高效液相色谱法测定高麦芽糖浆中的麦芽糖含量

3. 麦芽糖标准溶液的制备
精 确 称 取 麦 芽 糖 0.750g，用 超 纯 水 溶 解 于 50mL
容 量 瓶 中 ， 得 浓 度 为 0.0150g/mL麦 芽 糖 标 准 储 备 液 。
置于5℃冰箱中备用。使用时，根据需要稀释为适当
浓度的麦芽糖标准溶液。
4. 实验方法
样品溶液的制备 称 取 0.300g高 麦 芽 糖 浆 样 品 ， 放 入 100mL容 量 瓶
目前，我国尚未制定高麦芽糖浆中的麦芽糖检 验方法的国家标准和行业标准。根据高麦芽糖浆中 的麦芽糖在高温加热和酸性情况下比较稳定，在 pH=3、120℃加热90分钟几乎不分解的特性，我们选 择 了 ATTN28、 柱 温 在 50℃ 、 60℃ 、 70℃ 、 85℃ 、 90℃、95℃等的色谱条件下进行实验 。由于柱温在 50℃ 、 60℃ 、 70℃ 时 的 分 离 效 果 不 明 显 ， 在 90℃ 、 95℃ 时 分 离 情 况 又 呈 下 降 趋 势 ， 因 此 我 们 最 终 确 定 了 ATTN28、 柱 温 85℃ 的 色 谱 条 件 为 最 佳 。 利 用 外 标 法，把麦芽糖标准溶液和被测样品溶液在相同的色 谱条件下分别单独测定，把得到的标准溶液色谱峰 面积与被测组分的色谱峰面积进行比较求得被测组 分的含量。在实验室内进行了测定其回收率、相关
97.0
图 1 麦芽糖标准色谱图 图 2 高麦芽糖浆样品色谱图
三、结束语 利用示差检测器，采用高效液相色谱法测定高 麦芽糖浆中麦芽糖的含量，方法简便，定性、定量 准确，分离效果较好，无干扰物质存在，重现性好， 回收率高。同时，由于本方法采用的是外标法，在 实验中可以根据标准样品的出峰时间的不同，较好 地区别其它糖类的含量，且出峰的分离效果显著。 具有操作简便，针对性强的特点，适合对大量样品 分析，尤其适用于企业对采购专一原料的质量控制。 （致谢 在完成此论文期间，笔者得到上海市出入境检 验检疫局的郭德华老师、唐毅峰老师的热情帮助和 耐心指导，特此表示衷心的感谢。） E
灵敏度设定范围：1.0x10- 6- 5.0x10- 4 RIU 示差范围：1.00～1.75RIU 线性动态范围：5×10- 3～5×10- 9RIU 噪 声：＜2×10- 8RIU ATTN：28
28 ssm ／ 2009 ／ 7
学术 STUDY S S M
进样体积：20uL
色谱工作站：浙大N2000工作站
SSM STUDY 学术
高效液相色谱法测定
高麦芽糖浆中的麦芽糖含量
［提要］本文将介绍用高效液相色谱法 （HPLC） 测定高麦芽糖浆中麦芽糖的含量。样品溶于 水 中 ， 摇 匀 ， 通 过 0.45u 微 孔 滤 膜 ， 滤 液 用 于 分 析 。 色 谱 柱 为 糖 柱 ， 流 动 相 为 超 纯 水 ， 以 示 差 折 光 检 测 器 测 定 ， 外 标 法 定 量 。 方 法 的 线 性 范 围 为 300mg/L~1500mg/L， 线 性 回 归 方 程 为 A=344297643. 97385c+19620. 66383 ， 相 关 系 数 r=0. 99885， 回 收 率 为 91. 0% ~97. 0 % 。 方 法 简 便 ， 灵 敏 度高，重现性好。
得线性回归方程A=344297643.97385c+19620.66383，相
二、结果
关系数r=0.99885，线性范围为300mg/L~1500 mg/L。
1. 色谱图
3. 精密度试验
在色谱图条件下，测定麦芽糖标准溶液，得色
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表1为精密度试验结果统计表 （%）
谱图，如图1所示。在色谱条件下，按
表1
实验方法测定高麦芽糖浆样品溶液，
图 3 加入麦芽糖标准品的高麦芽糖样品色谱图
2. 工作曲线
中，用超纯水稀释至刻度，充分混合均匀，并通过
在色谱条件下，测得系列浓度的麦芽糖标准工作
0.45u滤膜 （或以3000rpm离心30min），取滤液 （或上 液，以峰面积A对浓度c进行线性回归，绘制工作曲线，
清液） 作HPLC分析。以峰面积外标法定量。
（作者单位：上海冠生园食品有限公司）
ssm ／ 2009 ／ 7 29
4. 回收率试验
示。
表2为回收试验结果 （n=4）
表2
试验次数 1（%） 2（%） 3（%） 4（%） 平均（%）
添加量
回收率
25mg/100mL 90.2 84.9 95.9 93.1
91.0
30mg/100mL 91.5 92.5 88.2 92.5
91.2
40mg/100mL 94.4 97.8 100 95.9
文/ 陈弘 倪柳
麦芽糖是以淀粉或淀粉质为原料，经液化、糖 化精制而成的，主要成分为麦芽糖的产品。按麦芽 糖含量分为四类：麦芽糖饴、麦芽糖浆、高麦芽糖 浆、结晶麦芽糖。高麦芽糖浆是以淀粉为原料，经 酶水解所制成的一种葡萄糖含量低、麦芽糖含量高 的糖浆，其成分主要为麦芽二糖即麦芽 糖 (≥50%)、 葡萄糖、麦芽三糖、麦芽四糖及四糖以上等。
测定次数 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 平均 CV
得样品色谱图，如图2所示。在色谱条 测定值 27.15 27.13 26.53 26.49 26.94 26.70 26.68 26.99 27.47 27.87 27.05 27.00 1.53
件下，按实验方法测定加入麦芽糖标
准工作溶液后的高麦芽糖浆，得样品色谱图，如图3所
性、精密度等试验工作，从而建立了测定高麦芽糖 浆中麦芽糖含量的高效液相色谱法。
一、实验部分 1. 主要仪器与试剂 高 效 液 相 色 谱 仪 ： 配 有 410 示 差 检 测 器 （美 国 Waters公司）； 麦芽糖标准品：纯度大于99% （美国SUPELCO提 供）； 超纯水； 针头式过滤器：0.45u，直径13mm。 2. 色谱条件 色谱柱：Sugar—Park T72011A09 P/N85188 Waters 流动相：超纯水 流速：0.5mL/min 柱温：85℃ 示差检测器：