治疗性血管新生实验研究的若干进展优质课件PPT

2021/02/01
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Relative Ratio
(COX-2/actin)
Relative Ratio (COX-2/actin)
-actin
COX-2
0 4 8 16 32
0 0.5 2.5 5 10 15
Time(h)
bFGF(ng/ml)
0.8 0.6 0.4 0.2
0
0
4
8
16
32
Time(h)
PGE2 (pg/ml)
400
*
350
*
bFGF
300 250
* *
bFGF+NS-398
200
*
150 100
#
#
#
#
#
50
0
0 0.5 2.5 5 10 15
bFGF (ng/ml)
bFGF-induced PGE2 secretion of bEnd.3 & effect 2021/02/01 of COX-2 inhibitor on it (ELIS1A6 )
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Growth Factor Receptor PTKs
FGF
FAK N
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Phosphorylation FAK Tyr-397
Band 4.1
Kinase Domain
F.A.T C
Y397
Pro-1 Pro-2
Pwk.baidu.com
Activitied FAK
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Crk DOCK180
Rac WAVE/Scar
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Therapeutic Angiogenesis
治疗性血管新生
Folkman, J
将外源性血管新生诱导因子导入缺血 组织，增强缺血区毛细血管新生，从而 加速侧枝循环的形成。
主要用于治疗缺血性(心血管)疾病。
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4
VEGF治疗
蛋白治疗 基因治疗
肌肉注射 局部灌注 A.V.滴注 渗透泵心腔外注入
2
1.5
1
0.5
0 0 0.5 2.5 5
10 15
bFGF(ng/ml)
Effect of bFGF on COX-2 protein
expression in bEnd.3 (Western Blot)
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Control
bFGF
Effect of bFGF(10ng/ml) on COX2 protein
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Paxillin Src CAS
治疗性血管新生实验研 究的若干进展
金惠铭
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治疗性血管新生实验研究 的若干进展
治疗性血管新生的概念及现况
一.血管新生旁观分子对内皮细胞增殖的影响
二.生长因子对内皮细胞迁移的双相调节
三. 内皮细胞生长因子受体活性的动态变化
四. 血管内皮祖细胞
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2
治疗性血管新生的 概念及现况
1
0.8
0.6
0.4
0.2
0 0 0.5 2.5 5
10 15
Time(h)
COX-1 COX-2
Relative Ratio
(COX-1,2/GAPDH)
Relative Ratio
(COX-1,2/GAPDH)
Effect of bFGF on COX mRNA 2021/02/01 expression in bEnd.3 (RT-PCR) 15
J Law, Medicine & Ethics
2002, 30(3): 361~366
从实验室到临床:
一位科学家的旅行
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一.
血管新生旁观分子对 内皮细胞增殖的影响
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Bystander molecules
(血管新生) 旁观分子
COX-2，PGE2，Integrins，etc.
VEGF(pg/ug)
2
1.5
1
*
*
0.5
0
bFGF
bFGF+AH6809 bFGF+NS-398
Treatments
Effects of COX-2 inhibitor and PGE2R antagonist on bFGF-induced VEGF
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secretion in bEnd.3
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bEnd.3 (200 ×)
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经典途径
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A492
0.25 0.2
*
*
*
*
*
0.15
0.1
0.05
0
0
0.5 2.5
5
10
15
bFGF (ng/ml)
bFGF-induced proliferation of bEnd.3
(MTT)
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bFGF
经
典
COX-2
途
径
EC增殖
旁路 途 径
PGE2
VEGF
bFGF引起EC多途径增殖
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信号转换
bFGF
非特异性
VEGF
EC特异性
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二.
生长因子对内皮细胞迁 移的双相调节
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EC划痕损伤模型
EC scratch wound model
研究: 细胞迁移 ( cell migration)
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0h
24h
48h
Dynamic changes of cell migration induced by bFGF in cultured bEnd.3
202L1/0e2f/t0:1 bFGF (5µg/L) Center: control Right: bFGF (15 µg/L) 22
expression in bEnd.3 (8h,ABCmethod,400X)
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GAPDH
COX-1
COX-2
0 1 2 3 6 12 Time(h)
0 0.5 2.5 5 10 15 bFGF(ng/ml)
1 0.8 0.6 0.4 0.2
0
0
COX-1 COX-2
1 2 3 6 12 Time(h)
迁移距离(微米)
700 0ug/L
600
5ug/L
10ug/L
500
15ug/L
400
300
200
100
0
0h
12h
24h
36h
48h
测量时间(小时)
内皮细胞体外划痕损伤模型中bFGF
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对细胞迁移的影响
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Focal Adhesion Kinase
粘着斑激酶
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病毒载体介导 局部注射
基因埋线
脂质介导
球囊导管导入
转化细胞包被应用
质粒 DNA 介导 冠脉内支架
细胞治疗
治疗性血管新生常用的方法
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细胞铺路 Cellular Spreading
分子搭桥
Molecular Bridging
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Folkman J
From the lab to the clinic: one investigator’s journey