金银花新品种引种选育报告
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金银花新品种引种选育报告
摘要:对桂林市从湖南省引进的金银花品种湘蕾进行了田间生长状况调查,测定了湘蕾叶片中绿原酸的含量。结果表明,湘蕾在桂林市生长良好,而且出现了一年开花2次的株系,叶片绿原酸含量也比较高。为桂林市下一步选择金银花快速生长材料、开展金银花丰花新品种选育、开辟绿原酸提取新途径、加快金银花产业化发展提供了有力支撑。
关键词:金银花;品种;选育;绿原酸;桂林市
中图分类号:s567.7+9;s502.2;q946.82+7(673gl)文献标识码:a 文章编号:0439-8114(2013)02-0374-04
金银花具有清热解毒之功效,在中医上为常用中药。近年来金银花栽培面积大幅增加,仅湖南省的金银花品种湘蕾(lonicera macranthoides hand.-mazz.cv. xianglei)的种植面积就超过了0.27万hm2,产品畅销国内外市场[1]。金银花主要的特征成分和有效成分是绿原酸[2],研究表明,绿原酸具有广泛的药理功效和生物活性,对人类的消化系统、血液系统和生殖系统等病症的预防具有不错的效果[3-6]。目前对绿原酸应用推广的研究正逐渐拓展至食品、保健和日用化工等多个领域[7],而关于金银花的绿原酸提取主要集中在花中绿原酸的含量上,很少涉及到植物的其他部位。广西壮族自治区本地所产的金银花大多数在中药里归属山银花,金银花和山银花在很多方面存在着一定的差异[8,9]。试验以从湖南省引种到桂林市的湘蕾(在中药里归属山银花)[10]为研究
对象,试图从湘蕾的生长状况来了解桂林市的生态环境对发展湘蕾的影响,并从中选择表现优异的株系作为适合当地推广的金银花新品种候补对象,同时对湘蕾叶片中绿原酸含量进行了初探,现将结果报告如下。
1 材料与方法
1.1 材料
供试材料来自于桂林市下銮塘村金银花基地种植的湘蕾。仪器主要有carry50型紫外可见分光光度计(美国varian公司)、kq-500型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)、dhg-9036a型电热恒温鼓风干燥箱(上海精宏实验仪器有限公司)。试剂(药品)主要有95%乙醇、绿原酸标准品(纯度≥97%,sigma公司),所用水为二次蒸馏水。其他所用试剂均为分析纯。
1.2 田间生长调查
1.2.1 第一次筛选 2010年春季从湖南省引种到桂林市的湘蕾幼苗大约为12万株,栽培在下銮塘村金银花基地12个小区里,每个小区面积大约有2.27 hm2,株行距1.5 m × 1.5 m,12个小区合计27.00 hm2。移栽当时由于对种植环境的差异考虑不周,导致部分小区在2011年受旱或受涝,因此在初次筛选后,确定了长势良好的2个小区,大约有2万株。
1.2.2 第二次筛选对入选的2个小区里的湘蕾植株进行第二次筛选,选取生长良好、无病虫害的健壮植株,田间按排行和株数进行编号,记录所调查的定点位置,结果入选的有600株。每间隔10
d测量1次所选植株的株高、新生侧枝的数目、树冠最大伸展直径,并对花簇进行初步采集,记录花簇数量。从2011年6月开始,每隔一定时间测定所选植株的生长状况;经过3次测定并整理有关数据,进一步确定出155株湘蕾植株。
1.2.3 第三次筛选对复选的155株湘蕾植株在生长期继续跟踪调查,每间隔10 d测量1次植株的株高、新生侧枝的数目、树冠最大伸展直径,并对花簇进行采集,记录花簇数量,共进行3次。
1.3 叶片中绿原酸含量的测定
1.3.1 绿原酸标准曲线的制作准确称量干燥处理后的绿原酸标准品10.00 mg,置于50 ml容量瓶中,用70 %的乙醇定容至刻度,配成标准品溶液母液,以此标准液母液为基准。分别移取0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8 ml母液置于25 ml容量瓶中,并用70 %乙醇定容至刻度,然后用紫外分光光度计于波长330 nm 处测定各浓度的吸光度。以浓度为横坐标、以吸光度值为纵坐标,作出绿原酸的标准曲线[11,12]。
1.3.2 叶片中绿原酸含量的测定对田间编号的湘蕾植株从其中选取生长具有优势且无病虫害的39株样株(分别是1-2、1-5、2-4、2-10、3-10、3-20、4-9、4-16、5-7、5-11、5-13、5-17、6-5、6-7、6-11、6-20、8-2、8-8、8-9、10-7、10-8、11-4、12-6、12-8、12-9、16-2、20-1、20-3、21-2、22-1、22-2、28-6、34-2、40-1、52-1、5001、5002、5003、5004),分别剪下其植株的老叶(二年生)、新叶(一年生)各10片,然后分别置于自制纸质封袋内贴签
带回,立即用直径为6 mm的打孔器在叶脉两侧均匀取小圆片样材,每个样株新叶和老叶小圆片随机各取10片,3片为一组置于恒温鼓风干燥箱内60 ℃恒温干燥48 h,3次平行;干燥后放入干燥器内冷却至室温,然后称量每3片叶的重量。将干燥后的叶片按株号分别放入具塞试管中,加入75%乙醇10 ml,于60 ℃恒温水浴2 h,取出试管摇匀,吸取上清液4 ml,测定吸光度,3次平行。在标准曲线上查出对应的绿原酸含量。绿原酸的提取率=(3片叶的绿原酸含量/3片叶的重量)×100%。
2 结果及分析
2.1 湘蕾的生长状况
2.1.1 植株的生长通过连续3次调查,在155株湘蕾植株中发现有56株在花的数量和植株的生长能力上占有优势,将其中在单项生长指标上领先的前10株分别列于表1、表2、表3中。其中,株高生长最快的植株为编号20-1,其日均生长高度为2.30 cm(表1);新生侧枝数最多的植株为1-5,其在3次测量中共新生出7个侧枝(表2);树冠直径扩展最快的植株为1-10,其日均树冠直径扩展为2.45 cm(表3)。通过对株高生长速度、新生侧枝数量、树冠直径扩展大小等3项指标的综合比较,发现4-2(日均生长高度2.25 cm,新生侧枝总数3支,日均树冠直径扩展1.70 cm)、20-1(日均生长高度2.30 cm,新生侧枝总数3支,日均树冠直径扩展1.40 cm)和23-1(日均生长高度1.90 cm,新生侧枝总数5支,日均树冠直径扩展1.60 cm)这3株植株在3项指标中都具有明显