常见自身免疫性疾病及其免疫检测

均质型
抗dsDNA抗体 抗ssDNA抗体
抗组蛋白抗体(histone) 抗核小体抗体(nucleosome)
周边型
可见于胶原病、PBC、CAH等患者
核点型（DOTS）
抗着丝点型
见于SLE、SS、PBC、风湿病
PSS局限型标志抗体
抗原纤维蛋白型
抗RNA多聚酶Ⅰ型抗体
仅见于5%～10%的PSS，男性高于女性
2. 以相关疾病命名，如抗 Scl-70、抗 SS-A、 抗SS-B 抗体等； 3. 以抗原的部位命名，如抗核仁抗体、抗线 粒体抗体、抗核膜抗体、抗细胞浆抗体等； 4. 以抗原的化学名称分类命名，如抗DNA、抗 RNP、抗组蛋白抗体,抗核小体抗体等。
抗核抗体检测方法
间接免疫荧光法 （indirect immunofluorescence, IIF）
高滴度存在于自身免疫性疾病患者
与疾病的活动性相关 参与免疫病理性损伤
自身免疫性疾病的主要实验检测
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自身抗体 免疫球蛋白 补体 淋巴细胞 细胞因子
自身抗体研究发展简史
1948年 Haragraves等发现 LE 细胞现象 1957年 Holborow等应用IIF检测ANA 1961年 Beck等发现ANA不同荧光染色模型 60–70年代IIF、ID、CIE应用新的自身抗体 1979年 Towbin等应用免疫印迹技术检测自身抗体 80年代IB、RIP应用蛋白多肽水平认识自身抗原
检测自身抗体常用的方法
间接免疫荧光法（IIF） ELISA 免疫印迹法（Western-blot） 酶免疫斑点法
二、抗核抗体的检测与应用
抗核抗体::以真核细胞（如HEp-2细胞、
肝细胞）的各种细胞核成分为靶抗原所 检测的自身抗体的总称。
抗核抗体谱
抗核抗体谱的分类和命名
1. 以首先检出该抗体的患者名字命名，如抗 Sm、 抗Sa 抗体等；
临床常检测的抗ENA抗体谱主要包括： 抗Sm 抗U1-RNP 抗SSA 抗SSB 抗Jo-1 抗Scl-70 抗rib-P蛋白
抗可提取性核抗原（ENA）抗体
ENA检测方法
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• AnuA的检测通常采用ELISA检测法。 • AnuA具有同抗ds-DNA抗体相同的诊断特异性， 可达到95%，在系统性硬化（SSc）病中可有 20%～50%低浓度阳性率，其他自身免疫性疾
病中该抗体均为阴性。
• AnuA的表达与SLE病情活动分数相关。
三、抗ENA抗体谱的检测与应用
抗ENA抗体谱:可提取核抗原抗体的总称
抗核小体抗体
核小体（nucleosome）是真核生物细 胞核染色质的基本单位 。凋亡细胞是核 小体的重要来源，当SLE患者的吞噬细胞 对凋亡细胞的清除能力受损或降低，导 致核小体在患者体内大量存积，激活B细 胞产生抗核小体抗体（Antinucleosome antibody ,AnuA）。
检测及应用 检测及应用
SLE标志抗体
原发性胆汁性肝硬化标志抗体
抗Jo-1抗体
抗高尔基体抗体
多发性肌炎（PM）标志抗体
偶见于SLE和SS
抗肌动蛋白抗体
见于自身免疫性慢性活动型肝炎
抗双链DNA抗体
• 抗dsDNA抗体与细胞核DNA（外围区）脱 氧核糖磷酸框架结合。
• 抗dsDNA抗体是SLE患者的特征性标志抗 体。其抗体滴度与疾病的活动程度有相 关性，抗体滴度的动态测定为监控治疗 提供了有效的实验室手段。
溶酶体型 颗粒型
细胞角蛋白型
原肌球蛋白型 纽带蛋白型
纺缍丝型
中间体型 PCNA型
核点型(dots)
斑点型（nRNP/Sm）
斑点型（SSA/SSB）
高滴度的抗U1-nRNP为MCTD的特征。 抗Sm抗体对SLE具有高度特异性。
抗SSA最常出现于SS及新生儿红斑狼 疮 （100%）。抗SSB抗体几乎仅见于 女性，可出现于SS和SLE。
仅见于硬皮病患者，阳性率为4%
抗PM-Scl（PM-1）抗体
见于重叠综合征（多发性肌炎PM /皮肌炎 DM / 弥漫性PSS ）
抗Scl-70型
PSS 弥漫型的标志抗体
增殖细胞核抗原Ⅰ型
（PCNA）
SLE特异性抗体，与发生弥漫性增殖性肾小球肾炎相关
抗核糖体P蛋白（rib-P）抗体
抗线粒体抗体（AMA）
酶免疫斑点法
ELISA
（Western-blot）
免疫印迹法
间接免疫荧光法示意图
荧光标记抗体
病人血清（待检抗体） HEp-2细胞 肝组织切片
IIF检测ANA荧光染色模型
细胞核
均质型 斑点型
细胞浆
核糖体型 线粒体型
细胞骨架
肌蛋白型 波形纤维蛋白型
细胞周期
中心体型 纺缍体型
核仁型
着丝点型 周边型
高尔源自文库体型
检测方法及应用 检测方法及应用
• 间接免疫荧光检测，是目前国内外临床常 规检测抗dsDNA抗体最常用的方法。 • 抗dsDNA抗体诊断SLE的特异性可达95%～ 100%，但其敏感性仅为30%～50%，因此抗
dsDNA抗体阴性不能排除SLE的诊断。
抗dsDNA抗体
SLE特异性抗体，与病情活动度相关。
1987年DNA基因重组技术开始应用自身抗体研究
近十年应用分子生物学技术
常检测的自身抗体
• • • • • • • 抗核抗体（ANA） 抗可提取性核抗原抗体（ENA） 抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA） 类风湿因子（RF） 抗角蛋白抗体（AKA） 抗环瓜氨酸肽抗体（抗CCP抗体） 抗心磷脂抗体（ACLA）
精品课件
常见自身免疫性疾病的自身抗体 检测
自身抗体（autoantibody）
是指抗自身细胞内、细胞表面和细胞外抗 原的免疫球蛋白，是自身免疫和自身免疫病重 要特征之一，某些自身免疫病伴有特征性的自 身抗体(谱) 分类: 脏器特异性自身抗体 脏器非特异性自身抗体
一、自身抗体的特性
自身免疫性疾病的重要标志
常见自身免疫性疾病的标志抗体
标志抗体 dsDNA Sm SSB 着丝点抗体 Scl-70抗体 AKA、抗CCP抗体 Jo-1抗体 高滴度RNP抗体 肝肾微粒体抗体（LKM-1） 平滑肌抗体（SMA） AMA（M2） 相关疾病 SLE SLE SS PSS（局限型） PSS（弥漫型） RA PM/DM（进行性系统性硬皮病） MCTD Ⅱ型自身免疫性肝炎 Ⅰ型自身免疫性肝炎 PBC