大八角根化学成分研究

大八角根化学成分研究

作者：牛长山王亚丹屈晶庾石山李勇刘云宝马双刚吕海宁陈霞徐嵩

来源：《中国中药杂志》2014年第14期

[摘要]采用硅胶、Sephadex LH-20、ODS及制备型HPLC等多种色谱技术，从大八角根中分离得到10个化合物，根据理化性质及波谱数据（MS， 1H， 13C-NMR）分析分别鉴定为cycloparviflorolide（1），cycloparvifloralone（2），tashironin（3），tashironin A（4），anislactone A（5），anislactone B（6），pseudomajucin（7），syringaldehyde（8），methyl-4-hydroxy-3，5-dimethoxybenzoate（9）和（E）-3-methoxy-4，5- methylenedioxycinnamic alchol （10）。其中化合物1～4，8～10为首次从该植物中分离得到。在1.0×10-5 mol·L-1下，在LPS刺激小鼠小胶质细胞释放NO抑制模型上，化合物5，6抑制率分别为75.31%，53.7%。

[关键词]大八角；化学成分；倍半萜

大八角Illicium majus Hook et Thoms为八角科八角属植物，乔木，广泛分布于我国南部、缅甸南部及越南北部[1]。作为民间传统草药，大八角的根、叶和树皮具有理气和胃、活血止痛和祛风除湿的功效，可用于治疗胃脘胀痛及关节肿痛。目前文献报道大八角中主要含有二萜和倍半萜类化合物[2-6]，为了进一步阐明该植物的化学成分，本实验对大八角根的95%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位进行了系统研究，从中分离并鉴定了10个化合物，包括7个倍半萜、2个酚类化合物及1个苯丙素类化合物。其中化合物1～4，8～10为首次从该植物中分离得到。

1材料

Bruker AV 500-Ⅲ核磁共振仪；Inova-500 核磁共振仪；Agilent 1000 Series LC-MSD-Trap-SL型ESI-MS质谱仪；Agilent 1100 Series液相色谱仪；制备型色谱柱YMC-Pack ODS-A（20 mm×250 mm，10 μm）；制备型HPLC（SPD-10A紫外检测器和RID-10A示差检测器）；薄层色谱硅胶GF254及柱色谱用硅胶（100～200，200～300目）均为青岛海洋化工厂生产；葡聚糖凝胶Sephadex LH-20 为Amersham Pharmacia Biotech AB 生产；D101型大孔吸附树脂购自天津南开化工厂；所用分析纯试剂均为北京化工厂生产；色谱纯试剂Dikama（美国Tedia公司），Fisher（美国Fisher公司）；显色剂为10%硫酸乙醇溶液。

大八角根于2009年10 月采于广西省，由广西中医学院韦松基教授鉴定为八角属植物大八角I. majus的根。植物标本保存于中国医学科学院药物研究所标本室（ID-21975）。

2提取和分离

干燥的大八角根12 kg，粉碎未过筛，用95%乙醇40 L浸泡12 h后，加热回流提取3次，每次3 h，减压回收溶剂的浸膏600 g。然后将浸膏溶解于甲醇中，加入1.5 kg硅藻土拌样，干

燥，装入索氏提取器，依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯和甲醇回流提取，减压回收溶剂后，得乙酸乙酯提取物 110 g。

乙酸乙酯提取物经大孔树脂柱色谱分离，分别以水，30%，50%，95%乙醇各10 L进行梯度洗脱，得到4个组分（A1 ～ A4）。组分A2 （28 g）经ODS反相硅胶柱色谱（甲醇-水，0 ～ 100%）分离得到6个流分（A2-1 ～ A2-6）。流分A2-3（4 g）经Sephadex LH-20柱色谱分离，以氯仿-甲醇（1∶1）洗脱，通过TLC检测（10%硫酸-乙醇显色）合并得到7个子流分（A2-3-1 ～ A2-3-7）。流分A2-3-3（800 mg）以甲醇-水-三氟乙酸（65∶35∶0.03，流速5 mL·min-1）为流动相，经制备型HPLC分离得到化合物1（10 mg，tR=20.3 min），5（20 mg，tR=85 min），6（80 mg， tR = 97 min）；流分A2-3-2（300 mg）以甲醇-水-三氟乙酸（40∶60∶0.03，流速5 mL·min-1）为流动相，经制备型HPLC分离得到化合物2（9 mg，

tR=19.5 min），3（12 mg，tR=45 min），4（9 mg，tR=52 min）；流分A2-3-4（400 mg）以甲醇-水-三氟乙酸（15∶75∶0.03，流速5 mL·min-1）为流动相，通过制备型HPLC分离得化合物7（16 mg，tR=25.1 min）；对于流分A2-3-5（900 mg），采用乙腈-水（25∶75，流速5 mL·min-1）为流动相，经制备型HPLC分离得化合物8（5 mg，tR=29.7 min），9（22 mg，tR=53.8 min），10（60 mg， tR=70.1 min）。

3结构鉴定

化合物1 无色针晶（甲醇）； ESI-MS m/z 321[M+Na]+；1H-NMR [（CD3）2CO，500 MHz] δ： 2.54（1H，m，H-1），1.55（1H，m，H-2β），1.90（1H，m，H-2α），1.69

（1H，m，H-3α），2.01（1H，dd，J=13.0 ，4.5 Hz，H-3β），1.64（1H，d，J=14.0 Hz，H-8α），1.52（1H，d，J=14.0 Hz，H-8β），4.51（1H，d，J=5.0 Hz，H-10a），1.22（3H，s，H-12），0.96（3H，s，H-13），4.98（1H，d，J=13.5 Hz，H-14a），3.91（1H，d，J=13.5 Hz，H-14b），0.96（3H，d，J=7.0 Hz，H-15），3.84（1H，s，6-OH）； 5.00（1H，s，7-OH）； 5.53（1H，d，J=4.5，10-OH）；13C-NMR [（CD3）2CO，125 MHz] δ： 46.3（C-1），33.0（C-2），27.9（C-3），95.6（C-4），51.8（C-5），80.3（C-6），109.0（C-7），38.3（C-8），55.1（C-9），75.9（C-10），172.4（C-11），18.7（C-12），17.8（C-13），69.2（C-14），13.5（C-15）。以上数据与文献[7]报道的化合物一致，故确定其结构为cycloparviflorolide。

化合物2 无色针晶（甲醇）； ESI-MS m/z 323[M+Na]+；1H-NMR（CD3OD，500 MHz）δ： 2.10（1H，m，H-1），1.38（1H，m，H-2β），1.89（1H，m ，H-2α），1.42（1H，m，H-3α），2.24（1H，m ，H-3β），1.38（1H，d ，J=13.5 Hz ，H-8β），2.18（1H，d ，J=13.5 Hz，H-8α），3.78（1H ，d ，J=5.5 Hz，H-10a），4.97（1H，d，J=5.5 Hz，H-11），1.12

（3H，s，H-12），1.00（1H，s，H-13），3.90（1H，d，J=12.5 Hz ，H-14a），3.38（1H，d，J=12.5 Hz ，H-14b），0.97（3H，d，J=7.0 Hz，H-15）； 13C-NMR（CD3OD，125 MHz）δ： 40.6（C-1），31.5（C-2），32.2（C-3），89.2（C-4），47.7（C-5），81.8（C-6），99.8（C-7），38.3（C-8），52.5（C-9），71.2（C-10），98.1（C-11），16.8（C-