双波长分光光度法测定高粱中的直链淀粉和支链淀粉

高粱是酿酒工业的原料之一，在我国被广泛地应用于 白酒生产。高粱籽粒淀粉含量及其直链淀粉和支链淀粉 的比率与酿酒品质和产量有重要关系，选育优良的酿酒 型品种有重要的经济价值【１】。传统检测方法（国标法）操作 麻烦，不好掌握，因此需要寻找一种准确、简便测定高粱中 直链淀粉和支链淀粉的新方法。
淀粉含量测定常采用旋光法ｔ３］。传统直链淀粉的测定 方法主要有电流滴定法、电压滴定法和凝胶过滤法等，但 应用最为普遍的是碘比色法。实验以ＧＢ７６４８．８７为基础， 根据直链淀粉遇碘形成蓝色复合物、支链淀粉遇碘形成 紫红色复合物的显色特征，运用双波长分光光度法，１次 处理，即可得到直链淀粉、支链淀粉和淀粉３个指标。 １材料与方法 １．１实验材料
双波长测定高粱中直链淀粉和支链淀粉含量的新方法。结果表明，新方法准确性高、重复性好、效率高，工作量小，适于批量分析。
关键词：直链淀粉；支链淀粉；双波长 中图分类号：０６５７．３ 文献标识码：Ａ
文章编号：０２５４－５０７１（２００８）２１－００８５－铊
Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ａｍｙｌｏｓｅ ａｎｄ ａｍｙｌｏｐｅｅｔｉｎ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ ｓｏｒｇｈｕｍ ｂｙ ｄｕａｌ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ｍｅｔｈｏｄ
分析与检测
中 国 酿造
２００８年第２１期 总第１９８期 ·８５·
双波长分光光度法测定高梁中的直链淀粉和支链淀粉
范明顺，张崇玉·，张琴，李晓飞
（贵州大学生命科学学院，贵州贵阳５５００２５）
摘要：直链淀粉和支链淀粉含量及其比例是高粱品质的重要指标。高粱是酿酒的主要原料之一，高粱品质的检测具有十分重要的
意义。为此需要寻找一种快速、简便、准确测量高粱中直链淀粉、支链淀粉、淀粉含量的方法。文中以ＧＢ７６４８．８７为基础，研究出一种运用
ｗ铘ａｐｐｅａｒｅｄ ｖｉｓｃｏｓｉｍｅｔｅｒ．Ｉｔ ｗａｓ ｆｏｕｎｄ ｔｈａｔ １－２ ｐｅａｋ ｏｆｖｉｓｃｏｓｉｔｙ
ｗｉｔｈ ｉｎｃｒｅｍｅｎｔ ｏｆａｌｃｏｈｏｌ ｃｏｎｃｅｎｔｍｔｉｅｎ，ｗｈｉｃｈ ｈａｓ ａ ｇｏｏｄ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｗｉｔｈ Ｃｈｉ－
ｎＣＳＣ ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ ｌｉｑｕｏｒ．Ｔｈｅ ｅｘｐｌａｎａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｐｈｅｎｏｍｅｎｏｎ Ｗｅｔ＇ｅ ｇｉｖｅｎ ｉｎ ｔｈｉｓ ｐａｐｅｒ．Ｉｎ ａｄｄｉｔｉｏｎ，ｔｈｅ ｖｉｓｃｏｓｉｔｉｅｓ ｏｆ ｓｏｍｅ ｆａｍｏｕｓ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｌｉｑｕｏｒ
ｆｉｑｕｏｒ ｆｒｏｍ ａｆｆｔａ凹ｏ ｐｏｉｎｔ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｆｉｑｕｏｒ；ｅｔｈａｎｏｌ／ｗａｔｅｒ ｓｏｌｖｅｎｔ ｓｙｓｔｅｍ；ｖｉｓｃｏｓｉｔｙ
黏度作为白酒的一个重要宏观物理性质，它与白酒的 风味表现等有着十分密切的联系。以前，对白酒黏度的测 定只是将其作为某种附加特性，而白酒领域的研究工作 大多局限于对生产工艺的改进、剖析和白酒微量成分分 析，而很少从白酒的宏观物性去思考其与白酒香型、口感、 嗅觉等的联系。本文主要通过系统测定的方法来研究中 国白酒和模型酒的基本现象和规律，从而对白酒的液体 结构和感官特征作出某种理论解释。 １材料和方法 １．１仪器
淀粉含量；直链淀粉＋支链淀粉
２结果与分析 ２．１测定波长的确定
直链淀粉与碘作用产生纯蓝色，支链淀粉与碘作用生 成紫红色。用２种淀粉的一定浓度的溶液分别与碘反应 （本文中以标准曲线中浓度最大的直链淀粉和直链淀粉 溶液扫描），然后在同一个坐标系内扫描（波长４００ｒｉｍ－ ９００ｒｉｍ），见图１。选择波长必须满足２个基本条件：一是共 存组分在这２个波长应具有相同的吸收值，使其浓度变化 不影响到测定值。二是待定组分在这２个波长的差值应足 够大［２１。根据上述原理和扫描的图谱，确定直链淀粉的测 定双波长为６２０ｒｉｍ和４７９ｎｍ，支链淀粉的测定双波长为
样品中的含量为：
直链淀粉＝Ｙｌ ｘ５０ ｘ １００／５／１００ ｘ（１．Ｗ１－ｗ２）ｘ １００％ 支链淀粉＝Ｙ２ ｘ ５０ ｘ１００／５／１００ ｘ（１－Ｗｌ－Ｗ９×１００％
若计算样品干重中的含量
直链淀粉＝Ｙｌ ｘ５０ｘ １００／５／１００ ｘ（１．Ｗ９ ｇ １００％
支链淀粉％ｘ ５０ ｘ１００／５／１００ ｘ（１－Ｗｇｘ １００％
直链淀粉标准曲线：吸取ｌｍｇ／ｍＬ直链淀粉标准溶液 ０．３ｍＬ、０．５ｍＬ、０．７ｍＬ、０．９ｍＬ、１．１ｍＬ、１．３ｍＬ分别放入６只 不同的５０ｍＬ容量瓶中，加入蒸馏水３０ｍＬ，以０．１ｍｏｌ／Ｌ ＨＣｌ溶液定容。静置２０ｍｉｎ。
支链淀粉标准曲线：吸取ｌｍｇ／ｍＬ支链淀粉标准溶液 ２．０ｍＬ、２．５ｍＬ、３．０ｍＬ、３．５ｍＬ、４．０ｍＬ、５．０ｍＬ分别放入６只 不同的５０ｍＬ容量瓶中，加入蒸馏水３０ｍＬ，以０．１ｍｏｌ／Ｌ ＨＣＩ 溶液调ｐＨ值为３．５左右，加入碘试剂０．５ｍＬ，并用蒸馏水 定容。静置２０ｍｉｎ。
２．２样品回收率测定试验
表１样品回收率测定结果 Ｔａｂｌｅ １．Ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｒａｔｅｓ
趔 倒 呆
螫
波长，ｎｍ 图１直链淀粉和支链淀粉扫描图谱 Ｆｉｇｕｒｅ １．Ｔｈｅ ｓｃａｎｎｉｎｇ ｍａｐ ｏｆ ａｍｙｌａｓｅ ａｎｄ ａｍｙｌｏｐｅｃｔｉｎ
由图２可以看出，直链淀粉和支链淀粉与双波长的差 值的相关系数分别为０．９９９６和０．９９９１，都达到了极显著水 平，说明用双波长法绘制的标准曲线线性非常好。
ＦＡＮ Ｍｉｎｇｓｈｕｎ，ＺＨＡＮＧ Ｃｈｏｎｇｙｕ。，ＺＨＡＮＧ Ｑｉｎ，ＬＩ Ｘｉａｏｆｅｉ
（Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆＬｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｇｌｌｉｚｈｏｕ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｆｙ，Ｇｕｉｙａｎｇ ５５００２５，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｍａｃｔ：Ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ａｎｄ ｔｈｅ ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎ ｏｆａｍｙｌｏｓｅ ａｎｄ ａｍｙｌｏｐｅｃｔｉｎ ａｌｅ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｉｎｄｅｘｅｓ ｏｆｓｏｒｇｈｕｍ，Ｓｏｒｇｈｕｍ ｉｓ ｍａｊｏｒ ｌａｗ ｍａｔｅｒｉａｌｓ ｉｎ ｂｒｅｗｉｎｇ ｉｎｄｕｓｔｒｙ．Ｔｈｅｒｅｆｏｒｅ，ｉｔ ｉｓ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ａ ｒａｐｉｄ，ｓｉｍｐｌｅ ａｎｄ ａｃｃｕｒａｔｅ ｍｅｔｈｏｄ ｏｆ ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ａｎｄ ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎ ｏｆ ａｍｙｌｏｓｅ ａｎｄ ａｍｙ－ ｌｏｐｏｅｔｉｎ ｉｎ ｓｏｒｇｈｕｍ．Ａｎ ａｓｓａｙｉｎｇ ｍｅｔｈｏｄ ｏｆａｍｙｌｏｓｅ ａｎｄ ａｍｙｌｏｐｅｃｔｉｎ ｕｓｉｎｇ ｄｕａｌ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ｗａｓ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ ＧＢ７６４８·８７ ｉｎ ｔｈｉｓ ｐａｐｅｒ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｎｅｗ ｍｅｔｈｏｄ ｈａｄ ａ ｇｏｏｄ ｒｅｐｅｔｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ａｐｐｌｉｅｄ ｆｏｒ ａｎａｌｙｚｉｎｇ ｐｌｅｎｔｉｆｕｌ ｓａｍｐｌｅｓ ｄｕｅ ｔｏ ｉｔｓ ａｃｃｕｒａｃｙ ａｎｄ ｒａｐｉｄｎｅｓｓ．． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ａｍｙｌａｓｅ；ａａａｙｌｏｐｅｃｔｉｎ；ｔｈｅ ｄｕａｌ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ
出了解释，同时也测定了多种中国名优白酒的黏度，泸州老窖（３８。）的温度／黏度变化曲线及模型酒的黏度曲线，试图将乙醇．水二元
溶剂体系黏度变化规律同中国白酒黏度结合起来，从宏观物性角度上来理解中国白酒的风味表现关系。
关键词：白酒；乙醇／水二元溶剂体系：黏度
中图分类号：０６４５．１６
文献标识码：Ａ
文章编号：０２５４－５０７１（２．００８）２１－００８７—０３
收稿日期：２００８－０７－０７ 基金项目：贵州省茅台联合基金（黔科合茅科联字【２００８】７００７） 作者简介：范明顺（１９８３．），男，在读硕士研究生，研究方向为环境科学：张崇玉·，教授，通讯作者。
万方数据
·８６·
２００８ Ｎｏ．２１ Ｓｅｒｉａｌ Ｎｏ．１９８
Ｃｈｉｎａ Ｂｒｅｗｉｎｇ
Ａｎａｌｙｓｉｓ ａｎｄ Ｅｘａｍｉｎａｔｉｏｎ
ＷＣＩ＇ｅ皿旧蝎州，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ３８％Ｌｕｚｈｏｕ ｆｉｑｕｏｒ．Ｉｔｓ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ／ｖｉｓｃｏｓｉｔｙ ｃｔｕ＇ｖｅ ｍｏｄｅｌ ａｎｄ ｔｈｅ ｖｉｓｃｏｓｉｔｙ ＣＵｆＶＣ ｗｅｒｅ ｆｕｒｔｈｅｒ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ．Ｗｅ ｔｒｙ ｔｏ ｅｓｔａｂ－
ｌｉｓｈ ａ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｅ ｃｈａｎｇｅｓ ｏｆ ｖｉｓｃｏｓｉｔｙ ｉｎ ｅｔｈａｎｏｌ－ｗａｔｅｒ ｂｉｎａｒｙ ｓｏｌｖｅｎｔ ａｎｄ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｌｉｑｕｏｒ ｖｉｓｃｏｓｉｔｙ，ａｎｄ ｕｎｄｅｒｓｔａｎｄ ｔｈｅ ｔａｓｔｅ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ
贵州省仁怀市茅台酒原料基地高粱样品。 １．２实验仪器
电动粉碎仪，电子天平，电热鼓风干燥箱，索氏脂肪抽 提器，水浴锅，ｐＨ计，ＵＶ－ⅥＳ ８５００型紫外分光光度计：天 美科学仪器有限公司。 １．３试剂
直链淀粉标准样品、支链淀粉标准样品：北京索莱宝 科技有限公司，甲醇，无水乙醇，氢氧化钠，盐酸，碘，碘化钾。 １．４实验方法 １．４．１溶液配置
２００８年第２１期 总第１９８期 ·８７·
中国白酒黏度分析 ．
罗莉萍
（宜春学院，江西宜春３３６０００）
摘要：利用旋转黏度计对２０。Ｃ、２５℃和３５‘Ｃ温度下乙醇．水二元溶剂体系的浓度／黏度变化进行了测定，实验结果表明，在混和溶剂
中随着乙醇浓度的增大，其黏度变化有１￣２个峰值，且其峰值与中国白酒传统产品所特有的度数有较好的对应关系。文中对此现象作
在已测得直链淀粉和支链淀粉含量的样品中，添加准 确称量的直链淀粉和支链淀粉标准品，按实验方法进行处
万方数据
２．３重复性实验 对同一样品进行重复测定，结果（表２）表明，实验方
法重复性良好，相对标准偏差不超过１％。
表２重复性实验结果 Ｔａｂｌｅ ２．Ｒｅｐｅａｔｅｄ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ
分析与检测
中 国 酿造
１．４．４测定 以蒸馏水为空白，用ｌｍＬ比色杯，在波长６２０ｎｍ和
４７９ｎｍ处测定直链淀粉标准曲线和样品的吸光度值Ａ， 以Ａ６２０．Ａ４７９绘制直链淀粉单波长曲线。在波长５５６ｎｍ 和７３７ｎｍ处测定支链淀粉标准曲线和样品的吸光度值，以 Ａ５５６－Ａ７３７绘制支链淀粉双波长曲线。根据标准曲线计算 溶液内直链淀粉浓度Ｙ。（ｍｇ／ｍＬ）和支链淀粉的含量Ｙ２ （ｍｅ／ｍＥ）。 １．４．５计算结果
碘试剂：称取碘化钾２．０９，溶于少量蒸馏水，再加碘 ０．２９，待溶解后用蒸馏水稀释定容至ｌＯＯｍＬ；ｌｍｏｌ／Ｌ氢氧 化钠溶液；０．１ｍｏｌ／Ｌ ＨＣｌ溶液：直链淀粉标准溶液（１ｍｇ／ｍＬ）； 支链淀粉标准标液（１ｍｇ／ｍＬ）。 １．４．２样品处理
将样品自然风干，粉碎过６０目筛。放于鼓风干燥箱中 烘干，测得高粱水分含量Ｗ。（％），将烘干样品放入索氏脂 肪抽提器中，加入甲醇３０ｍＬ，加热回流脱脂４ｈ，然后放入 干燥箱中烘干，称至恒重，测得粗脂肪含量Ｗｊ（％）。准确 称取脱脂样品０．１０００９，置于１００ｍＬ容量瓶中，加ｌｍＬ无 水乙醇分散。再加９ｍＬ ｌｍｏｌ／Ｌ氢氧化钠溶液，于沸水浴中 分散１０ｍｉｎ，取出迅速冷却后，用水定容。吸取样品液５ｍＬ， 加蒸馏水３０ｍＬ，以Ｏ．１ｍｏｌ／Ｌ ＨＣＩ溶液调节ｐＨ值为３．５左 右，加０．５ｍＬ碘试剂，定容至５０ｍＬ，显色１０ｍｉｎ后上机。 １．４．３标准曲线的绘制。
Ｖｉｓｃｏｓｉｔｙ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆＣｈｉｎｅｓｅ ｌｉｑｕｏｒ
ＬＵＯ Ｌｉｐｉｎｇ
Байду номын сангаас
（Ｙｉｃｈｕｎ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｙｉｃｈｕｎ，３３６０００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｍ毗．Ｔｈｅ ｃｈａｎｇｅｓ ｏｆｓｏｌｖｅｎｔ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ／ｖｉｓｃｏｓｉｔｙ ｉｎ ｔｈｅ ｄｕａｌ ｓｙｓｔｅｍ（ｗａｔｅｒ ａｎｄ ａｌｃｏｈ０１）ａｔ ２０℃．２５＂（２ ａｎｄ ３５℃ｗｅｌ＇ｅ ｍｅａｓｕｒｅｄ ｕｓｉｎｇ ｒｏｔａｔｉｎｇ
５５６ａｍ和７３７衄。
理和测定，求得其回收率（见表１），回收率测定试验结果 表明，无论是直链淀粉还是支链淀粉，也无论标准品加入
量的多少，回收率都在９５．０％１０３．２％，说明该分析方法具
有较高的准确度，适合测定高粱以及其他农产品中的直 链淀粉和支链淀粉。
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吸光度值（Ａ∞ｒＡ．，９） 图２直链淀粉（Ａ）、支链淀粉（Ｂ）标准曲线 Ｆｉｇｕｒｅ ２．Ｓｔａｎｄａｒｄ ｃｕｒｖｅ ｏｆ ａｍｙｌａｓｅ（Ａ）ａｎｄ ａｍｙｌｏｐｅｃｔｉｎ（Ｂ）