实验项目八 双黄连口服液中黄芩苷的含量测定

实验项目八双黄连口服液中黄芩苷的含量测定

【实验目标】

1. 正确解读《中国兽药典》相关规定，在模拟的工作环境和过程中，以学生和药检工的双

重身份，完成双黄连口服液中黄芩苷的含量测定；

2.掌握HPLC外标一点法测定中兽药制剂含量技术，理解测定原理，熟练规范操作；

3.正确规范书写实验报告和检验报告书；

4.了解HPLC常用其它定量方法。

【实验原理】

利用高效液相色谱法分离双黄连口服液中的黄芩苷，在λmax274nm处进行检测。为了减小实验条件波动对分析结果的影响，采用随机外标一点法定量。

【仪器试药】

1．高效液相色谱仪、超声波提取器、移液管；

2．甲醇（色谱纯）、冰醋酸（AR）、双蒸水、甲醇（AR）

3．黄芩苷对照品（中国药品生物制品检定所）、双黄连口服液（市售品）

【实验内容】

照高效液相色谱法（《中国兽药典》2015版二部附录35页）测定双黄连口服液中黄芩苷含量。

【标准规定】

《中国兽药典》2015版二部P580页，含量测定项规定：本品含黄芩按黄芩苷计，每1ml 不得少于10.0mg。

【操作步骤】

1. 色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-水-冰醋酸（50：50：1）为流动相，检测波长274nm。理论塔板数按黄芩苷峰计不低于1500.

2.对照品溶液制备：精密称取黄芩苷对照品10mg，置100ml量瓶中，加50%甲醇适量，置水浴中振摇使溶解，放置至室温，稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml含黄芩苷0.1mg）。

3.制备供试品溶液：精密量取本品1ml，置50ml量瓶中，加50%甲醇适量，超声处理20min，放置至室温，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。

4.测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5ul，注入高效液相色谱仪，测定，即得。

5.结果判断：根据测定结果，判断此项检验是否合格。

【思考】

1.HPLC中常用的定量方法有几种？外标一点法有何优缺点？

2. 双黄连口服液中黄芩苷的含量测定还可用哪些方法？