血凝仪的工作原理PPT课件

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2.BE血凝仪的整个反应过程可以分为三个阶段:
一、不稳定期: 也就是标本和实际进行了混匀之后并未完全进行反应 的过程,这个阶段的变化比较大,两条绿线相差比较大, 并逐渐的靠拢。反应曲线(紫线)在两条绿线之间行走。 二、稳定期: 标本和试剂完全的混匀之后开始进行了化学反应(整 个反应过程完全的处在模拟的人体生理环境下),两条绿 线动态的开闭,但是趋近于一个平台,我们平时俗称为平 台期,这期间未出现明显的凝血,而紫线也相对稳定的走 形。 三、凝血期: 这时候紫线发生了迅速的变化,也就是出现了反应的 质变,穿透平台期,出现凝血。这时候引入微积分概念, 在整个紫线上每一点做切线,而切线斜率变化最大的一点 也就是 Δ A最大的一点即为凝血点。
血凝仪的工作原理
目前开展的血栓/止血成份检测的主要方法有凝固法、 底物显色法、免疫法、乳胶凝集法等。在血栓/止血检验中 最常用的凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间 (APTT)、纤维蛋白原(FIB)、凝血酶时间(TT)、内源 凝血因子、外源凝血因子、高分子量肝素、低分子量肝素、 蛋白C、蛋白S等均可用凝固法测量。所以目前半自动血凝 仪基本上都是以凝固法测量为主,而在全自动血凝仪中也 一定有凝固法测量。 凝固法中又可分为光学法和磁珠法两类。由于光学法 几乎可涵盖各种检测方法,为了降低仪器制造成本,全自 动血凝仪以光学法居多。但也有少数高级全自动血凝仪中 凝固法测量采用无样品干扰的双磁路磁珠法,而其它测量 采用光学法,并可同时进行检测。
一、术前常规检查(出血危险过筛试验): 1.凝血酶原时间测定(PT); 2.活化部分凝血活酶时间测定(APTT); 3.凝血酶时间测定(TT); 4.纤维蛋白原含量测定(FIB); 5.血小板计数(PLT);
二、术前凝血试验的重要意义: 目的:确定患者是否有止血功能缺陷(尤 其是轻微止血异常)
必要性:检出有出血倾向的患者,尤其是 轻型,亚临床型凝血因子缺乏(先天或后 天)。给予替代或对症治疗,防止术中、术 后出血,术后伤口愈合差。
光电磁原理是真正意义上的动态法检测,这样避 免了: 1、传统光学法对于标本颜色改变对于实验的影响, 例如:黄疸、脂血、乳糜血; 2、传统磁珠法对于标本粘度改变对于实验的影响。 现今随着社会发展,人体血液黏度逐渐升高,单 纯的磁珠法已经并非往日的金标准。 德国BE血凝仪就是应用的光电磁原理:以光学法 为基础,磁珠起到了一个信号补偿作用,当血浆粘度 增大后,旋转的磁珠向杯中心靠拢,当测试杯侧壁外 安装的红外反射式光电器件检测不到磁珠运动变化时 表明血浆凝固,即测量结束。
第四代,光电磁法: 综上所述,前三代的检测原理都是终点法, 即在检测前设置一个检测的终点,一旦达到检测 停止的指标即判断凝血,这受到很多限制,无论 是标本还是实验环境的改变都会引起检测的失准。 第四代的光电磁原理结合了光学法和磁珠法之优 点的第四代原理,测试杯中放有磁珠,测试时, 测试杯下面的永久磁铁旋转,带动杯中磁珠沿杯 壁旋转。测试杯的侧壁外安装有红外反射式光电 器件监视磁珠运动变化。根据运动力学原理当血 浆粘度增大后,旋转的磁珠将向杯中心靠拢,光 电器件检测不到磁珠时检测结束。
第二代,光学法: 光学法血凝仪是根据血浆凝固过程中浊度的变化来测定凝血功 能。根据仪器不同的光学测量原理,又可分为散射比浊法和透射比 浊法两类。(1)散射比浊法:根据待检样品在凝固过程中散射光的 变化来确定检测终点的。在该方法中检测通道的单色光源与光探测 器呈90度直角,当向样品中加入凝血激活剂后,随样品中纤维蛋白 凝块的形成过程,样品的散射光逐步增加,当样品完全凝固以后, 散射光的强度不在变化,通常是把凝固的起始点作为0%,凝固终点 作为100%,把50%作为凝固时间。光探测器接收这一光学的变化,将 其转化为电信号,经过放大再被传送到监测器上进行处理,描出凝 固曲线。 (2)透射比浊法:是根据待测样品在凝固过程中吸光度变化 来确定凝固终点的,与散射比浊法不同的是该方法的光路同一般的 比色法一样呈直线安排,来自光源的光线经过处理后变成平行光, 透过待测样品后照射到光电管变成电信号,经过放大后监测处理。 当向样品中加入凝血激活剂后,开始的吸光度非常弱,随着反应管 中纤维蛋白凝血的形成,标本吸光度也逐渐增强,当凝块完全形成 后,吸光度趋于恒定。血凝仪可以自动描绘吸光度的变化曲线并设 定其中某一点对应的时间为凝固时间。
对第二代的传统的光学原理血凝仪容易 受到标本的黄疸、脂血、乳糜血等的影响。 对第三代的双磁路磁珠法原理的血凝仪 在现今社会血黏度增高的趋势下也非常容易 受到标本黏度变化的影响。 第四代源自文库电磁原理由此出现。
第一代,电流法: 即是将待检样品作为电路的一部分,由 于纤维蛋白具有导电性,可利用电流的断与 否来判断纤维蛋白的形成与否,即判断凝固 终点。具体表现为:将两电极插入待检样品, 其中一个电极可以上下运动。当两个电极都 在血浆中的时候,电路是连通的;当其中一 个电极向上运动离开血浆时,电路时断开的。 往血浆中加入激活剂,血浆中纤维蛋白形成, 此时可运动电极向上运动时,可勾起纤维蛋 白丝。由于纤维蛋白丝是导电的,故此电路 仍可连通,此时仪器即可将其判为凝固终点。
第三代,磁珠法:
磁珠法是根据血浆凝固过程中粘度的变化来测量凝 血功能的。根据仪器对磁珠运动测量原理的不同,又可 分为光电探测法和电磁珠探测法。 (1)光电探测法:在磁珠法中光电探测器的作用与 光学中的不同,它只测量血浆凝固过程中磁珠的运动规 律,与血浆的浊度无关。在磁珠法中的一对电磁铁安放 在测试杯的两端,它们产生恒定的交替磁场使磁珠在测 试杯中摆动,在与磁珠摆动的垂直方向安放一对光电接 收装置,在磁珠摆幅衰减到50%时确定凝固终点。 (2)电磁探测法:电磁探测法又可称为双磁路磁珠 法,其中一对磁路用于吸引磁珠摆动,另一对磁路利用 磁珠摆动过程中对磁力线的切割所产生的电信号,对磁 珠摆动幅度进行监控,当磁珠摆动幅度衰减到50%确定凝 固终点。
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