药理实验

实验一抗炎药物对大鼠发热反应的影响

【目的】

熟悉致炎物质内毒素致大鼠发热模型制作方法和进一步理解非甾体抗炎药的抗炎作用

【原理】

发热反应大多是各种致热因子作用于机体，产生和释放热原，并进一步影响体温调节中枢，使调温起步点提高，体温相应升高，因此，实验室常用有关的刺激因子激活产生内热源。阿司匹林是非甾体抗炎药，具有抗炎，镇痛和解热的作用，其解热作用机理主要通过抑制环氧酶（COX-2）从而抑制前列腺素（PGE）的合成，阿司匹林为PGE的合成抑制剂。

【实验材料】

动物：4只大鼠

药品：1%阿司匹林0.9%生理盐水

器材：注射器，肛门温度计，固定器

【步骤】

1．取大鼠四只编号，称重（150-200g最适宜）一只对照组，三只实验组，用肛门温度计测量体温（肛门表面涂上凡士林，插入2cm，放置3到5分钟后读取读数），记录下正常体温（大鼠正常体温范围36.6-38.3℃）

2.将伤寒内毒杆菌用生理盐水配置后，给大鼠50ugl/kg腹腔注射后，将大鼠固定在箱内

4.1 h后大鼠测体温（此时发热最高温[1]，上升约0.99-0.93度，此时发热模型已造成）

5.对照组注射生理盐水10ml/kg，实验组注射阿司匹林10ml/kg，每隔1小时测量一次肛温，共3次，对比发热温度，计算下降值

兔号正常体温发热体温差值

1h 2h 3h 1h 2h 3h

1

2

3

4

【注意事项】

1.大鼠体重以100-200g最适宜，正常体温范围在36.6-36.8度之间

2.注射细胞内毒素后，发热大鼠大部分出现寒颤，战栗，树毛等症状。

3.进行体温实验时必须考虑动物的活动情况，如果把动物长时间捆绑，体温可显著降低，当动物挣扎时可使体温升高，因此需要把动物固定在木盒内，以限制多于的活动。

4.实验环境的温度能明显影响发热反应速度和强度，低温对动物的发热比常温环境中强而持久，因此在进行实验时常使室温保持在偏低水平（20-25），而当前的11月份的天气满足这一条件。

【思考题】

为什么先注射阿司匹林再注射内毒素造模？

1.先给药后造模可以看做是预防性给药，先造模后给药可以看做是治疗性给药，也有关于，

药物起效时间和造模起效时间的考虑

(1)阿司匹林半小时至2小时内达到峰值[1]

(2)内毒素在1h-1.5h以及3h时体温最高[2]

内毒素升温曲线

综合考虑，选用先造发热模型，1h后再注射阿司匹林的方法。

[1]药局(日) 25(6),117-118，1974

[2] 周燕文 , 陈丽, 兰聪贤. 人血浆中水杨酸的测定及阿司匹林人体药物动力学研究[J]. 华西药学杂志, 2008, 23(5):572-574.

实验二抗炎药物对大鼠足趾肿胀的影响

【目的】

熟悉致炎物质致大鼠后肢足趾炎症性肿胀模型制作方法和进一步理解抗炎药的抗炎作用

【原理】

角叉菜胶或新鲜蛋清等致炎物质被注入后肢足趾后，可引起局部血管扩张，通透性增强，组织水肿等炎性反应，最后导致足趾体积变大。

地塞米松抗炎作用：可减轻和防止组织对炎症的反应，从而减轻炎症的表现。激素抑制炎症细胞，包括巨噬细胞和白细胞在炎症部位的集聚，并抑制吞噬作用、溶酶体酶的释放以及炎症化学中介物的合成和释放。

【实验材料】

1.动物：大鼠8只，同一性别

2.药品：1%角叉菜胶溶液，5%地塞米松，生理盐水

3.器材：大鼠固定器，注射器，记号笔，软皮尺

【方法与步骤】

1.每组取大鼠两只，称重，做好标记，一只大鼠腹腔注射生理盐水1ml/kg，另一只腹腔注射0.5%地塞米松1ml/kg。

2.在鼠足某处用记号笔画线作为测量标线，用软皮尺测量踝关节周长

3.在2鼠注射药物15min后，从右后足掌心向踝关节方向皮下注射1%角叉菜胶溶液0.1ml

4.在注射致炎药物后的30min，60min，120min，180min，分别测量踝关节周长

5.将致炎后的足趾周长减去致炎前足趾周长即为足趾肿胀度

【结果与处理】

表1 地塞米松对大鼠足趾肿胀的影响

鼠号体重药量(ML) 正常右后致炎后足趾肿胀度

足趾周长30min 60min 120min 180min 第一组

第二组

第三组

第四组

【注意事项】

1.角叉菜胶溶液（米黄~~浅灰色）需要在用前一天配制，4度冰箱保存

2.体重120-150g的大鼠对致炎剂最敏感，肿胀度高，差异性小

3.软尺测量要固定在一定部位，由一人负责，动作熟练以减少误差

4.注射致炎剂时注意药液勿外漏

5.软尺测量要固定在一定部位，由一人负责，动作熟练以减少误差