黄花倒水莲抗氧化活性研究
黄花倒水莲抗氧化活性研究
黄 锋1,2,林黎琳2,胡娟娟1,刘艾林1,肖培根2,杜冠华13
1中国医学科学院中国协和医科大学药物研究所国家药物筛选中心,北京100050;2
中国医学科学院中国协和医科大学药用植物研究所,北京100094
【摘 要】 目的:阐明黄花倒水莲(Polygala fallax Hemsl.[P.aureocauda Dumn])的抗氧化活性及有效部位,为进一步的活性追踪及临床应用提供理论依据。方法:从广西采集黄花倒水莲的根部分,经植化手段分离得到
7个化学性质不同的组分(PFE1、PFE2、PFE3、PF B4、PF B5、PF B6、PFW7)。用比色法研究了各组分还原三价铁离子
及清除脂性自由基DPPH 能力,采用化学发光法观察各组分清除羟自由基和超氧阴离子的活性。结果:PFE3、
PF B4对DPPH 、羟自由基、超氧阴离子的清除作用EC 50分别为92144,42129,5150;96133,38126,6121μg ?m L -1。结
论:黄花倒水莲各组分均有一定的清除自由基作用,这可以用来解释其在传统应用中的抗炎、抗衰老作用。
【关键词】 黄花倒水莲,抗氧化,自由基
【中图分类号】 R965 【文献标识码】 A 【文章编号】 167223651(2006)0420291204
【收稿日期】 2005201220
【基金项目】 国家自然科学基金资助项目(N o.3001161940);国家“十五”重大科技专项“创新药物和中药现代化”(NO :
2004AA2Z 3782)
【3
通讯作者】 杜冠华:教授,博导,中国医学科学院中国协和医科大学药物研究所副所长,中国药理学会秘书长,T el :0102
63165184,Fax :010*********,E 2mail :dugh @https://www.360docs.net/doc/c611792782.html,
黄花倒水莲(Polygala f allax Hemsl.[P.aureo 2cauda Dumn ])又名假黄花远志、黄花参,为远志科远志属植物[1],主要分布于江西、福建、湖南、广东、广西、贵州、云南等地,是广西民间少数民族常用药,以根、茎、叶入药。其味甘、微苦、性平,具补益气血、健脾祛湿、活血化瘀和调经等功效[224],用于治疗病后体虚、腰肌劳损、风湿关节痛、跌打损伤、急慢性肝炎、子宫下垂和月经不调等症[5]。近年来已有一些关于黄花倒水莲化学成分和药理活性的报道[6210],但是对黄花倒水莲的传统应用尚缺乏系统的实验研究。本文在植化分离研究的基础上,对其各种组分进行了抗氧化活性的探索,试图阐明其药理活性及有效部位,为进一步的活性追踪及临床应用提供依据。1 材料与方法111 试 剂
DPPH 、维生素C (Vit C )、NADH 、鲁米诺为美国
Sigma 公司产品,丹酚酸A 由中国医学科学院药物
研究所黎莲娘教授惠赠,其它试剂均为国产分析纯。
112 植化分离
黄花倒水莲(Polygala f allax Hemsl.[P.aure 2
ocauda Dumn ]),2001年10月采自广西,经肖培根研究员鉴定,植物标本存放于中国医学科学院药用植物研究所标本馆,编号为PF200110。
黄花倒水莲根经干燥粉碎后,先用95%EtOH 回流提取2次,每次2h ,过滤,滤液浓缩,得到组分PFE1(含量为生药的7%);残渣继续用50%E 2tOH 提取2次,每次2h ,过滤,滤液浓缩,得到组分PFE2(含量为3%);将PFE1和PFE2两部分合并,
溶于水中,乙酸乙酯萃取3次,乙酸乙酯层浓缩得到组分PFE3(含量为018%);水层继续用正丁醇萃取3次,将正丁醇萃取得到的物质与D101大孔树脂混合装柱,依次用30%EtOH 、50%EtOH 及90%EtOH 洗脱,分别得到PF B4(含量为013%)、PF B5(含量为112%)及PF B6(含量为011%)。萃取后的水层干燥得组分PFW7(含量为619%)。
根据文献[11,12]等报道,黄花倒水莲中主要含有xanthone 、皂苷和寡糖酯等三类成分,采用95%及50%的EtOH 加热提取,能把主要成分提取完全。通过进一步的植化分离,xanthone 类成分主要在PF 2EtOAc 部分富集,皂苷类成分主要在PF 2
BuOH部分富集,糖酯类成分则分布在PF2BuOH和PF2H2O部分。
113 抗氧化活性研究
11311 还原Fe3+能力 待测样品还原能力的测定根据文献方法改进[13]。
以去离子水分别配制2mm ol?L-1的FeCl3和邻菲罗林溶液,于实验前将二者按1∶1体积混合。混合液加入96孔细胞培养板,90μL/孔,然后加入10μL待测样品,使终浓度分别为10μg?m L-1、100μg?m L-1,阳性对照组加入Vit C,空白对照组以去离子水代替待测样品。振荡混匀后于室温下静置30min,用可见/紫外全波长分光光度计测定各孔吸光度值A,测定波长516nm。
11312 清除DPPH能力 DPPH清除实验参考Xu SH等方法并稍作修改[14,15]。精确称量一定量的DPPH,用无水乙醇溶解配成6125×10-4mm ol?L-1浓度的溶液,加入96孔细胞培养板,190μL/孔,加入10μL待测样品,阳性对照组加入Vit E,空白对照组以去离子水代替待测样品。用封板膜封板,室温下避光静置30min。用可见/紫外全波长分光光度计(Z enyth200rt)测定各孔吸光度值A,测定波长517nm。
DPPH清除率(%)=(A空白-A样品)/A空白×100%
A空白:空白对照组光吸收值;A样品:加样品组光吸收值。11313 清除羟自由基 本实验采用Cu2+2H2O22 Vit C体系来产生羟自由基[16218],反应体系中含:邻菲罗林100μm ol?L-1,CuS O450μm ol?L-1,Vit C 100μm ol?L-1,H2O20106%。阳性对照组加入丹酚酸A,空白对照组以去离子水代替待测样品。在加入H2O2启动反应后,立即以T opcount化学发光测定仪测定发光强度值(每分钟脉冲数CPS),测定温度1911℃,每孔计数3秒。按下式计算样品对羟自由基清除率。
羟自由基清除率(%)=(CPS空白-CPS样品)/CPS空白×100% CPS空白:空白对照组化学发光强度值;CPS样品:加样品组化学发光强度值。
11314 清除超氧阴离子 采用鲁米诺增强化学发光法测定NADH2P MS体系生成的超氧阴离子[19221]。实验反应总体积为100μL,内含:NADH73μm ol?L-1,硫酸甲酯吩嗪(phenazine methosulphate PMS)15μm ol?L-1,luminol100μm ol?L-1,硼砂:盐酸缓冲液(0105mm ol?L-1,pH8191)及不同浓度的样品。以011m ol?L-1的NaOH溶液配制011m ol?L-1的鲁米诺储存溶液,检测前用去离子水将其稀释为1×10-4m ol?L-1。将待测样品及各反应试剂加入BMG不透明96孔板,反应由PMS引发,立即测定发光强度CPS值,测定温度1911℃,每孔测定3秒。超氧阴离子的清除率按下式计算:
清除率(%)=(CPS空白-CPS样品)/CPS空白×100%
CPS空白:空白对照组化学发光强度值;CPS样品:加样品组化学发光强度值。
2 结 果
211 还原Fe3+的能力
由表1可知,黄花倒水莲各组分都表示出一定的抗氧化活性,PFE3、PF B4抗氧化活性大于其他组分的活性,但较维生素C的抗氧化活性弱。212 清除DPPH活性
黄花倒水莲各组分对稳定脂性自由基DPPH 具有清除作用。PFE3、PF B4对DPPH的清除作用强于其他组分,但其活性弱于相同浓度的维生素E。结果见表2。
T able1 R eduction activity to Fe3+of seven extracts from root of Polygala fallax H emsl(n=5,x±s)
Extracts10μg?m L-1(OD)100μg?m L-1(OD)
PFE1010662±010*********±010116
PFE2010570±010*********±010255
PFE3010872±01001533014280±01021533
PF B4011012±01004033015346±01037133
PF B5010554±010*********±010131
PF B6010706±010*********±010194
PFW7010534±010*********±010175
Vit C013690±010*********±010060
C ontrol010448±010*********±010078
33P<0101vs control
213 清除羟自由基的活性
黄花倒水莲在phen2Cu2+2H2O22Vc体系中,各组分对羟自由基均有一定清除作用。PFE3、PF B4组分对羟自由基清除活性强于其他组分。但其清除羟自由基活性弱于丹酚酸A。结果见表2。214 清除超氧阴离子活性
黄花倒水莲各组分均对超氧阴离子表现出一定的清除作用。如表2所示,PFE3、PF B4组分对超氧阴离子清除活性强于其他组分,但其清除超氧阴离子活性弱于丹酚酸A。
T able2 DPPH、hydroxy radical and superoxide anion scav2 enging activity of seven extracts from root of Polygala fallax H emsl(n=4,x±s)
Extracts
DPPH
(EC50μg?m L-1)
hydroxy radical
(EC50μg?m L-1)
superoxide anion
(EC50μg?m L-1)
PFE1155100±1111971148±21867151±0111 PFE2118171±2122145126±019318139±2165 PFE392144±918042129±11355150±0107 PF B496133±412338126±11186121±0113 PF B5146131±1113573146±110913118±4106 PF B6151131±1810460147±111710129±2108 PFW7342146±2818359199±110820191±3116 Vit E834101±12142 — —
Sal A1134±01022103±01200122±0101
3 讨 论
黄花倒水莲在民间有广泛的应用,并且在国内有丰富的资源,开发前景良好。但对其研究有限,特别是并未进行系统的药理学研究,对其临床应用缺乏科学的实验支持。本文在对其植化分离的基础上,进行了初步的药理学活性探讨,证明黄花倒水莲具有较强的抗氧化作用。
黄花倒水莲各组分在高浓度时可还原三价铁离子为二价铁离子,对DPPH、羟自由基、超氧阴离子自由基均有一定的清除作用,且对超氧阴离子的清除作用选择性较强。在分离得到的7个组分中,PFE3、PF B4组分无论还原能力大小还是清除自由基作用都强于其他5个组分。在某些病理情况下,无论何种原因使这些活性氧自由基代谢失衡,其含量就升高,脂质过氧化水平也升高,这种不平衡会对机体造成损伤,引发多种疾病,包括癌症和炎症等。
黄花倒水莲在传统应用中的抗炎、抗衰老作用可能与其对自由基的清除作用有关,其活性成分可能主要集中在PFE3、PF B4组分。这不仅为黄花倒水莲的临床应用提供了理论依据,并且为进一步提取单体活性化合物,详细阐明黄花倒水莲的作用机制提供了研究思路。
致 谢 黎莲娘教授提供丹酚酸A。
参考文献
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Antioxidant E ffect of Polygala fallax H emsl.
H UANG Feng1,2,LI N Li2Lin1,H U Juan2Juan1,LI U Ai2Lin1,XI AO Pei2G en2,DU G uan2Hua13,
1Institute o f Materia Medica,Chinese Academy o f Medical Sciences/Peking Union Medical College,Beijing100050; 2Institute o f medical plant,Chinese Academy o f Medical Sciences/Peking Union Medical College,Beijing100094, China
【ABSTRACT】 AIM:Polygala fallax Hemsl.is a widely2used folk medicine in China.Our w ork provides theoretical evidence for tra2 ditional application of Polygala fallax Hemsl.METH ODS:Seven extracts were is olated from the root of Polygala fallax Hemsl.,and were researched for the scavenging activity to DPPH,superoxide anions and hydroxy radical,and reducing effect on Fe3+in vitro.RE2 SU LTS:PFE3、PF B4had scavenging activity to DPPH,hydroxy radical and superoxide anions,with EC50:92144,42129,5150;96133, 38126,6121μg?m L-1respectively.CONC L USION:All extracts exert distinct antioxidant effects in vitro.It is suggested that traditional application of Polygala fallax Hemsl.in China may be related with its antioxidant activity.
【KE Y WOR DS】 Polygala fallax Hemsl;Antioxidant;Free radical
【Found ation Item】 This project was supported by the National Natural Science F oundation of China(N o.3001161940)and national high technology researchment and development program of China(2004AA2Z3782).
?信 息?
中国药学会关于推荐第九届“吴阶平医学研究奖
-保罗?杨森药学研究奖”药学专业候选人的通知
■宗旨
☆激励广大医药卫生科技工作者发扬严谨治学、求实创新精神,推动人才培养,促进我国医药科研事业的发展;
☆表彰、奖励取得突出成就的医药工作者。
■评奖条件
☆中华人民共和国公民;
☆在医药院校、科研机构、医药卫生行业担任全职工作;
☆对推动医药事业发展有杰出贡献;
☆热爱祖国,积极为国家医药卫生事业服务,有高尚的社会公德和职业道德;
☆年龄在55周岁以下。
■奖项
“吴杨奖”每两年评选一次。每届设奖学科由专家委员会提议,管理委员会批准。每届各专业领域分别设立一等奖1名、二等奖2名、三等奖3名。
本届吴杨奖评选专业领域为药学、神内、流行病学、骨科和运动医学等5个专业,其中,药学专业(应用药理和药物流行病)候选人的推荐由中国药学会负责。
为专家评选奖项的需要,每推荐1名候选人需交评审费400元。汇款请务必注明吴杨奖评审费。
开户名称:中国药学会,开户银行:中国银行总行,银行帐号:00134318094001。
■申报材料及截止日期
推荐表(请在中国药学会网站http://w w https://www.360docs.net/doc/c611792782.html,下载)一式八份(可以复印),于2006年7月31日前报送至中国药学会,同时通过电子邮件或磁盘发送至中国药学会学术部孙文虹收。
■联系方式
联系人:孙文虹、鲁毅、王爱国
地 址:北京市朝阳区建外大街四号建外S OH O九号楼18层 邮 编:100022
电 话:0102586992752819/820/818传真:010*********
E2mail:sunwenhong2002@https://www.360docs.net/doc/c611792782.html,;yxhwag@https://www.360docs.net/doc/c611792782.html,
黄花倒水莲种植技术
黄花倒水莲种植技术 七冲瑶山生态农业提供 黄花倒水莲(拉丁学名:Polygala fallax Hemsl)为远志科植物，别名：黄花参、观音串。主产于广西，福建、江西、湖南、广东、贵州、云南等地有分布。生长于海拔300～1600m的山谷林下、水旁荫湿处。高1～3米，属灌木或小乔木；根粗壮，肉质，多分枝，表皮淡黄色；茎灰色，具浅灰色斑点；枝圆柱形，灰绿色，密被短柔毛。单叶互生；叶柄长9～14mm，叶膜质，披针形至椭圆状披针形，先端渐尖，基部楔形至钝圆，全缘，主脉在上表面凹陷。总状花序顶生或腋生；花两性，萼片5，早落，均具缘毛；花瓣3枚，纯黄色；雄蕊8枚，花药卵形；子房压扁，圆形，具缘毛，基部具环状花盘。蒴果阔倒心形至圆形，绿黄色。种子圆形，棕黑色至黑色，密被白色短柔毛，近种脐端具一顶端突起的种阜。花期5～10月，果期8～12月。 黄花倒水莲性味甘、微苦，平，具有补气血，健脾利湿，活血调经，强筋骨，通筋络等功效。临床主要用于产后、病后体弱、妇科疾病、腰肌劳损、急、慢性肝炎等的治疗，是广西民间少数民族常用药，民间广泛使用黄花倒水莲熬制滋补靓汤。（v:qxy042） 现代研究发现：黄花倒水莲含有皂苷、多糖、shan酮、有机酸和氨基酸等多种成分，（v:qxy042）主要有抗乙肝病毒、抗应激、抗过氧化脂质、抗衰老、提高免疫力、调脂、调节心肌功能、及活血、抗炎等作用。制药企业、提取企业、研究机构大量使用黄花倒水莲作为原料，提取有效成分，研发生产药品，如：用叶子加工成的黄花参养生茶、枝制药的舒脂苷片等已投入临床应用。 目前黄花倒水莲均依靠野生，民间不重视资源保护，野生资源蕴藏量逐年减少，货源零散。民间食用、成方制剂、企业制药用量成倍增长，而各大药市的上市量不足，使黄花倒水莲成为近年来市场的畅销品，全国各大药市价格不断上扬，现生叶子8元,阳枝7元，阴根40元/kg。业内人士分析认为：人工栽培尚未开展，市场即将出现空缺，价格将继续上扬。 经济效益分析：黄花倒水莲可采收全株，仅以种植三年每株最少可产药材1.0kg计算，亩产可达1800kg以上。（v:qxy042）产地收购价全株平均12／kg，亩产值可达21600元以上（不包括叶子收入）。每亩成本费用如下：土地租金150元，翻耕整地100元，石灰150公
ABTS_法测定葡萄酒抗氧化活性的研究
第37卷 第11期2009年11月 西北农林科技大学学报(自然科学版) Journal of Northwest A&F University(Nat.Sci.Ed.) Vol.37No.11 Nov.2009 ABTS?+法测定葡萄酒抗氧化活性的研究3 李 华,李 勇,吴 莹,王 华 (西北农林科技大学葡萄酒学院,陕西省葡萄与葡萄酒工程技术研究中心,陕西杨凌712100) [摘 要] 【目的】确定AB TS?+法测定葡萄酒抗氧化活性的最佳反应时间和葡萄酒的最佳稀释倍数。【方法】应用福林肖卡比色法(FC)测定36种葡萄酒样品的总酚含量(Total phenol index,TPI),从中选出9种总酚含量具代表性的葡萄酒样品,并采用AB TS?+法测定反应不同时间和稀释不同倍数葡萄酒样品的抗氧化活性。【结果】AB TS?+法测定葡萄酒抗氧化活性的最佳反应时间为2～5min;红葡萄酒的最佳稀释倍数为0.2∶10～0.4∶10,桃红葡萄酒的最佳稀释倍数为1∶10～4∶10,白葡萄酒的最佳稀释倍数为3∶10～7∶10。【结论】得到了AB TS?+法测定葡萄酒抗氧化活性的最佳反应时间和葡萄酒的最佳稀释倍数,且无需事先测定总酚含量,简化了试验步骤。 [关键词] 葡萄酒;抗氧化活性;AB TS?+法;反应时间;稀释倍数 [中图分类号] TS262.6[文献标识码] A[文章编号] 167129387(2009)1120090208 Research of antioxidant activity of wine s determined by the ABTS?+method L I Hua,L I Y ong,WU Y ing,WAN G Hua (College of Enolog y,Engineering Research Center f or V iti2V i nicult ure,N ort hwest A&F universit y,Yangli ng,S haanx i712100,China) Abstract:【Objective】The p resent st udy aimed to confirm t he best reaction time and wine dilution of t he AB TS?+met hod.【Met hod】The Folin2Ciocalteu colorimetry was used to measure t he total p henol in2 dex of36kinds of wines and t hen9kinds of rep resentative samples were selected f rom t hem,AB TS?+ met hod was used to measure t he antioxidant activities of wines wit h different reaction time and different di2 lutio ns,and was analyzed t he experiment result.【Result】The result s showed t hat t he best reaction time of t he AB TS?+met hod is2to5minutes,t he best dilution range,0.2∶10to0.4∶10for red wines,1∶10to 4∶10for ro se wines,and3∶10to7∶10for white wines.【Conclusion】The st udy has obtained t he best re2 action time and wine dilution to measure antioxident activity of wines by AB TS?+met hod,and t here is no need to measure total p henol content beforehand,so t he test p rocedure is simplified. K ey w ords:wine;antioxidant activity;AB TS?+met hod;reaction time;dilution 经过研究和分析发现,葡萄酒中含有大量的多酚类物质,如白藜芦醇、儿茶酚、表儿茶精、槲皮酮和芸香苷等,这些多酚类物质具有抗氧化活性,除了抑制低密度脂蛋白的氧化、预防心血管疾病以外,还有抗癌、抗炎症和抗血小板凝聚等功能[1],但不同的品种、气候、地理条件和工艺措施,导致葡萄酒中酚类物质在数量和种类上都有明显不同[223]。因此,如何评价葡萄酒中酚类物质的抗氧化活性很有现实意义。 AB TS?+在414,645,734和815nm处均有特征吸收[4]。Miller等[5]在1993年首次介绍了用AB TS?+法来评价一些化合物的抗氧化活性,即根据待测化合物清除AB TS?+引起的吸光度变化来评价其抗氧化活性。此后,AB TS?+法成为一种被广泛采用的抗氧化活性测定方法,用于饮料和食 3[收稿日期] 2009203206 [基金项目] 陕西省“13115”科技创新工程重大科技专项“陕西省葡萄与葡萄酒产业关键研究”(2007ZD KG209) [作者简介] 李 华(1959―),男,重庆市梁平人,教授,博士生导师,主要从事葡萄与葡萄酒研究。 E2mail:lihuawine@https://www.360docs.net/doc/c611792782.html,
抗氧化酶活性等测定方法
叶绿体得提取 一、试剂配置 １、PＢS提取液:每L水依次加入MES(１9５.2×0。05=９、7６g)、山梨糖醇(0。33×182。2＝60。1２6g)、ＮaCｌ(０、０10×58.5=0、５85g)、MgCｌ(０.002×95=0、19g)、EDＴA(292、２5×０.0０２=０、５84５g)、KH2PO４(２00×0.0005=０、１g);使用时加入ASＡ—Nａ(１98。1×0、00２=0、３962g); 2、悬浮液:将ＰBS提取液中得MES换为238。３×0.05＝１１、９15g得HEＰＥS(238、3×０。05=11。915ｇ); ３、8０%Pｅrｃoｌ:8０ml原液+２0ml水;40％Perｃol:４0ｍl原液＋60ml水; 实际配制: PBS提取液2000ｍl(3个处理*2个品种＊３个重复＊20ml＊３次=1０80mｌ), 悬浮液100ml(３个处理＊2个品种＊3个重复*1mｌ＊3次＝5４ml); 8０％Percol ２０0ml;40%Percｏl 200ml。(3个处理*2个品种*3个重复*3mｌ＊3次=162ｍl) 二、提取步骤 1、10g鲜样加20ｍl提取ＰＢS(50mM MES PH６、1,含0、３3M山梨糖醇,10mM NaＣl,2mMＭgCｌ２,２ｍM EＤTA,０.5 mMKH2PＯ４,2mM ASA—Ｎa,ASＡ—Na使用前现配现加) 2、快速研磨,使叶片碎成绿豆粒大小,４层纱布过滤,去除残渣(注意过滤时不可用力挤压,以免叶绿体膜破碎) 3、滤液20００g ３ｍin,小心倒出上清液,将离心管放入离心机后,使离心机得加速很快上升到预定值(水平转头,加速度调到9),约经30s后很快使其下降停止,整个离心持续大约2—3ｍｉｎ左右完成; 4、沉淀用１ml提取液漂洗表面悬浮物; 5、用1ml悬浮液(５０mM HＥPＥS pＨ7。6,含０、３３mM山梨糖醇,１０mM NaＣl,2mM MgＣl2,2mM EDTA,0。5mMKH2PＯ４,2mM ASA－Ｎａ,ASＡ-Na使用前现配现加)将沉淀悬浮,在分散叶绿体时宜用毛笔轻轻刷,或者用手握住离心管在冰块之间搅动,使叶绿体由于震动分散开来,不要用棉球吸滤,以防被膜压破。叶绿体悬浮时要浓点,含叶绿素２ｍg、ml-1以上,这样有利于保持活性。 6、２000g 1min; 7、沉淀再用悬浮液悬浮;(悬浮液同5,可以不做) 8、用Ｐｅrcol试剂进行梯度离心(将3ml含有80％Peｒcｏl(原液按100％算)铺在１0mｌ离心管下层,再把３ｍl 40％Perｃol铺在离心管中层,然后将1mｌ叶绿体悬浮液轻轻铺在离心管上层)１500ｇ2-3mｉn(用
猴头菌提取物抗氧化活性研究
猴头菌提取物抗氧化活性研究 分别采用还原力测定法、Fenton法、2,2-二苯基-1-苦肼基（DPPH）分析法和改良邻苯三酚自氧化法，对猴头菌子实体水提物和醇提物的总还原力，清 除?OH、DPPH?和O - 2?自由基的能力进行测定。结果表明：醇提物还原力 较强，且还原力大小与浓度成正比；猴头菌水提物和醇提物均有清除?OH、DPPH? 和O - 2?自由基的能力，且水提物的效果比醇提物好；水提物和醇提物对?OH、DPPH?和O - 2?的清除能力依次为DPPH?、?OH和O - 2?，并且在一定浓 度范围内，清除率与浓度成正比。 猴头菌；清除自由基；抗氧化活性 人体持续暴露在活性氧与促氧化剂中时，很容易引起机体组织产生氧化应激，导致代谢性功能紊乱以及一系列的慢性疾病［1］。食用一些富含具有抗氧化活性物质的功能性食品可以减轻机体组织氧化应激或预防损伤。一些合成抗氧化剂与天然抗氧化剂相比，尽管具有很强的清除自由基活性，但同时也具有强的毒副作用，因此人们倾向于从自然界中寻求更安全的抗氧化剂。LEE等［2］从桦褐孔菌（Inonotus obliquus）中分离到一些具有较强活性的抗氧化成分（多酚类化合物）。MAU等［3］研究表明灵芝(Ganoderma lucidum)是很好的天然抗氧化剂。同为食用菌的猴头菌(Hericium erinaceus)是著名的药膳两用真菌，具有抗溃疡、抗炎症、抗肿瘤、抗衰老、抗疲劳、提高机体耐缺氧能力、增加心肌血液输出量、加速机体血液循环、降血糖、保肝护肝和降血脂、降血压等作用［4］。笔者通过对猴头菌子实体的水提物和醇提物总还原力、清除?OH、2,2-二苯基-1-苦 肼基自由基（DPPH?）及O - 2?自由基的研究，旨在为其在医药保健方面的 利用提供理论依据。 1 材料与方法 1.1材料 猴头菌（H. erinaceus)子实体由上海市农业科学院食用菌研究所提供。 1.2主要试剂与仪器 柠檬酸、Na 2HPO 4、NaH 2PO 4、六氰合铁酸钾（铁氰化钾）、醋酸、三氯化铁、维生素C、FeSO 4?7H 2O、30％H 2O 2溶液、水杨酸、无水乙醇、95％乙醇等（国药集团化学试剂有限公司），DPPH（美国Sigma公司），实验用水（娃哈哈纯净水）；infinite M200 PRO酶标仪（瑞士TECAN公司）；UVmini-1240分光光度计（日本SHIMADZU 公司)。 1.3提取物的制备 1.3.1水提物 干燥猴头菌子实体，用粉碎机粉碎，称取50 g粉末，加1 L蒸馏水超声20 min，过滤，滤液减压浓缩，反复3次，合并浓缩液，转至蒸发皿中，60 ℃水浴蒸干，备用。 1.3.2醇提物 同样称取50 g猴头菌子实体粉末，加1 L 95％乙醇超声20 min，过滤，其
生物活性肽的研究及其进展汇总
生物活性肽的研究及其进展 摘要：生物活性肽作为一种来源广泛、种类繁多、功能性良好的生命因子，目前已成为全球范围内的研究热点。研究表明这些肽除具有常规的生物活性,如增加矿物质吸收、调节血压、抗菌、抗氧化、降胆固醇、免疫调节之外还对人类营养有调节作用,因而受到广泛关注。本文综述了生物活性肽的种类、生理功能、吸收、制备研究进展,以期为生物活性肽的进一步研究和应用提供参考。 关键词：生物活性肽，生理活性，吸收 Research and progress of biological active peptide Abstract:Bioactive peptides as one rich sources, wide variety, good functional life factors have been a global research hot spot. Studies have shown that these peptides have some conventional biological activities, such as increase mineral absorption, adjust blood pressure, antibacterial, antioxidant, decrease cholesterol, regulate immune. What’s more, they also have a regulating effect on human nutrition, so they have attracted widely attention. The kinds of bioactive peptides was reviewed in this paper, preparation research progress of physiological function, absorption and biological active peptide in order to provide reference for further research and application. Key words:Biological active peptide, Physiological activity, Absorb 1.功能肽的简介 肽(peptides)是分子结构介于氨基酸和蛋白质之间的一类化合物,是蛋白质的结构与功能片段,并使蛋白质具有数以千万计的生理功能。肽本身也具有很强的生物活性。是由蛋白质中20种天然氨基酸以不同的组合和排列的方式构成的，从二肽到复杂的线性或者环状的多肽的总成。一般说来,肽链上氨基酸数目在10个以内的叫寡肽,10～50个的叫多肽,50个以上的叫蛋白质。人们习惯上也把寡肽中的二、三肽称为小肽。由于构成肽的氨基酸种类、数目与排列顺序的不同,决定了肽纷繁复杂的结构与功能。 生物活性肽( biologically active peptide/ bioactive peptide/ biopeptide) 是指对生物机体的生命活动有益或具有生理作用的肽类化合物,又称功能肽(functional peptide)[1]。肽由氨基酸组成,人体存在20 种氨基酸,由不同的氨基酸的种类排列,加上数量排列形成,再加上还可能有的二级、三级结构,其种类是十分庞大的[2,3]。每一种活性肽都具有独特的组成结构,不同活性肽的组成结构决定了其功能。此外活性肽在生物体内的含量是很微量的,但却具有显著的生理活性。据研究,有些多肽在10 - 7mol/ L 的浓度时仍具有生理活性,就是说1 mL 的多肽用60 倍水稀释后,仍然具有生理功能。功能肽是源于蛋白质的多功能化合物，是多样化且来源充足的食品原料，具有多种人体代谢和生理调节功能，如易消化吸收、促进免疫、激素调节、抗菌、抗病毒、降血压、降血脂等[4] 现代营养学研究发现，人体摄入蛋白质经消化道中的酶作用后，大部分是以寡肽的形式
玉米须总黄酮提取的开题报告
本科毕业论文（设计） 开题报告 论文题目：玉米须多糖和皂苷提取 The Extraction of Stigma maydis 学生姓名：冯苏学号 0707040017 专业：生物科学（师范） 指导教师：丁红秀 完成时间： 2009-8-3 生命科学学院 二○一○年八月
玉米须多糖和皂苷提取 The Extraction of Stigma maydis 一、论文研究背景及意义 1.1论文研究背景（依据） 玉米须为禾本科玉属植物玉米地花柱和柱头，内含有大量有效成分，如矿物质、黄酮类、糖类、皂苷、挥发性化学物质、天然维生素E、有机酸等。为《中华人民共和国卫生部药材标准》1985版（一部）收录的常用药材品种之一。民间常用于药茶、药膳中，作为唐念冰、高血压的辅助治疗药物。现代药理研究也正式证实玉米须有降血糖，抗癌、抑菌、增强免疫功能、利尿、降血压等功效。从玉米须中提取的多糖和皂苷具有多种功效，并且具有安全无毒无副作用的优点备受研究关注。在我国玉米地种植面积非常的广，所以原材料也非常的丰富。有很好的发展前景。 提取玉米须多糖的方法有热水提醇沉法、酶法提取、超声提取、酶2超声联合提取、。而其中的酶法提取对提取的温度控制相当严格，加大了工作的难度，不利于大量生产，而超声提取对仪器设备要求较高，但是产量却不高，不易于企业投产使用。此次试验采取的是热水提醇沉发提取多糖，这种方法成本低，工艺简单，无添加有毒溶剂，产品产率高。（这些内容中可以把相关研究人员所做的工作概述进去） 提取皂苷的方法有打孔吸附树脂技术、微波提取技术、超声波振荡辅助技术、色谱技术、泡沫分离技术、膜分离技术、超临界流体萃取技术、加热回流提取法。虽然以上各大技术在各领域都得到广泛的应用，但是个技术投入量和成本都非常高，此次试验根据皂苷溶于热乙醇的特性，结合多糖的提取技术，充分利用试验资源，采取的是热乙醇提取技术。并用正交法对两种物质提取工艺进行优化。（以上及后面内容中各论述的文献来源请标注。语言流畅性、错别字请好好修改） 1.2相关国内外的研究现状 20世纪20年代起，基于玉米须的临床作用，国内外学者对其化学成分开始大量研究。科学研究已经确认多糖类物质具有许多生物活性，包括抗肿瘤、免疫、降血糖和抗病毒等，且无毒副作用，在保健食品的开发应用上前景广阔。现在国际上多糖研究以日本、美国、德国等处于领先地位。美国的食品药品管理局确认其安全、无毒，其提取物所制药品为非处方药。我国多糖的研究起步较晚，对于日常食品中多糖的研究相对较少。（国内外学者对玉米须化学成分相关研究究竟有哪些，要在这部分内容中表现出来，并注明参考文献出处） 我国的《中药大辞典》、《全国中草药汇编》等当代中医药典籍中均有有关玉
抗氧化活性测定方法的比较
抗氧化活性测定方法的比较 人体衰老和多种疾病均与自由基有关，寻找天然抗氧化剂具有重要意义。黄酮、多糖、多肽、酚类等生物活性成分均具有抗氧化活性，抗氧化活性的筛选方法可分为体外和体内2种测试体系。 体外：抗氧化活性可以用在特定条件下，样品对检测体系中自由基的清除能力、抗油脂过氧化能力及样品的还原能力、总抗氧化能力等来衡量和表征。常用的方法有羟基自由基（·OH）清除能力法、1,1-二苯基苦基苯肼（DPPH法）、2,2-联氮基-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐（ABTS 法）、超氧阴离子自由基法（O2-·）、邻苯三酚自氧化法、β-胡萝卜素漂白法、硫代巴比妥酸法、铁离子还原能力测定（FRAP法）、总酚测定法、ORAC法等方法。体内：主要有DNA氧化损伤法、蛋白质氧化损伤法、线粒体氧化损伤法。 其中DPPH法和ABTS法操作较简单便捷，不需要特殊的检测设备，只在需固定时间下记下其紫外分光光度测量值后计算其自由基清除率，缺点是不同物质具有组成和结构的差异，与DPPH·、ABTS+·的反应速率不同，反应到达平衡的时间不同，将反应时间固定在某一值时，可能对抗氧化剂的抗氧化性评价带来错误的判断，且DPPH自由基会和其他自由基发生反应。邻苯三酚自氧化法缺点是检测波长、缓冲液的组成及ｐＨ值、邻苯三酚浓度等关键测定条件存在
着较大差异。β-胡萝卜素漂白法的缺点是β-胡萝卜素本身有抗氧化活性，对样品活性的测定结果有影响。FRAP法主要用于食品业，优点是简单易操作、可以重复，缺点是无法测定硫醇化合物的还原能力。ORAC法是国际上通用的评价食品氧化的标准方法，缺点是仪器成分较复杂，检测成本较高。 目前普遍使用的体外抗氧化活性指标一般都采用分光光度法，使用分光光度计测量各种颜色成分含量的变化。分光光度法操作较简单、便捷，不需要特殊的检测设备，只在需固定时间下记下其紫外-可见分光光度测量值后计算其活性大小，具有成本低、效率高、样品量少等优点。分光光度法缺点是会受到样本自身颜色和浑浊度的影响和限制，颜色深的样品测得的数据误差大，甚至得到错误的结果；不同物质组成和结构存在差异，与各种自由基的反应速率不同，反应到达平衡的时间不同，将反应时间固定在某一值时，可能对抗氧化剂的抗氧化性评价带来错误的判断。外界环境因素对实验结果也存在一定程度的影响，有些抗氧化活性实验在冬天低温时不易成功，测得的数据往往没有规律。 我觉得在测定样品的抗氧化活性时，各种方法都有自己的优缺点，要根据需测物质来决定用什么方法，比如DPPH 法的自由基选择性强，不和只有一个羟基的芳香酸、无羟基的类黄酮反应，这类物质需用其他方法测定。若对检测结果
菊花提取物的抗氧化活性研究
！：：：：：：＝＝：＝：２：：！垒曼型兰！蚤茎熊匹塞 菊花提取物的抗氧化活性研究 张尔贤方黎张捷俞丽君肖湘汕头大学理学院生物学系汕头５１５０６３摘要通过菊花提取物对Ｆｅ２＋诱发卵黄脂蛋白ＰｕＦＡ过氧化体系、ＴＢＡｓ生成体系和邻苯三酚一Ｌ吼ｉｎ。ｌ发光体 系的抑制作用，研究了菊花的不同提取物的抗氧化活性。结果表明．菊花黄酮类化合物有清除?ｏＨ、０?：的能力， 且有着较强的抗氧化活性，并且发现菊花抗氧化活性与黄酮类化合物含量相关。 关键词菊花黄酮类化合物抗氧化活性脂质过氧化硫代巴比妥酸反应物 ＡｂｓｔｒａｃｔＡｓｔＩｌｄ”ｖａｓｃａｒｒｉｅｄｏｎａｎｔｉ－ｏｘｉｄａｔｉｖｏａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＦｌｏｓｃｈｒｙｓａｎｔｌｌｅｍｕｍｅｘｔｒａｃｔＣｈｒｙｓａｎｔｈｅｍｕｍｅｘｔｒａｃｔｗａｓ允】Ｉ ｏｔ、ｎａＶｏｎｅｓＳ０ｍｅｐｒｅｃｃｓｓｃｓｔｏｅｘｔｒａｃＩａａｖＯｎｅｓ打Ｏｍｃｈｌ）％ａｎｔｈｅｍｕｍｆｏｒｓｃａｖｅｎｇｉｎｇａｃｔｉｖｃｏｘｙｇｅｎｒａｄｉｃａｌｗｅｒｅｒｅｐｏｒｃｅｄ１兀 【ｈｌｓｐ印ｃｒＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｃｈｒｙｓａｎｔｈｅｍｕｍｎａｖｏｎｅｓｃｏｕｌｄｓｃａｖｅｎｇｅ?ＯＨ、Ｏ＝２ａｎｄａｆ诧ｃｔｔｈｃａｎｔｉ．ｏｘｊｄａｔｉｖｅ ａｃｔｎ７Ｉｔｙ ＫｅｙｗｏｒｄｓＦｌｏｓＣｈｒｙｓａｎｔｈｅｍｕｍＡｎ“Ｏ一０ｘｉｄａｔｉｖｅＦＪａｖｏｎｅｓＯｘｙ鼬ｎｒａｄｉｃａｌ 菊花是菊科植物菊（ｃｈｒｙ８ａｎｃｈｅｍｕｍｍｏｒｉｆ０１ｉｕｍＲａｍａｔ）的头状花序．为多年生草本，在我国大部分地区有栽培。传统医学认为菊花的功效包括清热、明目、解毒，治疗头疼、眩晕、心胸烦热、疗疮等作用，民间更以饮用菊花水来解暑热。菊花含黄酮类化合物，本研究通过对菊花的抗氧化作用的初步研究．为进一步开发菊花的保健效用提供理论依据。 １材料与方法 二．二材料、试剂与仪器 千杭自菊：购于市场．绞碎备用。 卵黄悬液：新鲜鸡蛋去卵清，卵黄用等体积的ｐＨ７．４５，ｏ二＿。一，Ｌ磷酸钠缓冲液（ＰＢｓ）配成１：ｉ的悬液，磁力搅拌１０ｍ址再用ｐＢｓ稀释成１：２５的悬液（置于冰箱中备用）。 次黄嘌呤【Ｆｌｕｋａ公司）、黄嘌呤氧化酶（酶活力５ｕ，ｍｌ，广卅１军事医学研究所）、２一脱氧一Ｄ核糖（ｆｅｉｎｂｉｏｃｈｅｍｉｃａ二ｅ二。÷一。ｅｒｇ，ｎｅｗｙｏｒｋ）、硫代巴比妥酸（生化试剂，上海试剂二厂。 ７５ｉ—Ｇｗ型分光光度计（上海分析仪器厂）、ＧＨＧ—ｃ型生物化学发光测量仪（上海市检测技术所检测仪器厂）、ＤＧＪｏ．５一Ｉ｜冷冻干燥机（军事医学科学院实验仪器厂）、旋转蒸发器（Ｒｏ＝ｊｒｙＥｖａｐｏｒａｔｏｒＲＥ一４７，ＹＡＭＡＴ０ＳＣＩＥＮＴＩＦＩＣｃ。，二二ｄＴｏｋｙ。，Ｊａｐａｎ）、ＢｅｃｋｍａｎＪ２—２１Ｍ高速冷冻离心机３ｅ：息ａｎ，ＵＳＡ）。 ：：方法 二．：二提取工艺。１。’ 干菊花绞碎，加入１５倍体积７ｏ％乙醇热浸提１２ｈ．抽滤，滤渣用热水冲洗，滤液减压浓缩．蒸去乙醇，３ｏｏｏｒ／ｍｉｎ离心：ｏ－二ｊ上清液保存待用（样品Ｉ）。取一定量样品Ｉ，用２倍 体积１００％的正丁醇萃取２次，萃取液蒸干溶剂，再用水定容，得样品ＩＩ。取一定量样品Ｉ，用２倍体积１００％的乙酸乙酯。萃取２次．萃取液蒸干溶剂，再用水定容，得样品ＩＩＩ。取一定量样品Ｉ，用２倍体积１００≈的氯仿，萃取２次．萃取液薰干溶剂，再用水定容，得样品Ⅳ。 干菊花绞碎，１５倍体积水直接浸提１２ｈ，低温浓缩获得样品Ｖ（作为对照）。 １．２．２Ｆｅｎ诱发卵黄脂蛋白ＰＵＦＡ过氧化体系…。 选用１：２５的卵黄悬液吸取ｏ．２ｍｌ，加入一定量的样品．加入ｏ，２ｍｌＦｅｓｏ．２５衄ｏｌ／Ｌ，用ｐＨ７．４，ｏ１ｍｏｌ／Ｌ的ＰＢｓ补充至２ｍ！，３７℃振荡１５ｍｉｎ，取出后加人ｏ．５ｍｌ三氧乙酸（简写ＴｃＡ），３５００ｒ／ｍｉｎ离心１０ｍｉｎ，吸取２ｍｌ上清液加入ｌｍｌ硫代巴比妥酸（简写ＴＢＡ）．加塞，放人沸水浴中１５ｍｉｎ，冷却后，于５３２ｎｍ处比色测出吸光度（Ａ）值：以不加样品管的吸光度为（Ａ．）。样品抗氧化活性（ＡｏＡ）用对卵黄脂蛋白ＬＰｏ的抑制率表示： ＡＯＡ（％）＝（Ａ０一Ａ）／Ａ。×１００％ １．２．３Ｆｅ“次黄嘌呤一黄嘌呤氧化酶一ＴＢＡｓ生成体系ｎ４加样顺序为：Ｆｅｓｏ．（２ｍｍ。１，Ｌ）ｏ．０４ｍｌ、黄嘌呤氧化酶（简写：ｘｏ）（５ｕ／ｍ１）３．５ｕｌ、脱氧核糖（３０ｍｍ０１，Ｌ）ｏ２ｍｌ、ＥＤＴＡ（５吼ｏｌ，Ｌ）Ｏ．０４ｍ１、Ｈ２０２（１７．６黝ｏｌ，Ｌ）ｏ０１ｍｌ、加入ｏ．１ｍｌ样品、ｐＨ７．４ＰＢｓ（Ｏ．１５ｍｏｌ／Ｌ）１．４８ｍｌ、次黄嘌呤（简写：ｘ）（２ｍｏｌ／Ｌ）ｏ．２ｍｌ总体积为２ｍｌ（除ＰＢｓ、Ｆｅ∞．用重蒸水配制外．其它试剂均用ｐＨ７．４ＰＢｓｏ．１５ｍｏｌ／Ｌ配制）。然后，３５℃温浴１５ｍｉｍ．取ｌｍｌ反应液加１％ｗ／ｖＴＢＡ（ＮａｏＨｏ０５ｍｏｌ／Ｌ配制）及冰醋酸ｌｍｌ，混匀后放人沸水浴３０ｍｉｎ，冷却。在５３２ｎｍ处测其吸光度Ａ，以不加样品管的吸光度为ｋ：清除活性以抑制ＴＢＡｓ生成量Ａｓ３２ｎ。值的抑制百分率表示即（Ａ。一Ａ）／Ａ。×ｌｏｏ％。１．２．４超氧阴离子的邻苯三酚“ｕＩｎｉｎ。ｌ发光体系 万方数据
活性肽的神奇功效
小分子活性肽的神奇功效 经研究表明，小分子活性肽辅以多种维生素和复合微量元素可诱导和促进T淋巴细胞分化、成熟；调节T淋巴细胞群比例，使CD4/CD8趋于正常。同时，增强巨噬细胞的吞噬能力和红细胞免疫功能。可显着增加淋巴细胞功能，并能有效地防止辐射和放化疗及其他污染中毒后白细胞数量的减少，有效地抑制肿瘤细胞生长，起到改善免疫功能的作用。从间接作用而言，小分子活性肽可促使粪便排泄，降低血清胆固醇浓度，使甾醇排泄增加和肝脏高胆固醇浓度下降，对治疗原发性高血压有一定的功效。能抑制脂肪的积蓄，抑制有害菌，排除毒素，促进其对食物营养的消化吸收，以提高人体对药物有效成分的吸收，具有很高的生理活性，人们经常食用小分子活性肽，在强身保健方面有如下功效： 1、主动吸收，迅速恢复体能 肽是蛋白质与氨基酸的中间物质，由数个氨基酸结合而成。分子大小介于蛋白质与氨基酸之间。但是，比氨基酸分子大的肽在人体内被吸收的速度反而比氨基酸更快，原因就在于：小分子活性肽是数个氨基酸分子集中起来被整体吸收，而氨基酸需要一个一个地
被吸收，小分子活性肽能比氨基酸更迅速地被人体吸收。 在恢复体力方面，小分子活性肽也发挥着优异的功效。人体在进行激烈运动时，为了补给能量就需要消耗肌肉中的氨基酸。就是说，身体需要能量的时候就会从肌肉中获取。肌肉中的氨基酸被消耗掉后，肌肉组织就会受到损伤、肌肉产生疲劳感、难以发挥原有的力量。服用小分子活性肽3分钟进入血液，5分 钟转换为体能，在运动前、运动中补给活性肽可以给身体提供充足的能量，能够抑制肌肉力量的下降、长时间维持充沛的体力。 2、消除疲劳 疲劳是由大脑感知的。当人体感到疲劳的时候，疲劳的机体部位向大脑发出疲劳信息，于是人就感到疲劳。从这个意义上说，感知疲劳的中心就在大脑里。如果没有疲劳这种生理反应，我们就会无休止的劳动下去，直至死亡。 大脑疲劳是由氧化血红蛋白浓度的上升引起的，服用小分子活性肽可以抑制氧化血红蛋白浓度的上升，因而能够缓和大脑的精神压力，使人在学习时保持沉着冷静、清醒的记忆，能够减轻工作造成的大脑疲劳。
黄花倒水莲
黄花倒水莲 黄花倒水莲为远志科植物Polygala fallax Hemsl.的根或全株，别名：黄花参、观音串。主产于广西，福建、江西、湖南、广东、贵州、云南等地有分布。生长于海拔300～1600m的山谷林下、水旁荫湿处。高1～3米，属灌木或小乔木；根粗壮，肉质，多分枝，表皮淡黄色；茎灰色，具浅灰色斑点；枝圆柱形，灰绿色，密被短柔毛。单叶互生；叶柄长9～14mm，叶膜质，披针形至椭圆状披针形，先端渐尖，基部楔形至钝圆，全缘，主脉在上表面凹陷。总状花序顶生或腋生；花两性，萼片5，早落，均具缘毛；花瓣3枚，纯黄色；雄蕊8枚，花药卵形；子房压扁，圆形，具缘毛，基部具环状花盘。蒴果阔倒心形至圆形，绿黄色。种子圆形，棕黑色至黑色，密被白色短柔毛，近种脐端具一顶端突起的种阜。花期5～8月，果期8～12月。 黄花倒水莲有补气血，强筋骨，通筋络等功效。临床主要用于产后、病后体弱、妇科疾病、腰肌劳损、急、慢性肝炎等的治疗，是广西民间少数民族常用药，民间广泛使用黄花倒水莲熬制滋补靓汤。现代研究发现：黄花倒水莲含有皂苷、多糖、shan酮、有机酸和氨基酸等多种成分，主要有抗乙肝病毒、抗应激、抗过氧化脂质、抗衰老、提高免疫力、调脂、调节心肌功能、及活血、抗炎等作用。制药企业、提取企业、研究机构大量使用黄花倒水莲作为原料，提取有效成分，研发生产药品，如：黄花参舒肝茶、舒脂苷片等已投入临床应用。 目前黄花倒水莲均依靠野生，民间不重视资源保护，野生资源蕴藏量逐年减少，货源零散。民间食用、成方制剂、企业制药用量成倍增长，而各大药市的上市量不足，使黄花倒水莲成为近年来市场的畅销品，全国各大药市价格不断上扬，现已升至20元/kg。业内人士分析认为：人工栽培尚未开展，市场即将出现空缺，价格将继续上扬。 目前，我公司已筛选出生物学综合性状优异的黄花倒水莲单株，以其茎尖作为外植体，成功培育出黄花倒水莲组培苗，遗传稳定性好、生长势旺、移栽成活率高，药材形成产量快，有效成分含量高，是规模化种植的首选种苗，规模化种植将带来巨大的经济效益。 经济效益分析：黄花倒水莲可采收全株，仅以种植三年每株最少可产药材1.0kg计算，亩产可达1800kg以上。产地收购价12元／kg，亩产值可达21600元以上。每亩成本费用如下：土地租金150元，翻耕整地100元，石灰150公斤40元，农家肥3000公斤450元，有机磷肥200公斤100元，杀虫、防病50元，种苗费3600元，施肥、种植、锄草、采收等人工费500元，其他费用100元，三年合计总投资5090元。纯收入达16510元/亩，经济效益显著。 种苗规格：有多张叶片，健康无病斑，苗芽头健壮、长势旺盛，根系发达。
多糖提取使用料液比参考文献
多糖提取使用“料液比”参考文献 说明：在中文文献期刊检索中共检索到43篇，选取前10篇供参考 1、巴西菇多糖提取方法研究 【作者】叶怀义. 于浩. 哈尔滨商业大学食品学院 【刊名】江苏食品与发酵 2004年01期 【摘要】本文探讨了巴西菇多糖的提取工艺，分别作了热水提取和酶法提取的正交试验，并对多糖提取率进行了比较分析。结果显示，热水提取巴西菇多糖的最佳工艺参数是：提取温度110℃，提取时间1.5h，料液比1:25，其多糖最高提取率5.80%。而采用酶法提取巴西菇多糖的最佳工艺参数分别是：木瓜蛋白酶酶用量0.20%，酶解温度55℃，酶解时间2h，作用pH值6.5；纤维素酶酶用量0.15%，酶解温度45℃，酶解时间3h，作用pH值4.5；果胶酶酶用量0.20%，酶解温度40℃，酶解时间3h，作用pH值4.0。其中木瓜蛋白酶提取巴西菇多糖提取率最高，可达到15.08%。 2、茶籽多糖提取工艺的研究 【作者】田洪舟. 裘爱泳. 史小华. 江南大学食品学院 【刊名】中国油脂 2004年06期 【摘要】以乙醇为溶剂对影响茶籽粕中多糖的提取因素进行了实验分析，在单因素实验的基础上，通过正交实验得出优化后的提取工艺条件为：料液比为 1∶12 ，乙醇浓度为55 %，提取温度为55℃，提取时间为3.0h，茶籽多糖的得率和纯度分别为6.92 %和78.74%。 3、榛蘑粗多糖提取工艺的研究 【作者】李巧云. 翟春. 居红芳. 葛粉凤. 常熟高等专科学校化学系 【刊名】化学世界 2004年07期 【摘要】对榛蘑中可溶性粗多糖的提取工艺进行了研究,通过单因素试验和L9(33)正交试验,研究了料液比、温度、时间对多糖提取率的影响，结果显示温度和料液比是影响多糖提取率的主要因素，最佳工艺为料液比1：25，温度100℃，时间4h,在最佳提取工艺时,榛蘑的多糖提取率为4.37%。对常用的醇析方法进行改进,在传统Sevag法除蛋白的基础上采用Sevag法结合酶法除蛋白,大大缩短了除蛋白时间,又用改良的蒽酮—硫酸法测定多糖含量。 4、异枝麒麟菜活性硫酸粗多糖的提取工艺优化 【作者】王庆荣. 岑颖洲. 马夏军. 陈润智. 许少玉. 暨南大学化学系 【刊名】暨南大学学报 2004年03期 【摘要】采用能有效保护抗病毒活性基团的直接水提法提取异枝麒麟菜活性硫酸多糖,通过正交试验研究了影响多糖得率的工艺参数:KCl质量分数、温度、时间、料液比;通过均匀试验研究了其中影响最大的因素的最佳水平.结果表明,温度和KCl质量分数为多糖得率的最大影响因素,其最佳水平分别为125℃和0 93%.结合实际情况,最佳提取工艺条件可为:浸提温度95～100℃、浸提时间6h、料液质量比1∶90、KCl质量分数0 93%. 5、五味子粗多糖提取工艺的研究 【作者】李巧云. 居红芳. 翟春. 常熟高等专科学校化学系 【刊名】食品科学 2004年05期 【摘要】本文对五味子中可溶性粗多糖的提取工艺进行了研究,通过单因素试验和L9(33)正交试验,研究了料液比、温度、时间对多糖提取率的影响,结果显
抗氧化剂抗氧化活性的测定方法
1.抗氧化剂是指在低浓度下能有效延缓或阻止底物氧化的物质。被氧化的底物包括蛋白质、脂质、糖和DNA。 2.初始型抗氧化剂(AH)可通过与脂质自由基L.、过氧自由基LOO.或烷氧自由基LO.反应抑制脂质氧化链反应。 L.+ AH--- LH + A. LOO.+ AH--- LOOH + A. LO.+ AH--- LOH + A. 抗氧化剂自由基A.也能与过氧自由基、烷氧自由基反应从而终止脂质氧化反应。 LOO.+ A.---LOOA LO.+ A.---LOA 次级型抗氧化剂可通过各种机理延缓脂质氧化,如螯合过渡金属、给初始型抗氧化剂补充氢、清除氧以及使活性物质失活等。 抗氧化剂的活性分为在生物体外(如食品中)的活性和在生物体内的活性。本文综述了体外测定抗氧化剂抗氧化活性的方法,不包括在生物体中测定生物活性的方法。 3.评价或表征抗氧化活性的方法为了说明在特定条件下被测物抑制底物氧化的效力或清除自由基的能力 实际测定时至少要说明在测试条件下被测物是抗氧化剂还是促氧化剂;在指定浓度下比较不同测试材料(如被测物与标准抗氧化剂或添加有被测物的测试体系与空白体系)对底物的作用。 评价或表征抗氧化活性的方法有: (1)在指定的时间测量氧化产物或官能团的浓度或吸光度值;( 2)测量反应的速率;
( 3)测量诱导期(延滞期)或氧化达到一定程度所需的时间;( 4)测量速度的积分(即动力学曲线下的面积) ; ( 5)测量被测物产生与标准抗氧化剂相当作用的浓度。4.参数 4.1诱导期( induction period) 诱导期tIND(也叫延滞期, lag period)常定义为化学反应的速度。诱导期是一个相当不确定的值,受检测方法、使用仪器的灵敏性以及一些其他因素的影响。对于脂质氧化,诱导期通常是指链增长阶段动力学曲线的切线和时间轴的交点。 4.2抑制率( percentag e of inhibition)和IC50 抑制率和IC50 (抗氧化剂提供50%抑制作用时的浓度,也可用EC50表示的)常用来表征抗氧化能力。它们不仅与被测抗氧化剂的反应性能和氧化的底物有关,而且受其他因素的影响,如脂质氧化链反应的长度和抑制速率等。此外,用IC50表征抗氧化剂 的活性与比较活性的时间点有关。只有在其他参数相同的情况下,在某一研究中测得的抑制率和IC50才可以与另一研究中测得的值进行直接比较。TEC50是指抗氧化剂提供50%抑制作用所需的时间,也常用来表征抗氧化活性 5.对测定方法的要求 测定抗氧化剂抗氧化活性的方法应满足如下要 求: ( 1)能说明测试体系中发生的反应,并能用明确的动力学图解描述;( 2)测试要有再现性; ( 3)测试效率要足够高; ( 4)方法要相对简单; ( 5)能连续检测; ( 6)应使用与体内或食品有关的活性自由基;
植物源活性肽研究进展
植物源生物活性肽的研究进展 多肽是由天然氨基酸以不同组成和排列方式构成的从二肽到复杂的线性、环形结构的不同肽类的总称，其中可调节生物体生理功能的多肽称为生物活性肽。与蛋白质相比，活性肽不仅有比蛋白质更好的消化吸收性能，还具有促进免疫、调节激素、抗菌、抗病毒、降血压和降血脂等生理机能。此外活性肽还有较好的酸、热稳定性，水溶性及粘度随浓度变化迟钝等优点，易于作为功能因子添加到各种食品中。我国农作物种类品种繁多，利用这些廉价的植物蛋白开发具有高附加值的生物活性肽产品，越来越受到重视。本文重点综述了降血压肽、抗氧化钛、降胆固醇肽这3类生物活性肽的研究进展，将其结构特征与生理功能的关系进行了归纳，同时归纳了活性肽的生理功能，并指出其发展应用前景。 1. 生物活性肽的生理功能 1.1 抗菌活性 抗菌活性肽通常由细菌、真菌产生，或从动植物体中分离。它们尽管在结构上千差万别，但几乎所有的抗菌肽都是阳离子型的，两亲结构是它们的共同特征[1]。国内外研究成果表明，抗菌肽对部分细菌、真菌、原虫、病毒及癌细胞等均具有强大的杀伤作用。临床试验也表明，抗菌肽能够增强机体抵抗病原微生物的能力，而且在体内还不容易产生耐药性。 1.2 免疫活性[2] 免疫活性肽能够刺激机体淋巴细胞的增殖，增强巨噬细胞的吞噬功能，提高机体抵御外界病原体感染的能力，降低机体发病率。从人乳和牛乳的酪蛋白中已检测到具有免疫刺激活性的肽片段，这些肽具有刺激巨噬细胞吞噬能力的作用。另外，乳蛋白、大豆蛋白和大米蛋白等通过适当酶解处理也可产生具有免疫 活性的肽类物质。 1.3 抗高血压活性 血压是在血管紧张素转换酶（angiotensin-convertion enzyme，ACE）的作用下进行调节的，血管紧张素Ⅰ在A C E的作用下可转化为有活性的血管紧张素Ⅱ，使血管平滑肌收缩，引起血压升高。降血压肽是具有抑制ACE活性的肽类， 来源广泛，ACE 抑制肽的主要来源是乳制品和鱼蛋白（沙丁鱼、金枪鱼、
抗氧化活性测定方法
抗氧化方法 一、Determination of Superoxide Anion Scavenging Ability（超氧阴离子清除能 力） 1、determined by a CL method in the pyrogallol-luminol system on a BPCL Ultra-weak luminescence analyzer。（焦性没食子酸-发光胺，荧光检 测） 2、步骤：10μL sample (不同浓度) + 50 μL焦棓酸(6.25*10-4 mol/L) + 0.94 mL of a mixture containing luminol (0.05 mol/L) and carbonate buffer (pH 10.2) （发光胺用pH 10.2碳酸盐缓冲液配成0.05 mol/L） 3、Hi-V, 800; Kv, -1; the spectral range of CL（波长范围）180-800 nm; 温 度：30 ° C.总时间：300S，每2S读数一次。 4、对照：不加样品（样品用水代替）。空白不加焦棓酸（用来调零）。 二、Determination of Scavenging Ability on Hydroxide Radicals（羟基自由基清除能力） 1、CuSO4-Phen-Vc-H2O2 CL system（1 mL体系） 2、50 μL of sample solution （样品液）+ 50 μL of a 1.0 mmol/L CuSO4 solution （CuSO4 溶液）+ 50 μL of a 1 mmol/L 1,10-phenanthroline solution（邻二氮菲溶液）+ 700 μL of a 0.05mol/L borate buffer (pH 9.0) （硼酸缓冲液）+ 100 μL of a 1 mmol/L ascorbate solution + 50 μL of a 0.15% H2O2 solution 3、总时间400S，间隔3S。Hi-V, 800; Kv, -1; the spectral range of CL（波长范围）180-800 nm; 温度：30 ° C. 4、阳性对照：不加样品（样品用水代替）。空白不加H2O2（用来调零）。 三、Determination of Scavenging Effect on Hydrogen Peroxide（过氧化氢清除 能力） 1、luminol-H2O2 system