的来源，常用的是硫酸镁(MgSO4)和氯化镁(MgCl2)两种。可以单独使用其中一种，也可两种同时使用。镁元素在天然海水中的含量很大(1 200mg/L以上)，一般是足够的。

6．硫(S)

培养液中硫的来源一般是加入其他营养元素的硫酸盐类(如硫酸铵、硫酸镁、硫酸铁、硫酸高铁、硫酸锰、硫酸铜等)在获得其他营养元素的同时，也获得了硫元素。

7．钙(Ca)

培养液中钙的来源，常加入氯化钙(CaCl2)或硝酸钙[Ca(N03)2]。

8．硅(Si)

在硅藻培养液中一般都加入硅元素，硅元素的来源，常用的是硅酸钠(Na2SO3)和硅酸钾

(K2SiO3)。

(二)微量元素

微量元素的种类很多，但单胞藻培养液配方中常用的约10余种。现将其名称及一般使用的化合物列举如下：

1．硼(B) 硼酸(H3BO3)，焦性硼酸钠(Na2B4O7)。

2．锰(Mn) 硫酸锰(MnSO4)，氯化锰(MnCl2)。

3．锌(Zn) 硫酸锌(ZnSO4)，氯化锌(ZnCl2)。

4．铜(Cu) 硫酸铜((ZuSO4)，氯化铜(CuCl2)。

5．钼(Mo) 钼华(MoO3)，钼酸铵[(NH4)2O.7MoO3]。

6．钴(Co)氯化钻(CoCl2)。

7．钛(Ti) 氯化钛(TiCl2)。

8．钨(W) 钨酸钠(Na2wO4)。

9．铬(Cr) 硫酸铬钾[CrK(SO4)2]，铬酸钾(K2CrO4)。

10．镍(Ni) 硫酸镍(NiSO4)。

11．钒(V) 钒酸钠(NaVO3)，钒酸铵(NH4VO3)。

12．镉(CA) 氯化镉(CdCl2)。

13．锶(Sr) 硫酸锶(SrSO4)。

这些微量元素可以分开单项列于培养液配方中，也可以把微量元素集中配成微量元素溶液，然后按一定量加入培养液中。这些微量元素溶液有各种配方，一些常用配方将在第69～70页介绍。

藻类对微量元素的需要量和中毒量(致毒量)的差距一般很狭小，略微超过需要量即会引起中毒。微量元素也容易形成胶体复合物和发生沉淀，使藻类细胞不能利用。由于以上两种原因，致使在培养

液中保持适量的微量元素是很困难的。络合剂的应用是解决以上困难的办法之一。

良好的田园土壤抽出液一般含有藻类生长繁殖所需要的各种微量元素和溶解有机物质，且具有类似络合剂的作用。所以在培养液中加入土壤抽出液是解决微量元素供应的有效办法。

(三)辅助生长有机物质

藻类除了必须吸收无机营养之外，也吸收水中的溶解有机物质，如维生素Bl、维生素B12、生物素……等，这些物质对藻类的生长有辅助作用，称为辅助生长有机物质。

辅助生长有机物质能促进藻类细胞的生长繁殖，还能增强藻类细胞对环境的适应能力，因此受到重视，加入培养液中的辅助生长有机物质种类也愈来愈多。常用的有维生素B12、维生素B1(硫铵素)、维生素B2、维生素B6、维生素H、生物素、柠檬酸、乳精酸、烟酸，对氨安息香酸、叶酸、泛酸钙、肌醇、腐肉碱、胸(腺)间氮苯、葡萄糖、肝抽出物、酵母抽出物、贝肉汤、鱼粉、咸鱼汁……等。

辅助生长有机物质可以分别加入培养液中，也可以把多种辅助生长有机物质配成混合液，称维生素溶液，在配制培养液时按一定比例加入。

土壤抽出液除含有无机微量元素外，还含有某些辅助生长有机物质。在培养液中加入土壤抽出液实际上加入了某些辅助生长有机物质。

(四)土壤抽出液

土壤抽出液含有单细胞藻类需要的微量元素和辅助生长有机物质，培养液中加入适量的土壤抽出液，一般能获得良好效果。

土壤抽出液的制作虽然简单，但处理方法各有不同。现将常用的方法介绍如下。

1．土壤抽出液I 取土壤1kg，加纯水1 000ml，煮沸60min，在暗处放置2d，过滤，以滤液600ml加纯水400ml使用。