不同品种公猪精子活率及运动能力的比较

2010年3月(上)发情季节早期,9月份到12月初处于发情旺盛季节,12月末发情母羊陆续减少而进入发情季节末期。

试验对东北半细毛羊(绵羊)品种在延边地区7—8月份(A 组)、9—10月份(B 组)及11—12月份(C 组)的超排结果作了比较。

结果表明,3组间的卵回收数差异不显著(P >0.05);B 组的可用胚数高于A 和C 组,但差异也不显著(P >0.05)。

根据7—12月份对绵羊超排效果的比较,可知9—10月份的超排效果较好。

9—10月份是延边地区绵羊超数排
卵的最佳季节,这符合此次试验结果。

余文莉等[1]
还发现,在11月份之后当气温急剧升高或降低时,超排效果也会波动,这可能与供体的应激性内分泌变化有关。

3.2　不同超排次数对供体羊超数排卵效果的影响
试验证明不同超排次数对供体羊超数排卵效果
无显著影响(P >0.05)。

而杨梅等[2]
在研究胚胎移
植术后对供体母羊繁殖机能的影响时发现,供体羊术后对繁殖性能有一定的影响,平均恢复发情时间为24d,采集胚胎越多,发情恢复期越长。

试验第2次与第1次超排的时间间隔为39d,第3次与第2次的时间间隔为43d 。

笔者认为超排间隔的时间长短是个重要问题,随着超排次数的增加,母羊的个体情况、生理状况、环境条件及处理方法均在变化,重复超排结果间的差异不仅仅是超排处理次数造成的,而且还包括很多其他影响因素。

如果间隔时间合适,反复超排可得到正常结果,可延续多年。

参考文献:
[1]　余文莉,李树静,乌兰,等.绵羊胚胎移植技术在内蒙古的研究
和应用[J ].畜牧兽医学报,1999,30(2):11-16.
[2]　杨梅,王旭光,施巧婷,等.山羊用C I D R +FSH 超数排卵处理的
效果与卵母细胞成熟情况观察[J ].草食家畜,2003(1):26-27.
(006)
收稿日期:2009209215;修回日期:2010201220
作者简介:伏彭辉(1975-),男,讲师,硕士研究生.通讯作者:蒋如明(1955-),男,教授,硕士.
不同品种公猪精子活率及运动能力的比较
伏彭辉
1,2
,张家庆1,毛献宝1,范晓明1,蒋如明
1
(1.广西大学动物繁殖所,广西南宁530004;2.西南大学荣昌校区,重庆402460)
中图分类号:S828
文献标识码:B 文章编号:100427034(2010)03-0053-03
关键词:精子活率;平均路径速度;直线速度;曲线速度;公猪;精液
摘　要:为了研究公猪品种对精液品质即精子活率和运动能力的影响,试验采用精液分析技术对长白、杜洛克和约克夏公猪的精子活率和运动参数进行量化测定,进一步研究品种对精液品质的影响。

结果表明:杜洛克公猪的精子活率最好,长白次之,约克夏最低;就精子运动能力而言,杜洛克公猪的精子平均路径速度、直线速度、曲线速度均最高,约克夏最低。

综合结果,这三品种精液品质按照杜洛克、长白、约克夏的顺序依次降低。

精子的活率和运动能力是与精子结构和功能的完整性紧密相关的,并且可以对精子潜在的授精能力作出预测。

但是采用精液常规分析方法(s per m r ou 2tine analysis,SRA )很难准确地、客观地、快速评定精子的活率和运动能力。

试验采用计算机辅助精液分析(computer assisted s per m analysis,CAS A )技术,准确、客观地检测不同品种公猪精子活率及运动参数,以探讨公猪品种因素对精液品质的影响。

1　材料与方法1.1　仪器
英太尔17℃储存箱,亚卫畜牧新技术有限公司生产;电热恒温器(KH -G221),广州市富家电器厂
生产;精子图像分析仪(cer os s per m analyzer,ha m ilt on thorne research ),美国生产。

1.2　精液
由广西壮族自治区畜禽品种改良站提供长白公猪、杜洛克公猪和约克夏公猪新鲜精液,品质检验优良方可采用,试验时间为2008年9—12月份。

1.3　药品与精液稀释液
所用药品除氧氟沙星由哈药集团制药总厂生产外,其余均购自上海国药集团。

采用z orlesco 精液稀释液,同时添加氧氟沙星(0.05g/L ),现用现配。

1.4　精液稀释与保存
新鲜精液与稀释液在30℃进行同温稀释,然后用灭菌2mL EP 管分装成10管,缓慢降温至17℃,然后保存在17℃储存箱内。

每日定时2次轻轻摇匀精液,以保证精子呈悬浮状态。

1.5　精子活力指标
3
5
　《黑龙江畜牧兽医》科技版
采用计算机辅助的精子分析系统对升温处理后的精液在37℃恒温板分别检测精子活率(motility)、运动参数(平均路径速度、直线速度、曲线速度)。

平均路径速度(vel ocity of average path,VAP):精子在观察时间内的平均轨迹距离总和与观察时间的比值。

直线速度(straight line vel ocity,VS L):精子在观察时间内从运动起点到运动终点的直线距离与观察时间的比值。

曲线速度(curve line vel ocity,VCL):精子在观察时间内所经过的实际运动轨迹距离总和与观察时间的比值。

1.6　数据处理
试验数据采用DPS v6.55版软件统计,组间差异显著性采用方差分析(LS D法)。

试验数据均用x±s表示,n=25。

2　结果
2.1　不同品种精子活率变化趋势(见表1)
表1　不同品种对公猪精子活率的影响%
检测日期长白杜洛克约克夏0天88.6ab±2.9790.8a±3.5684.8b±3.42
1天86.6ab±2.6189.2a±3.1181.2b±3.42
2天86.2a±3.4287.8a±2.5979.8b±2.77
3天83.8a±3.9687.0a±3.6775.4b±4.34
4天82.4a±2.7084.8a±3.1172.8b±3.96
5天79.0a±4.3080.2a±3.3570.2b±2.39
6天75.8a±5.3178.8a±2.9568.2b±2.77
7天71.2b±2.7776.8a±3.8364.2c±3.11
8天60.6b±3.6568.8a±2.1751.2c±3.27 注:同行数据肩注字母完全不同表示差异显著(P<0.05),含相同字母表示差异不显著(P>0.05)。

从表1结果可知,精子活率在保存的这8d内,杜洛克公猪新鲜精液精子在保存前6d活率好于长白公猪,但差异不显著(P>0.05),杜洛克公猪精子活率一直优于约克夏,且差异显著(P<0.05),长白公猪新鲜精液精子活率与约克夏之间差异不显著;在保存第2天以后,长白明显好于约克夏,且差异显著。

总的来看,杜洛克公猪精子活率一直好于长白和约克夏公猪,并且在保存期间活率下降速度最慢。

2.2　不同品种精子平均路径速度变化趋势(见表2)
如表2所示,对于新鲜精液和保存前3d的精子平均路经速度,杜洛克、长白和约克夏呈现由好至差的特点,但组间差异不显著(P>0.05);在保存第4天以后,平均路径速度杜洛克公猪精子明显高于长白和约克夏,且差异显著(P<0.05),而长白和约克夏之间差异不显著(P>0.05)。

总体上,这3个品种(杜洛克、长白、约克夏)间精子的平均路径速度呈现逐渐降低的规律。

表2　不同品种对公猪精子VAP的影响　μm・s-1
检测日期长白杜洛克约克夏0天79.52a±3.8082.50a±4.8877.20a±4.44 1天78.10a±5.7881.26a±5.6975.66a±5.71 2天75.80a±6.0279.34a±4.2274.68a±4.33 3天74.44a±4.9277.32a±4.5972.02a±4.00 4天72.28ab±2.3175.74a±4.3268.48b±3.78 5天69.60b±2.2573.76a±4.2267.70b±1.67 6天66.22b±3.1372.20a±2.3565.42b±1.70 7天60.14b±5.3467.44a±3.2458.36b±5.63 8天54.62b±5.1661.54a±4.3649.78b±3.80　注:同行数据肩注字母完全不同表示差异显著(P<0.05),含相同字母表示差异不显著(P>0.05)。

2.3　不同品种精子直线速度变化趋势(见表3)
表3　不同品种对公猪精子VS L的影响　μm・s-1
检测日期长白杜洛克约克夏0天55.68a±1.2556.40a±1.9353.64a±2.77 1天53.14ab±2.1755.60a±2.0251.34b±1.90 2天52.48ab±1.5454.64a±2.4350.88b±1.59 3天50.06ab±2.2452.30a±1.2348.06b±3.15 4天49.20ab±2.3951.80a±1.4746.34b±3.31 5天47.42a±2.7548.32a±2.1640.94b±4.00 6天43.78a±2.8846.52a±2.6933.56b±2.90 7天40.96a±1.9444.22a±2.4227.96b±3.37 8天39.00a±2.4241.28a±1.5821.18b±2.69 注:同行数据肩注字母完全不同表示差异显著(P<0.05),含相同字母表示差异不显著(P>0.05)。

由表3可知,长白、杜洛克和约克夏公猪新鲜精液精子的直线速度差异不显著(P>0.05)。

在整个保存期间,杜洛克公猪精子直线速度好于长白,但组间差异不显著,杜洛克高于约克夏,且差异显著(P< 0.05);在精液保存前期(前4d),长白与约克夏之间差异不显著(P>0.05);但在保存后期(第5天后),长白明显高于约克夏,且差异显著(P>0.05)。

2.4　不同品种精子曲线速度变化趋势(见表4)
从表4可以看出,对于公猪精子曲线速度,虽然前期长白与约克夏之间差异不显著(P>0.05),但总体来看,杜洛克和长白都要高于约克夏,且差异显著(P<0.05),而长白与杜洛克组间差异不显著(P> 0.05)。

3　讨论
传统的精液常规分析方法对精液品质各项指标的检测结果往往受检测者的个人主观因素影响,不同检测者的经验、技术和主观判断都会使得对同一样本的检测结果出现很大差异,而且重复性差。

现在,计算机辅助精液分析是建立在显微摄像基础上的计算
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Heil ongjiang Ani m al Science　
and VeterinaryMedicine №32010
2010年3月(上)
表4　不同品种对公猪精子VCL的影响　μm・s-1检测日期长白杜洛克约克夏0天151.42ab±4.10155.66a±3.73149.74b±3.27 1天149.18ab±4.14153.34a±3.70146.80b±4.79 2天148.14ab±4.11150.40a±3.27145.18b±3.42 3天144.58a±5.87147.16a±4.02140.60b±3.46 4天142.36a±5.80144.78a±3.25135.98b±4.07 5天139.90a±5.70141.10a±3.88130.30b±4.67 6天134.34a±4.48135.60a±3.87126.94b±7.17 7天126.76a±7.12128.18a±5.13110.80b±7.19 8天116.50a±5.01120.46a±5.44101.94b±7.47 注:同行数据肩注字母完全不同表示差异显著(P<0.05),含相同字母表示差异不显著(P>0.05)。

机运动图像自动分析技术,其准确性、重复性均优于传统的精液常规分析法,并且可以快速而客观地测定出精子的密度、活率、活力等指标,重复性好、可比性高、敏感性强,同时还提供描述精子运动能力的相关参数,如平均路径速度、直线速度、曲线速度、精子头部平均侧摆幅度(ALH)、尾部鞭打频率(BCF)、平均移动角度(MAD)、直线性(L I N)、摆动性(WOB)、前向性(STR)等。

各种运动参数反映了不同的精子运动特性,其中平均路径速度、直线速度和曲线速度参数是以精子头部为参照物,测定其移动速度,即在单位时间内精子头部移动距离或相对位移,可以及时而准确地反映精子运动能力[1]。

不同品种间由于具有不同的遗传特性,其精液品质必然具有一定的差异。

试验中,杜洛克公猪的精子活率在整个保存期(8d)明显优于其他品种,长白次之,约克夏最差,这与任广志等[2]和孙德林等[3]的研究结果一致。

而且,在整个精液保存期间,杜洛克公猪精子活率下降速度是最慢的,约克夏的持续性最差,这与Boehansen G B等[4]的研究结果相符。

同时还可以看到,不同品种公猪的精子,在低温保存期间其运动能力的下降速度也有明显差异,尤其是直线速度。

正常成熟精子具有运动能力,这种功能使精子能够顺利通过雌性生殖道,最终在输卵管壶腹部完成受精过程,因此精子的运动能力与受胎率具有最直接的相关性。

同时,Fl owers W L[5]的试验数据也显示,精子的活率与精子受精率(s per m penetrati on rate)、母猪产仔率(farr owing rate)、出生活仔猪数(No.born a2 live)呈正相关。

而精子活率与精子运动能力又是息息相关的。

H irano Y等[6]根据常规体外受精(I V F)受精率的高低将检测精液分为2组(>50%和≦50%),发现无论是新鲜精液(fresh ejaculates)还是上游法分离的精子(Post-S wi m-Up s per m),其精子活率和相关运动参数(曲线速度、直线速度、平均路径速度)均是组间差异极显著。

试验数据同时显示,无论什么品种公猪,其精子活率和精子平均路径速度、直线速度、曲线速度呈显著的正相关,因此平均路径速度、直线速度、曲线速度越高,就意味着精子运动越快,授精潜力越高[7]。

由此可知,精子的活率和运动特性与其受精率具有显著的相关性,可以通过计算机辅助精液分析方法对精子活率和运动特性的检测来估测其授精能力。

4　结论
公猪品种对精子的活率和运动能力的影响是显著的,在受试的这3个品种中,杜洛克公猪的精子活率及其运动能力优于长白公猪和约克夏公猪,同时意味着其具有较高的授精潜力。

另外,不同品种间精子活率和运动能力与其精子授精力的确切相关性还需要进一步试验去证明。

参考文献:
[1]　柳建武.精子质量计算机辅助分析技术的研究[D].武汉:华中
科技大学,2007.
[2]　任广志,李新建,李德远,等.不同品种猪精液品质的季节性
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[3]　孙德林,吕小燕.不同品种不同月龄公猪精液的比较研究[J].
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