微生物培养技术
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Ferrari 在扩散盒培养法的基础上等设计种称 为SSMS的分离土壤微生物的方法.
该 方 法 利 用 倒 置 的TCI( tissue culture insert)装置,结合FISH检测技术,并最终分 离得到未培养的TM7 种类的细菌.
荧光原位杂交技术 (FISH)
荧光原位杂交技术(fluorescent in situ hybridization),简称FISH。 是利用荧光标 记的特异核酸探针与细胞内相应的靶DNA分子 或RNA分子杂交,通过在荧光显微镜或共聚焦 激光扫描仪下观察荧光信号,来确定与特异探 针杂交后被染色的细胞或细胞器的形态和分布, 或者是结合了荧光探针的DNA区域或RNA分 子在染色体或其他细胞器中的定位。
人为设计的低营养培养基很难达到与土壤或自 然环境的营养元素种类及含量一致,这样,利 用无菌的土壤浸出液或 者 是 利 用 无 菌 的 海水等自然环境样品直接当做培养基来富集细 菌是一个十分有效的方法
得到天然培养基的例子 在研究海洋微生物时,研究者先通过分级过滤 除去较大的丝状菌以及常见细菌类群。 最后收集经0.22 μm微孔滤膜滤过的海水作为 目的培养液。
原位仿生境培养策略 限制性培养策略 单细胞微操作策略
SSMSቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
土壤基质滤膜法 土壤基质+滤膜
研究表明传统的培养方法:通常采用的是营养 丰富的培养基, 以期达到微生物快速生长和最 大生物产量, 结果导致分离的大多为生长迅速 且偏爱丰富营养的微生物。而一些特殊的微生 物类群并不能够得到。
现状
目前我们在未培养微生物的培养基设计上通常是依靠 低浓度营养液,添加丰富多样的碳源、氮源、氨基酸 和维生素等,并在此基础上,添加一些有益的促进或 抑制因子等来提高微生物可培养率 这种方法在一定程 度上,能分离到大量的不同种类 的细菌,但对于分离得到未培养难培养细菌机率 还是相对较小。
1.现有培养条件不能再现原生态环境条件 2.人工培养环境忽视或破坏了原生境中微生物的 生态关系比如拮抗,竞争,互利共生等 3.人工营养基质浓度过高或氧化环境的压力
微生物培养技术
土壤基质滤膜法 (SSMS)
未培养微生物
自然界存在许多独特但是又很难纯培养的微生物, 它们不能在常规的培养基上面通过传统的涂板 划线法得到。它们被称为未培养微生物或难培 养微生物。
前沿的培养技术
包括有 :稀释培养法、高通量培养技术、模拟 自然环境的扩散盒技术、细胞微囊包埋技术、 土壤基质膜装置等