鸡胚接种技术医学PPT
合集下载
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
✪ 卵白
➢ 在胚胎发育晚期供给鸡胚营养
——鸡胚的孵育 和检查
✪ 受精鸡卵的选择
➢ 接种病毒的受精鸡卵应未感染已知病毒或其它微生 物，最好来自无特定病原体(Specified Pathogen Free, SPF)鸡群。
➢ 受精卵的壳最好是白色的，利于检卵灯观察鸡胚的 发育情况。
➢ 受精卵必须新鲜，保存在5~20℃不超过10天。
——鸡胚的接种途 径和方法
✪ 根据病毒种类选择适宜的接种部位：
➢ 羊膜囊和尿囊腔同时接种法：流感病毒 ➢ 绒毛尿囊膜接种法：牛痘、天花、单纯疱疹病毒 ➢ 卵黄囊接种法：虫媒病毒（如登革热病毒、黄热病病毒）
——鸡胚的接种途 径和方法
✪ 羊膜囊接种：
➢ 主要应用于临床材料中分离流感病毒。 ➢ 接种到羊膜囊中的病毒可遍及胚胎各种组织和细胞，
——鸡胚的结构 与生理
✪ 鸡胚的发育过程：Day 3
➢ 鼻、腿、翅开始形成，器官出现。 ➢ 尿囊开始长出，胚胎的位置与蛋的长轴垂直。 ➢ 胚胎与延伸的卵黄囊血管形似蚊子。
——鸡胚的结构 与生理
✪ 鸡胚的发育过程：Day 4
➢ 尿囊和羊膜腔形成。 ➢ 卵黄体积继续增大，卵黄囊血管包围卵黄近1/3。 ➢ 胚胎与卵黄囊血管形似蜘蛛。
✪ 绒毛尿囊膜
➢ 位于壳膜之下，起胚胎呼吸器官的功能，氧气的交
换是在绒毛尿囊膜的血管内通过卵壳孔进行。
——鸡胚的孵育 和检查
✪ 羊膜与羊膜腔
➢ 羊膜为胚胎最内层包被；羊膜腔内有羊水，胚胎浸泡 于其中。
✪ 尿囊腔
➢ 位于绒毛尿囊膜与羊膜之间，为胚胎的排泄器官。
✪ 卵黄囊
➢ 主要营养的存储场所，在胚胎发育早期供给鸡胚营养
鸡胚接种技术
鸡胚接种技术
——概况
✪ 鸡胚接种的优点：
➢ 是个有机体，有神经和血管分布及脏器构造，为 病毒生长提供丰富营养物质和合适的环境。
➢ 组织分化程度较低，对大多数病毒较敏感，病毒 繁殖量高。
➢ 很少携带病毒或细菌，对接种的病毒不产生抗体。 ➢ 来源充足、经济，操作简便。
鸡胚接种技术
——概况
——鸡胚的结构 与生理
✪ 鸡胚的发育过程：Day 5
➢ 生殖腺已性分化，胚胎出现了两性的区别。 ➢ 面部和鼻部开始有了雏形。 ➢ 胚胎弯曲成“C”形。 ➢ 眼的黑色素大量沉积，照蛋可明显看到黑色的眼睛
——鸡胚的结构 与生理
✪ 鸡胚的发育过程：Day 6
➢ 胚体已初具翼和腿的外形，眼睛黑色素更多。 ➢ 尿囊增长迅速，尿囊血管系统迅速发育，已经覆盖
——鸡胚的孵育 和检查
✪ 鸡胚的孵育
➢ 孵育温度为38~39℃ ➢ 孵育湿度为40~70% ➢ 翻卵：防止蛋白与壳膜粘连，促进羊膜运动和空气
流通。每天180°转动鸡胚1~2次。 ➢ 通风：为了排出CO2和吸入O2。
——鸡胚的孵育 和检查
Fra Baidu bibliotek✪ 检卵：在胚胎发育的早期，不易辨认。孵育 4~5日后即可于检卵灯上检测鸡胚受精与否及 发育情况
使具有特定细胞亲嗜性的病毒被充分利用，从而提高 病毒繁殖的可能性。 ➢ 病毒也可被排泄到尿囊腔，使尿囊液中含有大量病毒。 ➢ 分离病毒时，可同时收获羊水和尿囊液
——鸡胚的接种途 径和方法
✪ 绒毛尿囊膜接种：
➢ 主要用于分离和繁殖在绒毛尿囊膜上产生斑点状和痘 疱状的病毒，如牛痘、天花、单纯疱疹和鸟痘病毒。
✪ 鸡胚的发育过程：Day 8~11
8
9
10
11
——鸡胚的结构 与生理
✪ 约10日龄鸡胚的结构示意图
✪ 卵壳与壳膜
——鸡胚的结构 与生理
➢ 卵壳位于最外层的石灰质硬壳，上有细孔，进行气
体交换。
➢ 壳膜位于卵壳的下层，能使气体和液体分子交换。
➢ 培养鸡胚时需要控制一定的湿度和气流。
✪ 气室
➢ 呼吸和调节压力
羊膜与部分卵黄。 ➢ 卵黄囊血管分布在卵黄面积达2/3以上。 ➢ 可见头部和躯干部两个小圆团。
——鸡胚的结构 与生理
✪ 鸡胚的发育过程：Day 7
➢ 卵黄体积达到最大程度，胎儿的外形已具备禽类的特点。 ➢ 头和眼所占的比例相当大，前后肢分化明显。 ➢ 照蛋时胚胎在羊水中不容易看清楚。
——鸡胚的结构 与生理
➢ 可在绒毛尿囊膜上滴定这些病毒，通过产生斑和痘的 数目来计算感染性病毒颗粒的数目。
➢ 还可用于抗体滴定，因为斑和痘数目减少的程度与抗 体浓度有关。
——鸡胚的接种途 径和方法
✪ 尿囊腔接种：
➢ 用于流感病毒、流行性腮腺炎病毒和新城疫病毒的适 应和传代培养。
➢ 这些病毒被接种到尿囊腔后，可在内皮细胞中复制， 复制的病毒被释放到尿囊液中，因此，在尿囊液中喊 与大量的病毒。
➢ 未受精卵：只见模糊的卵黄阴影，不见血管和鸡胚 痕迹。
➢ 活胚胎：具有清晰的血管和鸡胚暗影，较大的鸡胚 还可见到胎动。但孵育14~15天以后胎动不明显或 无胎动。
➢ 死胎：血管昏暗模糊，没有胎动。
——鸡胚的接种途 径和方法
✪ 鸡胚的接种途径：
➢ 羊膜囊接种 ➢ 绒毛尿嚢膜接种 ➢ 尿嚢腔接种 ➢ 卵黄嚢接种
✪ 鸡胚的发育过程：Day 1
心脏、血管、消化道、脊 柱、神经系统、头、眼开 始形成。
➢ 鸡胚外观无明显变化 ➢ 在卵黄上可见到椭圆形的胎盾，是未来的胚区
——鸡胚的结构 与生理
✪ 鸡胚的发育过程：Day 2
➢ 卵黄囊、羊膜、绒毛膜开始形成。 ➢ 胚盘被红色血管围成樱桃形或椭圆形。 ➢ 胚胎中可见一搏动的原始心脏。
——鸡胚的接种途 径和方法
✪ 卵黄囊接种：
➢ 用于虫媒病毒、衣原体及立克次体等的分离和繁殖， 这些大的病原体能在卵黄囊的内皮细胞中快速生长。
✪ 鸡胚接种的缺点：
➢ 病毒通常不使鸡胚产生特异性的感染指征，必须利 用另外的实验来证明病毒的存在。
➢ 被母鸡食入的抗生素会传递给鸡胚，使接种病毒繁 殖受到抑制。
➢ 鸡胚本身可能携带病毒，影响病毒接种及实验结果 ➢ 操作不当污染，导致鸡胚死亡
——鸡胚的结构 与生理
✪ 鸡胚的发育过程：Day 0
——鸡胚的结构 与生理
➢ 在胚胎发育晚期供给鸡胚营养
——鸡胚的孵育 和检查
✪ 受精鸡卵的选择
➢ 接种病毒的受精鸡卵应未感染已知病毒或其它微生 物，最好来自无特定病原体(Specified Pathogen Free, SPF)鸡群。
➢ 受精卵的壳最好是白色的，利于检卵灯观察鸡胚的 发育情况。
➢ 受精卵必须新鲜，保存在5~20℃不超过10天。
——鸡胚的接种途 径和方法
✪ 根据病毒种类选择适宜的接种部位：
➢ 羊膜囊和尿囊腔同时接种法：流感病毒 ➢ 绒毛尿囊膜接种法：牛痘、天花、单纯疱疹病毒 ➢ 卵黄囊接种法：虫媒病毒（如登革热病毒、黄热病病毒）
——鸡胚的接种途 径和方法
✪ 羊膜囊接种：
➢ 主要应用于临床材料中分离流感病毒。 ➢ 接种到羊膜囊中的病毒可遍及胚胎各种组织和细胞，
——鸡胚的结构 与生理
✪ 鸡胚的发育过程：Day 3
➢ 鼻、腿、翅开始形成，器官出现。 ➢ 尿囊开始长出，胚胎的位置与蛋的长轴垂直。 ➢ 胚胎与延伸的卵黄囊血管形似蚊子。
——鸡胚的结构 与生理
✪ 鸡胚的发育过程：Day 4
➢ 尿囊和羊膜腔形成。 ➢ 卵黄体积继续增大，卵黄囊血管包围卵黄近1/3。 ➢ 胚胎与卵黄囊血管形似蜘蛛。
✪ 绒毛尿囊膜
➢ 位于壳膜之下，起胚胎呼吸器官的功能，氧气的交
换是在绒毛尿囊膜的血管内通过卵壳孔进行。
——鸡胚的孵育 和检查
✪ 羊膜与羊膜腔
➢ 羊膜为胚胎最内层包被；羊膜腔内有羊水，胚胎浸泡 于其中。
✪ 尿囊腔
➢ 位于绒毛尿囊膜与羊膜之间，为胚胎的排泄器官。
✪ 卵黄囊
➢ 主要营养的存储场所，在胚胎发育早期供给鸡胚营养
鸡胚接种技术
鸡胚接种技术
——概况
✪ 鸡胚接种的优点：
➢ 是个有机体，有神经和血管分布及脏器构造，为 病毒生长提供丰富营养物质和合适的环境。
➢ 组织分化程度较低，对大多数病毒较敏感，病毒 繁殖量高。
➢ 很少携带病毒或细菌，对接种的病毒不产生抗体。 ➢ 来源充足、经济，操作简便。
鸡胚接种技术
——概况
——鸡胚的结构 与生理
✪ 鸡胚的发育过程：Day 5
➢ 生殖腺已性分化，胚胎出现了两性的区别。 ➢ 面部和鼻部开始有了雏形。 ➢ 胚胎弯曲成“C”形。 ➢ 眼的黑色素大量沉积，照蛋可明显看到黑色的眼睛
——鸡胚的结构 与生理
✪ 鸡胚的发育过程：Day 6
➢ 胚体已初具翼和腿的外形，眼睛黑色素更多。 ➢ 尿囊增长迅速，尿囊血管系统迅速发育，已经覆盖
——鸡胚的孵育 和检查
✪ 鸡胚的孵育
➢ 孵育温度为38~39℃ ➢ 孵育湿度为40~70% ➢ 翻卵：防止蛋白与壳膜粘连，促进羊膜运动和空气
流通。每天180°转动鸡胚1~2次。 ➢ 通风：为了排出CO2和吸入O2。
——鸡胚的孵育 和检查
Fra Baidu bibliotek✪ 检卵：在胚胎发育的早期，不易辨认。孵育 4~5日后即可于检卵灯上检测鸡胚受精与否及 发育情况
使具有特定细胞亲嗜性的病毒被充分利用，从而提高 病毒繁殖的可能性。 ➢ 病毒也可被排泄到尿囊腔，使尿囊液中含有大量病毒。 ➢ 分离病毒时，可同时收获羊水和尿囊液
——鸡胚的接种途 径和方法
✪ 绒毛尿囊膜接种：
➢ 主要用于分离和繁殖在绒毛尿囊膜上产生斑点状和痘 疱状的病毒，如牛痘、天花、单纯疱疹和鸟痘病毒。
✪ 鸡胚的发育过程：Day 8~11
8
9
10
11
——鸡胚的结构 与生理
✪ 约10日龄鸡胚的结构示意图
✪ 卵壳与壳膜
——鸡胚的结构 与生理
➢ 卵壳位于最外层的石灰质硬壳，上有细孔，进行气
体交换。
➢ 壳膜位于卵壳的下层，能使气体和液体分子交换。
➢ 培养鸡胚时需要控制一定的湿度和气流。
✪ 气室
➢ 呼吸和调节压力
羊膜与部分卵黄。 ➢ 卵黄囊血管分布在卵黄面积达2/3以上。 ➢ 可见头部和躯干部两个小圆团。
——鸡胚的结构 与生理
✪ 鸡胚的发育过程：Day 7
➢ 卵黄体积达到最大程度，胎儿的外形已具备禽类的特点。 ➢ 头和眼所占的比例相当大，前后肢分化明显。 ➢ 照蛋时胚胎在羊水中不容易看清楚。
——鸡胚的结构 与生理
➢ 可在绒毛尿囊膜上滴定这些病毒，通过产生斑和痘的 数目来计算感染性病毒颗粒的数目。
➢ 还可用于抗体滴定，因为斑和痘数目减少的程度与抗 体浓度有关。
——鸡胚的接种途 径和方法
✪ 尿囊腔接种：
➢ 用于流感病毒、流行性腮腺炎病毒和新城疫病毒的适 应和传代培养。
➢ 这些病毒被接种到尿囊腔后，可在内皮细胞中复制， 复制的病毒被释放到尿囊液中，因此，在尿囊液中喊 与大量的病毒。
➢ 未受精卵：只见模糊的卵黄阴影，不见血管和鸡胚 痕迹。
➢ 活胚胎：具有清晰的血管和鸡胚暗影，较大的鸡胚 还可见到胎动。但孵育14~15天以后胎动不明显或 无胎动。
➢ 死胎：血管昏暗模糊，没有胎动。
——鸡胚的接种途 径和方法
✪ 鸡胚的接种途径：
➢ 羊膜囊接种 ➢ 绒毛尿嚢膜接种 ➢ 尿嚢腔接种 ➢ 卵黄嚢接种
✪ 鸡胚的发育过程：Day 1
心脏、血管、消化道、脊 柱、神经系统、头、眼开 始形成。
➢ 鸡胚外观无明显变化 ➢ 在卵黄上可见到椭圆形的胎盾，是未来的胚区
——鸡胚的结构 与生理
✪ 鸡胚的发育过程：Day 2
➢ 卵黄囊、羊膜、绒毛膜开始形成。 ➢ 胚盘被红色血管围成樱桃形或椭圆形。 ➢ 胚胎中可见一搏动的原始心脏。
——鸡胚的接种途 径和方法
✪ 卵黄囊接种：
➢ 用于虫媒病毒、衣原体及立克次体等的分离和繁殖， 这些大的病原体能在卵黄囊的内皮细胞中快速生长。
✪ 鸡胚接种的缺点：
➢ 病毒通常不使鸡胚产生特异性的感染指征，必须利 用另外的实验来证明病毒的存在。
➢ 被母鸡食入的抗生素会传递给鸡胚，使接种病毒繁 殖受到抑制。
➢ 鸡胚本身可能携带病毒，影响病毒接种及实验结果 ➢ 操作不当污染，导致鸡胚死亡
——鸡胚的结构 与生理
✪ 鸡胚的发育过程：Day 0
——鸡胚的结构 与生理