草莓脱毒苗

1、意义与范围

丹东市是全国最大的草莓生产基地，草莓生产技术总体水平在国内处于领先地位，但总体单位生产效益还远不如发达国家高，最突出的瓶颈问题是种苗普遍感染病毒，与全国一样属带毒生产。感染病毒的草莓比未感染病毒的草莓长势弱、抗性差、产量明显下降，果品品质与商品性状变劣，严重影响了这一名特优种植业的稳步发展。

草莓脱毒组培技术是目前国际上仍普遍应用的高新实用技术，即通过花药组织培养、微茎尖组织培养等技术脱去病毒病原，使草莓种苗恢复品种原种优良种性，以达到优质、高产之目的。本技术报告以项目单位正在实施应用的微茎尖组织培养技术规定了草莓茎尖脱毒组培种苗繁育技术规范的选择优良品种、生产脱毒组培瓶苗、培育原原种苗、培育原种苗、繁育良种苗规程。应用范围适用于丹东地区。

2、草莓茎尖脱毒组培种苗繁育技术工艺过程

品种定向→选取田间健壮株匍匐茎尖或单株→清洗杀菌消毒→超净工作台解剖镜下剥离茎尖→接入接种培养基培养→继代增殖培养→瓶内生根→营养钵培育原原种苗→田间扩繁原种苗→田间扩繁良种苗→生产利用。

3、选择优良品种生产脱毒组培瓶苗

3.1选择优良品种

3.1.1日光温室：目前适宜品种为杜克拉、图德拉、章姬、枥乙女、丰香、幸香、鬼怒甘、宝交早生、安娜等。

3.1.2早春大棚：目前适宜品种为卡尔特一号、艾尔桑塔等。

3.1.3露地生产（加工型）：目前适宜品种为哈尼、森嘎那、达善卡等。

3.2生产脱毒组培瓶苗

3.2.1试验室要求

3.2.1.1无菌室

无菌室应设有隔离室，面积不小于10m2，墙壁光滑平整，地面平坦无缝，室内安装紫外线灯和超净工作台。

3.2.1.2试验室

试验室面积应不小于30m2，并应具备各种生产用化学药品、玻璃器皿、冰箱、恒温箱、普通天平、分析天平及实验平台等设施。

3.2.1.3培养室

培养室面积应不小于20m2，放置多层钢制培养架，采用日光灯补充光照，室内常年保持20-27℃，相对湿度保持在50-60%，每天光照12-14h。

3.2.1.4洗涤灭菌室

洗涤灭菌室面积应不小于10m2，有充足自来水，并配有高压灭菌锅、制作培养基平台及放置培养瓶的瓶架。

3.2.2设备要求

应具备高压灭菌锅、冰箱、培养皿、镊子、剪刀、普通天平、分析天平、双目解剖镜、显微镜、超净工作台、接种刀、恒温培养箱等设备。

3.2.3培养基制作

基本培养基为MS培养基。其中附加吲哚乙酸（IAA）4PPM，6-苄氨基腺嘌呤（6-BA）2PPM，激动素（KT）2PPM。蔗糖30g/L，琼脂6g/L，PH值6.5。在1个大气压下，高压灭菌20分钟。

3.2.4外植体接入瓶内增殖培养完成的瓶内苗

采草莓匍匐茎尖或单株心茎，用自来水（符合饮用水标准）冲洗后在超净工作台上用消毒剂进行杀菌消毒，然后放在双目解剖镜下切0.2-0.6mm的生长点放入盛有培养基的瓶

中，接种后的玻璃瓶放在培养室中培养。室温25-28℃，每日光照12-14h，照度2500-3000lx，相对湿度50-60%。经过两个月左右培育，产生小芽丛苗，在超净工作台上用镊子、剪刀、培养皿，分隔成3-4株在一起的小芽丛，再放入新培养基瓶中培养，每瓶3-4株芽丛，以后每隔25-30天继代一次，继代时间不应超过二年。

3.2.5培养健壮的瓶内苗

当瓶内苗增殖到需要数量时，将芽丛分成单株，每株应达到2-3片叶，放置在生根培养基的瓶内生根，当生有3-4条根、根须长度达到0.5cm时，应从瓶内移栽到营养钵中。

4、温室培育原原种苗

4.1环境条件要求

4.1.1培养土应选用通透性好、富有一定营养成分、消除土传病、虫、草害的人工复合培养土。

4.1.2种苗繁育室应设有防虫网。

4.2培育方法：用镊子夹住草莓苗从培养瓶中轻轻拉出，在水中清洗附带在根系中的琼脂，放入加有水的容器内防萎缩，然后拿到温室植入营养钵（选用5cm×5cm营养钵，提前装入复合培养土浇透底水待用）。扦插时根须全部入土，生长点露出土表。扦插后让营养钵底部吸水，使根系与营养土紧密结合，相同品种并排置放于低平宽垅上，起小拱膜保温保湿。每天或隔天浇水，保持营养钵内土壤持水量70-80%，经过15天后去掉薄膜。生出瓶外自然叶后，可适量叶面追施复合肥（N6.5%、P6%、K19%）。经过二个月后，培养到原原种苗质量标准。

4.3原原种苗质量标准

原原种苗应具有三片以上的新叶，根须长度应达到3cm以上且不少于5条。

4.4原原种苗运输

原原种苗运输应采用带钵运输，搬运时轻拿轻放，运到繁殖地后立即定植。

4.5原原种苗繁育单位要求

原原种苗繁殖应由有脱毒生产能力的单位负责繁育。

5繁育原种苗

5.1选地、整地、施肥

选择排灌方便、通透性好、非重茬、土壤PH值微酸性、富含有机质的地块做繁苗田。定植前7天，深翻地两遍，深度为30cm，同时每667m2施入甲拌磷2.5kg、敌百虫2kg （碾碎）、腐熟农家肥5000kg、二铵15kg、硫酸钾10kg，旋地前均匀撒于地表，随旋地翻到土里。

5.2定植及管理

4月初定植，畦宽1.5m，沟深25cm，单行栽植，株距50cm，667m2保苗800-900株。钵中的组培苗带土定植，立即浇水。缓苗后，叶面喷施敌百虫1000倍液、尿素0.2-0.3%。并随时除草，除草采用拿捕净、拉索混喷，同时结合人工除草。5-7月除了用杀虫剂清除叶上和部分地面害虫外，还要利用毒饵诱杀小地老虎等害虫。土壤缺水应以喷灌为主，湿度保持在85%左右。

定植后，匍匐茎开始抽生，要及时领蔓、压土，要求同一方向生长。5月初，将母苗所繁第一子苗匍匐茎切断，刨坑在生根苗5cm处施肥，667m2施尿素10kg、复合肥10kg。以后视种苗缺肥状况，适量水施或叶面喷施追肥。7月份进入高温季节后，以培育壮苗为主。

5.3壮苗质量标准

苗高15-20cm，根茎大于或等于φ0.7cm，每株不少于4片叶，长于5cm的须根8条以上，没有病虫害症状。

6、繁育良种苗