不同食用菌种类的液体菌种发酵种配方

食用菌液体菌种的制作食用菌

食用菌液体菌种的制作食用菌
在无菌的条件下把菌种投放到培养基里。

安装通气管后用输氧机给培养基输入氧气。

把培养基放置在摇床机上进行振荡培养。

食用菌液体菌种具有生产周期短、菌龄整齐一致、接种方便、发酵快、适宜于工厂化生产等优点。

食用菌液体菌种的生产方式一般可分为电磁搅拌法、摇瓶机法、简易深层发酵（吹氧）法、发酵罐法。

据省农科院食用菌站工作人员介绍，摇瓶机法不仅接种简单，管理方便，而且生产量根据机器的设定而不同，投资2000~3000元即可。

配制液体培养基先把马铃薯煮到熟而不烂时提取上清液，然后配制3%葡萄糖、1%玉米粉、0.05%硫酸镁、0.1%磷酸二氢钾，最后将马铃薯上清液和上述溶液及水混合即可。

液体培养基适用于多种食用菌菌种的培养。

摇瓶振荡培养液体培养基配制好后，装入容量为500毫升的三角烧瓶中，每瓶装入100毫升，并加入1～15粒小玻璃珠，瓶口用棉塞、牛皮纸密封，在1.5千克/平方厘米压强下灭菌30分钟。

然后投入一块约2平方厘米的斜面菌种，于23℃～25℃下静置培养24小时。

待菌丝萌发时再放置在往复式摇床上振荡培养，振荡频率为每分钟80～100次，振幅为6～10厘米。

摇床室的温度控制在24℃～25℃，培养时间因菌类不同而异，一般是5天左右。

将振荡好的培养基倒入大容器里，经过扩容后，在无菌条件下安装通气管，用输氧机通入适量氧气后培养48小时。

培养结束的标准：培养液清澈透明，其中悬浮着大量小菌丝球，并伴有******菇类特有的香味。

培养好的液体菌种应放入培养箱中保存。

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食用菌液体菌种的制作PPT课件

四实验内容与方法
c 将培养液分装到250mL的三角烧瓶中（80-100ml/瓶），再放入5-10颗玻璃珠，加塞，包扎，灭菌（121℃，30min） 3、接种：待培养液充分冷却至室温后，无菌操作从母种斜面铲取约1cm² 的菌丝体块（勿带过多的培养基），使菌丝面朝上悬浮于液面上； 4、培养：先25℃静止培养2d, 待接种菌块萌发长出新菌丝后，再于摇床上振荡（150-180rpm）培养 3-4d，观察检测液体菌种的质量。
恒温培养箱；恒温摇床；超净工作台；灭菌锅；电炉（1台/组）； 250mL三角烧瓶（1个/人）；500mL或250mL烧杯、量筒（各1个/组）；中长玻璃棒（1根/组），六层纱布（1块/组），接种钩、接种铲（各1支/组）；小刀、棉塞、牛皮纸、橡皮筋；食用菌母种（1支/组），马铃薯，葡萄糖，磷酸二氢钾，硫酸ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ，蛋白胨，氯化钠
食用菌液体菌种的制作
1、学习液体菌种制作的原理与方法； 2、掌握液体菌种的质量检测； 3、了解液体菌种在食用菌生产中的优点。
一实验目的
液体菌种是指将食用菌的菌丝在一定的的培养条件下采用液体培养基使其生长增殖形成大量菌丝体或菌丝球，以作为食用菌栽培的原种或栽培种使用。液体菌种必须经显微镜检查后方可用于科研和生产。液体菌种使用的培养基根据不同菌类营养要求的特点而设计，其主要成分为碳源、氮源、矿质元素与维生素。碳源常用蔗糖和葡萄糖；氮源主要是蛋白胨、酵母粉等；无机盐常添加硫酸镁、磷酸二氢钾等；维生素多用维生素B1。
三实验器材
1、配方：马铃薯200g、葡萄糖20g、磷酸二氢钾0.5g、硫酸镁0.5g、蛋白胨2g、氯化钠0.1g，水1000mL，PH自然。 2、培养基制备： a 根据配方和用量称取适量去皮的马铃薯，切块（1cm³大小）后于烧杯中加入一定量的水，在电炉上加热煮沸30min（熟而不烂），用六层纱布过滤后将滤液补充至初始体积 b 按比例向滤液中加入配方中的其它各成份，搅拌（必要时可加热）使各成份充分溶解，（若溶液较浑浊可再过滤一次）再补充至初始体积，冷却（不烫手）

木耳液体菌种制作规程讲解

液体菌种制作规程工艺流程：斜面菌种→初级摇瓶种→二级摇瓶种→发酵罐深层发酵种→接种一、摇瓶种的制作1斜面菌种准备：马铃薯200克（去皮切块煮沸过滤取滤液），蔗糖20克，麸皮30克（煮汁过滤取滤液）二氢钾2克，硫酸镁1克，琼脂20克，VB1 10毫克，水1000毫升。

25度培养7天备用。

2、初级摇瓶制作①配方土豆200克葡萄糖20克酵母膏2克蛋白胨3克磷酸二氢钾2克硫酸镁1克V B110毫克水1000毫升。

（配方2：玉米粉4%，蔗糖3%，麸皮2%，酵母膏0.5%，2氢钾0.25%，硫酸镁0.1%，VB1 0.01%，豆油0.05%）。

②制作：土豆去皮切成薄块，煮沸后保持20分钟，四层纱布过滤后取滤液，补足1000毫升水，称取其他成份，与土豆液充分搅匀然后装入三角瓶。

初级摇瓶采用500ml三角瓶，装入200ml,放入玻璃球5粒（0.5cm 直径）用二层纱布包裹制作棉塞，塞紧棉塞后再用二层纱布外层加报纸做罩，扎紧瓶胫，防止摇动时棉塞活动。

③灭菌：把三角瓶放入立式高压锅，加足水紧好盖，开启放气阀，接通电源，有蒸汽冒出时关闭放气阀，待压力表达到0.05MPa时,断掉电源,打开放气阀,放冷空气至压力表回0，再关闭放气阀，接通电源，当压力表显示0.11 MPa，温度达到121℃后开时计时，保持45min。

断电使其自然降至0.02 MPa时放气归0，趁热微开盖，使剩余蒸汽烘干棉塞，然后出锅降温至25℃即可接种。

④接种：首先，封闭接种室，用开启紫外线灯30分钟，再用臭氧灭菌器灭菌60分钟或用烟雾剂每立方5克熏蒸30分钟，进行接种环境灭菌。

把灭菌后的三角瓶放入超净台（或接种箱）,把斜面母种、工具、酒精灯、75%的酒精棉球瓶同时放入，母种用灭过菌的报纸遮盖，打开紫外线灯和无菌风开关，保持15min后，关闭紫外线灯进行接种。

操作人员应着干净的隔离衣，带好卫生帽、口罩，手洗净，用75%酒精擦拭手、母种试管、工具，点燃酒精灯，灼烧工具及试管口20秒，在严格无菌操作程序下，把斜面菌种切割成0.5厘米小块（不带培养基），移入三角瓶中，使其浮在液面，一般接入5-6块，塞好棉塞，接完后重新封好棉塞罩，放到25℃恒温环境净置培养72小时。

食用菌液体菌种生产

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摇床培养的液体菌种数量较少，一般只适用于固体菌种的接种。也可作为发酵罐种源，或接种于三角瓶内，每瓶接种菌液10毫升，继续进行摇瓶培养。因菌丝球正处于旺盛生长状态，菌丝球分散性好，能缩短摇瓶培养时间，快者2天即可终止培养。
液体菌种在4℃左右温度下可保存1～2个月，在15～ 20℃室温下可保存7～10天，使用时对接种成功率、产量均无不良影响。
供气系统由空气压缩机、输送管道、空气过滤器等组成；
配制原料有糖、麸皮、磷酸二氢钾、硫酸镁、维生素、蛋白胨、土豆汁、酵母浸膏等。
微生物发酵工程来制取农药、医药、激素等；
技术的关键就是保证进入的空气无菌度高，因此必须选择孔径小、材料先进的过滤膜。
旋转式摇床偏心距为4毫米，振荡频率为150～220转／分。
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七、应用领域
1.液体菌种的科研、生产、制种和工厂化的大规模生产单位； 2.用于多种微生物的培养; 3.含食用菌活性成分的保健食品生产； 4.各种奶制品的活性因子生产; 5.生产菌丝体,提取生物活性成分来生产各种食品添加剂; 6.微生物发酵工程来制取农药、医药、激素等； 7.适用于科研单位、菌业公司、工业企业和从事食用菌栽培人员的菌类生产。
床栽：适用于平菇、凤尾菇、香菇栽培，每平方米用菌液300～1000毫升，常用量为500毫升，以穴播法最好，条播次之，撒播最差，
若出现培养液混浊，并伴有腐败及酸味，多为细菌性污染将穴播与撒播结合效果最好。
每瓶接入～2平方厘米的斜面菌种一块，让其悬浮于液体培养基表面且使菌丝朝上，在适温下静置培养48小时。
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二、液体菌种设备基本原理
任何一种食用菌自身的生长必须满足其对温度、湿度、需氧量、养分等的需要，同时必须避免杂菌感染。在深层发酵技术上称之为选择性发酵技术，如啤酒生产技术当属此例，而白酒生产则是生物菌群发酵技术。液体菌种发酵设备包括四大系统，温控系统由控制器、电热管等组成；供气系统由空气压缩机、输送管道、空气过滤器等组成；冷却系统由热交换器、进出水管道组成；搅拌系统由射流器、提升管等组成。

怎样生产和使用平菇液体菌种？

怎样生产和使用平菇液体菌种？我国最早于20世纪60年代（陈幸美等，1963)试用深层培养（液体培养）平菇、香菇、草菇等15种食用菌的菌丝体，并取得成功。

其后，上海师范大学杨庆尧教授等进一步将其完善、定型，并在平菇、香菇等食用菌栽培上推广利用。

下面介绍一种浅层培养平菇液体菌种的工艺。

(1)准备菌种平菇母种若干支。

（2)配制培养基配方一：蛋白陈2.0克，酵母膏2.0克，硫酸镁0．5克，磷酸二氢钾。

．5克，磷酸氢二钾1.0克，葡萄糖20克，加清水至1000毫升。

配方二：蛋白豚2.0克，硫酸镁0.5克，磷酸二氢钾0.5克，硫酸钙0.1克，维生素B，10微克，加清水至1000毫升。

配方三：玉米粉60克，维生素B：10微克。

先将玉米粉加人适量开水中搅成玉米糊，然后加清水至1000毫升，加人维生素Bi。

将配制好的任何一种培养基分装于250毫升三角瓶中，每瓶50~100毫升，加棉塞或硅橡胶塞后置于121℃、0.11兆帕的条件下灭菌20分钟，冷却后接种。

(3)接种培养按无菌操作要求，每支母种接种4~6瓶。

接种后置于恒温摇床上，在25℃、125转／分钟条件下培养4~6天，合格者即为一级种子液。

(4)质量检查摇培过程中或摇培结束后，均应进行质量检杏．若培养液变混浊、有酸臭味，表示已被细菌污染；若培养液有咐味，菌丝球异常，表示已被霉菌污染。

将污染的培养物重新灭菌后倒掉，以免污染环境。

将具有平菇香味，菌丝球颜色白、球形正常的液体菌种镜检后立即应用于下一步生产，或置4℃条件下短期贮存。

液体菌种使用方法液体菌种（一级种子液）的用途有如下三种。

①用来扩大生产二级种子液，用量为5％（体积比），培养基配方及生产方法同上。

②用来扩大生产原种或栽培种（普通棉籽壳培养基或木屑培养基），每瓶（袋）用种量为5~10毫升。

可用刻度吸管（事先灭菌备用）或5毫升进样器作为接种工具，转接液体菌种。

③用作栽培种，每袋用种量为15~30毫升。

没有恒温摇床的单位，每天用人工振荡4~6次，每次30秒左右，也可收到同样的效果。

食用菌菌种分类和固液菌种制作方法

食用菌菌种分类和固液菌种制作方法一、固体菌种母种→原种→栽培种1、母种母种：在试管或平皿琼脂培养基上生长的纯菌种称为母种，因为是用试管制作的，也称之为试管种，因为是最早一级的菌种，也称之为一级种。

试管的规格一般为22mm×220mm、20mm×200mm、18mm×180mm三种，如果采用液体菌种建议使用18mm×180mm，封口用棉花或硅胶塞。

平皿的规格为直径90mm，封口用Parafilm封口膜。

为了扩大生产，母种可以转接成更多的母种，叫做母种的扩繁。

在各级菌种中，母种的纯度最高，决不允许有杂菌污染。

衰老和退化的母种也不能投入生产，出现不纯或者退化的母种要进行提纯和复壮，提纯和复壮不能达到效果就应该淘汰。

母种的来源有两种，一种是从科研单位及菌种生产机构购买的，一种是组织或孢子分离后经出菇试验确认遗传稳定和高产的母种。

母种培养时间：7-10天，不同品种有差异。

食用菌菌种分类和固液菌种制作方法2、原种原种：原种是母种的菌丝体转接到棉籽壳、玉米芯、木屑或高粱粒、麦粒、枝条等固体培养基上培养而成的食用菌菌种，也叫做二级种。

原种制作的容器有：500ml罐头瓶、750ml罐头瓶、点滴瓶、专用菌种瓶等，罐头瓶封口用菌袋裁成见方封口，点滴瓶用棉花封口。

原种的用途是扩繁栽培种用的，即母种→原种→栽培种→栽培袋，也可以用原种直接转接到栽培袋中，即：母种→原种→栽培袋，这样不仅能够缩短菌种制作周期，也能更好的保证菌种纯度。

原种培养时间：20-30天，根据制作容器和品种不同而有差异。

3、栽培种栽培种：原种经过转接扩大繁殖后称之为栽培种，栽培种用于转接栽培袋，是生产中使用量最大的食用菌菌种，也叫做三级种。

三级种制作的容器有：500ml罐头瓶、750ml罐头瓶、点滴瓶、专用菌种瓶等，除了这些和原种一样的容器，栽培种使用最多的是15cm×30cm、17cm×33cm的折角袋，封口用棉花或者专用的无棉盖体。

木耳液体菌种制作规程

液体菌种制作规程工艺流程：斜面菌种→初级摇瓶种→二级摇瓶种→发酵罐深层发酵种→接种一、摇瓶种的制作1斜面菌种准备：马铃薯200克（去皮切块煮沸过滤取滤液），蔗糖20克，麸皮30克（煮汁过滤取滤液）二氢钾2克，硫酸镁1克，琼脂20克，VB1 10毫克，水1000毫升。

25度培养7天备用。

2、初级摇瓶制作①配方土豆200克葡萄糖20克酵母膏2克蛋白胨3克磷酸二氢钾2克硫酸镁1克V B110毫克水1000毫升。

（配方2：玉米粉4%，蔗糖3%，麸皮2%，酵母膏0.5%，2氢钾0.25%，硫酸镁0.1%，VB1 0.01%，豆油0.05%）。

②制作：土豆去皮切成薄块，煮沸后保持20分钟，四层纱布过滤后取滤液，补足1000毫升水，称取其他成份，与土豆液充分搅匀然后装入三角瓶。

初级摇瓶采用500ml三角瓶，装入200ml,放入玻璃球5粒（0.5cm 直径）用二层纱布包裹制作棉塞，塞紧棉塞后再用二层纱布外层加报纸做罩，扎紧瓶胫，防止摇动时棉塞活动。

③灭菌：把三角瓶放入立式高压锅，加足水紧好盖，开启放气阀，接通电源，有蒸汽冒出时关闭放气阀，待压力表达到0.05MPa时,断掉电源,打开放气阀,放冷空气至压力表回0，再关闭放气阀，接通电源，当压力表显示0.11 MPa，温度达到121℃后开时计时，保持45min。

断电使其自然降至0.02 MPa时放气归0，趁热微开盖，使剩余蒸汽烘干棉塞，然后出锅降温至25℃即可接种。

④接种：首先，封闭接种室，用开启紫外线灯30分钟，再用臭氧灭菌器灭菌60分钟或用烟雾剂每立方5克熏蒸30分钟，进行接种环境灭菌。

把灭菌后的三角瓶放入超净台（或接种箱）,把斜面母种、工具、酒精灯、75%的酒精棉球瓶同时放入，母种用灭过菌的报纸遮盖，打开紫外线灯和无菌风开关，保持15min后，关闭紫外线灯进行接种。

操作人员应着干净的隔离衣，带好卫生帽、口罩，手洗净，用75%酒精擦拭手、母种试管、工具，点燃酒精灯，灼烧工具及试管口20秒，在严格无菌操作程序下，把斜面菌种切割成0.5厘米小块（不带培养基），移入三角瓶中，使其浮在液面，一般接入5-6块，塞好棉塞，接完后重新封好棉塞罩，放到25℃恒温环境净置培养72小时。

不同类型平菇菌种制作方法

不同类型平菇菌种制作方法
棉籽壳菌种、麦粒菌种、枝条菌种、液体菌种在发菌、出菇以及接种成本、效率等方面都具有很大的差异，为提高种植户的经济效益，相关专家整理出了不同类型平菇菌种制作的方法，供广大种植朋友们参考。

1.麦粒种制备
配方：麦粒99%，石膏1%，麦粒先用温水加1%石灰浸泡至无白心，然后捞出加石膏拌匀装瓶(350g/瓶)，126°C灭菌120min，冷却后无菌接种(每瓶接种量为四分之一平板母种)，接种后25°C恒温培养至菌丝满瓶。

2.棉籽壳种制备
配方：棉籽壳85%，麸皮13%，石灰1%，石膏1%，原料预湿后拌料装袋(17cmX35cm聚丙烯袋，每袋装湿料0.9kg)，料含水量为62%，料装袋后于126°C灭菌120min，两头接种，每个平板菌种接2袋。

接种后25°C恒温培养至菌丝满袋。

3.枝条种制备
杨木枝条（规格12cmx0.4cmx0.7cm）扎捆后放入桶内，再加1%石灰水浸泡24h以上，捞出沥水撒麸皮，使每根枝条均匀粘上麸皮后装袋。

枝条装袋前后各在袋底部和顶部铺一层棉籽壳种培养基。

装袋后126°C灭菌120min，冷却后一头接种（袋接种量为四分之一平板母种）。

接种后于25°C恒温培养至菌丝满袋。

4.液体种制备
培养基配方：葡萄糖20g、蛋白胨2g、硫酸镁0.5g、氯化钙0.1g、磷酸二氢钾0.5g、B族维生素100ug、蒸馏水100ml。

准确称量原料后煮沸定容，分装三角瓶后每瓶加玻璃珠10粒，121℃灭菌30min，冷却后接种，每瓶接打孔母种块10块，接种后置于转速160r/min、25°C的恒温振荡培养箱中培养7天。

液体菌种制作过程

液体菌种的的制作过程一、母种纯化1、配方：1000ml为例（1）小麦（麦夫或豆芽）50克，土豆200克，葡萄糖20克，蛋白胨2克，琼脂18-20克，KH2 PO4 1.5克，MgSO4 0.75克，PH自然（6左右）（2）蔗糖24g，蛋白胨2g，酵母膏1g，2、制作小麦煮开花，土豆煮酥而不烂；琼脂剪碎，放入溶解，加入其他配料，总体积称到标准量，装入试管，进行常规灭菌（121℃，40分钟）。

3、接种将所用母种及新制的试管放入接种箱，灭菌20分钟后将手用75%的医用酒精擦洗（消毒），伸入接种箱等待5-10分钟再开始接种（接种前所有接种工具都要在酒精灯火焰上匀烧灭菌），在酒精灯火上方切取0.3cm²一小块菌丝，放入新培养基上，塞好试管口；放在该菌最适合的温度下培养。

4、培养在培养过程中，每天都要仔细逆光观察，发现有任何疑常现象都要淘汰不要。

二、摇瓶种子制作1、配方：1000ml为例a.可以用母种纯化配方（不加琼脂）b.土豆200克，黄豆8克（需打凝浆）或脱脂豆奶8克，葡萄糖30克，蛋白胨2克，KH2PO41.5克，MgSO4 0.75克。

c.玉米小麦各50克，蔗糖20克，葡萄糖10克，蛋白胨2克，酵母膏2克，KH2PO41克，MgSO4 0. 5克。

d．蔗糖24g，蛋白胨2g，酵母膏1g，KH2PO42g,MgSO4 1g, 豆浆50ml.2、制作将以上配方任选一种用类似母种的方法制成液体培养基，装入摇瓶，塞好瓶口，包上放潮纸，放入灭菌锅，封好锅口，打开放气阀，当有大量蒸气排出时关闭放气阀，温度升至121℃后，计时40分钟，让其自然冷却，压力归零时，打开灭菌锅盖，将一边掀起3-5cm，利用余热将棉塞烘干。

3、接种将摇瓶及纯化好的母种一起放入接种箱，灭菌后，去掉防潮纸，扭松棉塞，在酒精灯火焰上方，挑取0.3cm²的菌丝皮左手拿起棉塞,右手迅速将菌丝接入,然后立刻盖上棉塞,用同样的方法一个摇瓶接入15-20块,让其均匀地分布在液体表面。

不同食用菌种类的液体菌种发酵种配方

不同食用菌种类的液体菌种发酵种配方（1）平菇配方：马铃薯100克，红糖15克，葡萄糖10克，麦麸30克，蛋白胨1.5克，磷酸二氢钾1.5克，硫酸镁0.75克，维生素B11片，聚氧丙稀甘油0.3毫升，pH值自然；（2）金针菇配方：马铃薯100克，红糖15克，葡萄糖10克，麦麸40克，蛋白胨2.0克，磷酸二氢钾2.0克，硫酸镁1.0克，维生素B11片，聚氧丙稀甘油0.3毫升，pH值自然；（3）白灵菇配方：马铃薯100克，红糖15克，葡萄糖10克，麦麸40克，蛋白胨2.0克，磷酸二氢钾2.0克，硫酸镁1.0克，维生素B11片，聚氧丙稀甘油0.3毫升，pH值自然；（4）香菇配方：马铃薯100克，红糖15克，葡萄糖10克，麦麸40克，蛋白胨2.0克，磷酸二氢钾2.0克，硫酸镁1.0克，维生素B11片，聚氧丙稀甘油0.3毫升，pH值自然；（5）杏鲍菇配方：马铃薯100克，红糖15克，葡萄糖10克，麦麸40克，蛋白胨2.0克，磷酸二氢钾2.0克，硫酸镁1.0克，维生素B11片，聚氧丙稀甘油0.3毫升，pH值自然；（6）榆黄蘑配方：马铃薯100克，红糖12克，葡萄糖10克，麦麸40克，蛋白胨2.0克，磷酸二氢钾1.5克，硫酸镁0.75克，维生素B11片，聚氧丙稀甘油0.3毫升，pH值自然；（7）茶新菇配方：马铃薯100克，红糖15克，葡萄糖10克，麦麸50克，蛋白胨2.5克，磷酸二氢钾2.0克，硫酸镁1.0克，维生素B11片，聚氧丙稀甘油0.3毫升，pH值自然；（8）鲍鱼菇配方：马铃薯100克，红糖15克，葡萄糖10克，麦麸40克，蛋白胨2.0克，磷酸二氢钾2.0克，硫酸镁1.0克，维生素B11片，聚氧丙稀甘油0.3毫升，pH值自然；（9）鸡腿菇配方：马铃薯100克，红糖12克，葡萄糖12克，麦麸40克，蛋白胨2.0克，磷酸二氢钾2.0克，硫酸镁1.0克，维生素B11片，聚氧丙稀甘油0.3毫升，pH值自然；（10）灵芝配方：马铃薯100克，红糖12克，葡萄糖12克，麦麸40克，蛋白胨2.0克，磷酸二氢钾2.0克，硫酸镁1.0，维生素B11片，聚氧丙稀甘油0.3毫升，pH值自然；（11）黑木耳配方：马铃薯100克，红糖15克，葡萄糖10克，麦麸40克，蛋白胨2.0克，磷酸二氢钾2.0克，硫酸镁1.0克，维生素B11片，聚氧丙稀甘油0.3毫升，pH值自然；（12）猴头菇配方：马铃薯100克，红糖15克，葡萄糖10克，麦麸45克，蛋白胨2.5克，磷酸二氢钾2.0克，硫酸镁1.0克，维生素B11片，聚氧丙稀甘油0.3毫升，pH值自然；（13）滑菇配方：马铃薯100克，红糖15克，葡萄糖12克，麦麸50克，蛋白胨2.5克，磷酸二氢钾2.0克，硫酸镁1.0克，维生素B11片，聚氧丙稀甘油0.3毫升，pH值自然；（14）双孢菇配方：马铃薯100克，红糖15克，葡萄糖10克，麦麸50克，蛋白胨2.0克，酵母膏1.0克，磷酸二氢钾2.0克，硫酸镁1.0克，维生素B11片，聚氧丙稀甘油0.3毫升，pH值自然；（15）灰树花配方：马铃薯100克，红糖15克，葡萄糖15克，麦麸45克，蛋白胨3.0克，磷酸二氢钾2.0克，硫酸镁1.0克，维生素B11片，聚氧丙稀甘油0.3毫升，pH值自然；（16）姬松茸配方：马铃薯100克，红糖13克，葡萄糖13克，麦麸50克，蛋白胨1.0克，酵母膏1.5克，磷酸二氢钾2.0克，硫酸镁1.0克，维生素B11片，聚氧丙稀甘油0.3毫升，pH值自然。

生产食用菌液体菌种所需的专用母种的制作方法

生产食用菌液体菌种所需的专用母种的制作方法专利名称：生产食用菌液体菌种所需的专用母种的制作方法技术领域：本发明涉及生产食用菌液体菌种所需的专用母种及其生产方法。

背景技术：目前，食用菌的生产已由传统的固体菌种向液体菌种方向转变，而已知的液体菌种生产均采用“一级斜面母种→一级摇瓶种→二级摇瓶种→培养罐培养(液体菌种)”的方法生产，但用这样的方法生产液体菌种周期长、成本高、投资大、易污染、成功率低；而采用“液体专用母种”→培养罐培养(液体菌种)”的方法进行生产，同已知方法比周期短、成本低、技术简单、成功率高。

发明内容本发明的目的就是为了解决现有液体菌种生产存在的问题而提供生产食用菌液体菌种所需的专用母种。

本发明的目的可以通过以下技术方案来实现一、专用母种1、一级摇瓶种培养基按重量百分比①木腐菌培养基土豆20、红糖1.0-1.5、葡萄糖1.0-1.5、麸皮3、蛋白胨0.15-0.3、磷酸二氢钾0.2、硫酸镁0.1、维生素B110毫克/升、余量为水，PH值6.5-7.0②草腐菌培养基土豆20、红糖1.0-1.5、麸皮3.0-5.0、蛋白胨0.1-0.25、酵母膏0.1-0.2、磷酸二氢钾0.2、硫酸镁0.1、维生素B110毫克/升，余量为水，PH 值7.0-7.52、专用母种配方按重量百分比①木腐菌配方硬杂木屑67-77、麸皮20-30、红糖2、石膏1，PH 值自然②草腐菌配方硬杂木屑42-52、谷粒30-40、麸皮15、红糖2、石膏1，PH值6.5-7.5。

二、生产专用母种的方法1、生产一级摇瓶种①分装把配制好的培养基按每瓶200-400毫升的装量装入1000毫升的三角瓶中，盖上棉塞，绑上牛皮纸，②灭菌在121-126℃的条件下灭菌30分钟，③接种待培养基温度降至30℃以下时，即可接入经筛选、提纯、活化处理的一级斜面母种，每瓶接入2-3块0.5-1.0cm2的菌块，④培养将接完种的菌瓶在130-200转/分的回旋式摇床上振荡培养，在23℃-28℃条件下5-10天后制得一级摇瓶种，⑤菌种的筛选、提纯、活化将普通的一级斜面母种接在摇瓶中振荡培养7-10天，挑取悬浮在菌液上层、活力强壮、大小在2-3毫米左右的菌球接在斜面培养基上，待其长到试管的1/3-2/3即可使用，2、生产专用母种①原料处理将颗粒状木屑和麸皮过20目和40目筛，选用两种筛子之间的颗粒为原料，②拌料把原料按配比加水拌匀，含水量在60-63％，③装瓶把上述培养料装入500毫升的三角瓶中，压紧、压平，每瓶装料约450毫升或干料150克，盖上棉塞，绑上牛皮纸，在121-126℃的条件下灭菌90分钟，待温度降至30℃以下时备用，④接种用灭好菌的吸管把培养好的一级摇瓶种接入到盛装在三角瓶内灭好菌的固体培养基中，⑤培养在23-25℃的条件下避光培养，菌丝长满后即可。

常见食用菌液体菌种培养基配方大全

常见食用菌液体菌种培养基配方大全1.营养物质基本配方- 水：1000 ml- 蛋白胨（Peptone）：10 g- 水解酵母提取物（Yeast Extract）：5 g-NaCl：5g将以上成分溶解在水中，调整pH至7.0。

这个基本配方适用于许多不同的微生物。

2. 大肠杆菌（E. coli）菌种培养基- 水：900 ml-蛋白胨：10g-水解酵母提取物：5g-NaCl：5g-葡萄糖：1g-K2HPO4：2g将以上成分溶解在水中，调整pH至7.0，然后添加100 ml的5倍浓度的M9盐基液（以下配方）：-Na2HPO4：15g-KH2PO4：6g-NaCl：0.5g-NH4Cl：1g3. 真菌菌种培养基（Sabouraud培养基）-磷酸钠二氢物（NaH2PO4）：3g-柠檬酸三钠（Na3C6H5O7）：5g- 细脂粉（Tweens 20）：1 ml-葡萄糖：40g-酵母提取物：5g- 洗涤剂（Polysorbate 80）：1 ml- 蓖麻油（Castor oil）：5 ml- 蒸馏水：1000 ml将以上成分溶解在蒸馏水中，调整pH至5.6-6.2、这个培养基适用于真菌的培养。

4. 下面是适用于酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）的培养基配方：- 水：900 ml-柠檬酸二钠（Na2C6H6O7）：20g-磷酸氢二钾（KH2PO4）：7.5g-葡萄糖：20g-氯化镁（MgCl2）：4.5g-氯化钾（KCl）：0.5g将以上成分溶解在水中，调整pH至5.0。

5. 适用于链霉菌属（Streptomyces）菌种培养基配方：- 水：900 ml-蛋白胨：10g- 混合谷氨酸（Glycine-Glutamic acid）：10 g-氯化钠（NaCl）：4g-磷酸一钠二水（Na2HPO4·2H2O）：12.5g-磷酸二氢钾（KH2PO4）：2.5g将以上成分溶解在水中，调整pH至7.0。

食用菌液体菌种发酵培养基制作方法

食用菌液体菌种发酵培养基制作方法一、概述食用菌是一类富含营养且具有较高经济价值的真菌。

通过液体菌种发酵培养基，可以有效地培养和繁殖食用菌菌种，为食用菌的生产提供良好的基础。

二、制作原料准备1. 鲜活食用菌菌种：可选择各种常见的食用菌，如蘑菇、香菇等。

2. 培养基原料：包括淀粉、葡萄糖、酵母粉、氨基酸等。

3. 辅助原料：如蒸馏水、矿物质溶液等。

三、制作步骤1. 菌种处理：将鲜活食用菌菌种进行处理，去除不完整或有病变的部分，并将其洗净备用。

2. 培养基准备：按照一定比例将淀粉、葡萄糖、酵母粉、氨基酸等原料混合均匀。

然后加入适量的蒸馏水，搅拌至完全溶解，得到培养基液体。

3. 培养基消毒：将制好的液体培养基倒入培养瓶中，用高压蒸汽进行消毒，确保无菌。

4. 菌种接种：将处理好的食用菌菌种均匀地接种到培养瓶中的培养基上。

5. 培养条件调控：将接种好的培养瓶放入恒温培养箱中，调控温度、湿度和光照等条件，创造适宜的生长环境。

6. 培养过程管理：定期观察培养瓶内的菌丝生长情况，注意消毒和通风，防止细菌交叉感染。

7. 菌种提取：待菌丝生长到一定程度后，可将其提取出来，作为食用菌的菌种，用于后续培养和生产。

四、注意事项1. 在制作过程中要严格控制消毒条件，确保培养基和培养器具的无菌。

2. 培养箱的温度、湿度和光照等条件要根据不同食用菌的要求进行调控。

3. 培养过程中要定期观察并记录菌丝的生长情况，及时处理异常情况。

4. 制作过程中要注意卫生和安全，避免食用菌菌种污染其他物品或环境。

5. 培养完毕后，要妥善保存食用菌菌种，以备后续使用。

通过上述的制作步骤和注意事项，可以制作出适用于食用菌液体菌种发酵的培养基。

这种培养基能够为食用菌的生产提供良好的基础，促进食用菌菌种的繁殖和生长。

制作过程中需要注意无菌操作和合理的培养条件调控，以保证培养基的质量和菌种的活力。

同时，制作过程中也需要注意卫生和安全，避免污染和交叉感染的发生。

液体菌种生产流程

EM等菌种培养技术流程
一、液体菌种培养
1、一、二级种培养基配方：白糖 1.5L
糖蜜0.5L
磷酸二氢钾50g
轻质碳酸钙50g
味精下脚料1kg
甲壳素100g
水55L
2、菌种分别是：EM菌、枯草杆菌、硝化菌等。

3、制作方法：将55L水煮沸，加入培养基各组分，再次煮沸后，分装至25L 的塑料桶（每桶约19L），待冷却后分别接种1L，分别扩繁培养，一般3-7天即可用。

注：1）接种比例1：20。

2）枯草杆菌（是耐热菌）需趁热接入菌种培养。

3）用发酵罐培养菌种效果更佳。

二、菌种扩繁成1吨
1、培养基配方：白糖20kg
碳酸钙2kg
过磷酸钙2kg
味精下脚料10kg
糖蜜4-5L
甲壳素1L
在98L大不锈钢桶加入55L水煮沸，加入培养基物料组分，煮沸后趁热倒入2吨大桶中；连续煮2锅；放置30min，以达杀菌目的。

另外准备若干个大桶，装满水，用臭氧处理器消毒，静止放置1h后待用；向2吨大桶中倒入臭氧处理的无菌水，至半桶时，接种（8种菌之一,其中枯草杆菌最好用热水），接种比例1：80（约1.5%）。

乳酸菌和光合菌可以不用打气，其它6种菌接种2天后要补充新鲜空气，培养5天后可用。

食用菌液体菌种的制作步骤

食用菌液体菌种的制作步骤
一、液体培养基配方：葡萄糖20克蛋白胨10克硫酸镁
0.5克硫酸二氢钾1克水1000ml
二、液体培养基的制作步骤：
1、称量、溶解
按配方称量药品，将药品置于烧杯中加水，玻璃棒搅匀。

2、分装
分装三角瓶时避免培养液黏住瓶壁口，用漏斗进行分装，三角瓶装料系数60％。

3、加棉塞
棉塞大小，松紧度要适中，一般塞入3-4厘米。

4、装锅灭菌
塞好棉塞的三角瓶用双层报纸包扎好，装入灭菌锅，盖上报纸，排气后，待温度升至121℃开始计时，温度控制在121—123℃，维持50min。

5、烘棉塞
当压力降至0.05MPa时带压进入无菌室，当压力即将降至零时开始放气，打开锅盖拿出报纸，将锅盖嵌一小缝，以此来烘干棉塞，维持40—50min。

6、冷却
取出三角瓶放在超净工作台或接种箱中，冷却后进行接种。

液体菌种生产与固体培养不同，是以液体做培养基，通过多级发酵培养得到菌液，发酵菌液中含有大量的菌丝体，
可直接做液体菌种。

目前，液体菌种发酵生产的工艺流程有：一是摇瓶培养工艺，即斜面母种→一级摇瓶种子→二级摇瓶种子→三级摇瓶种子；二是深层发酵罐培养工艺，即斜面母种→种子罐→发酵罐→液体菌种。

少量可用摇瓶震荡培养，大量的用发酵罐通气培养。

液体菌种发酵液配方

液体菌种发酵液配方
一般来说，液体菌种发酵液的配方会根据具体菌种的需求和要达到的发酵目标来确定，下面是一种常见的液体菌种发酵液的配方：
1. 碳源：常用的碳源包括葡萄糖、麦芽糊精、玉米糖浆等。

根据菌种对碳源的需求可调整用量和类型。

2. 氮源：常用的氮源包括酵母浸膏、氨基酸、鱼粉等。

氮源的供应对促进菌种生长和产生产物非常重要。

3. 矿物盐：常用的矿物盐包括无机盐、微量元素等。

矿物盐的添加可以提供菌种所需的微量营养物质。

4. pH调节剂：一般使用醋酸钠、磷酸二钠等物质来调节菌种发酵液的pH值。

5. 生长因子：一些菌种在发酵过程中需要特定的生长因子，如维生素、辅酶等。

需要注意的是，不同菌株对发酵液的要求不同，因此具体的配方需要根据菌种的特性进行调整。

此外，在配方中可以根据实际需要适量添加抗泡剂、乳化剂等辅助剂。

中药发酵菌液配方

中药发酵菌液配方
本配方提供了一种中药发酵菌液的制备方法，该方法能够充分利用中药的有效成分，提高菌液的营养价值和药用效果。

1. 菌种类型
本配方所使用的菌种为双歧杆菌、乳酸菌和酵母菌的混合菌种。

这些菌种具有较高的发酵能力和营养价值，同时能够产生多种消化酶和生物活性物质，有利于改善人体肠道微生态平衡。

2. 发酵条件
发酵温度：37℃±2℃
发酵湿度：60％±5％
发酵时间：48-72小时
发酵容器：消毒灭菌的发酵罐或瓶子
接种量：10-20％
培养基：中药提取液或常用营养培养基
3. 中药成分
本配方所使用的中药为茯苓、甘草、白术、黄芪等，这些中药具有健脾开胃、补气养血、提高免疫力的功效。

将中药煎煮后制成提取液，作为发酵的培养基。

4. 补加营养物质
为了提高菌液的营养价值和药用效果，本配方在发酵过程中加入了适量的蛋白质、脂肪、糖类、维生素和矿物质等营养物质。

这些物质可增强菌种的生长繁殖能力和发酵效果。

5. 添加剂
为了改善菌液的口感和稳定性，本配方加入了适量的甜味剂、防腐剂、增稠剂等添加剂。

这些添加剂的种类和用量均符合国家相关标准。

制备方法：
1. 将中药煎煮后制成提取液，加入适量的营养物质和添加剂；
2. 将双歧杆菌、乳酸菌和酵母菌按比例混合接种到中药提取液中；
3. 在恒温恒湿条件下进行发酵；
4. 发酵完成后过滤菌体，得到中药发酵菌液。

木耳液体菌种制作规程

液体菌种制作规程工艺流程：斜面菌种→初级摇瓶种→二级摇瓶种→发酵罐深层发酵种→接种一、摇瓶种的制作1斜面菌种准备：马铃薯200克（去皮切块煮沸过滤取滤液），蔗糖20克，麸皮30克（煮汁过滤取滤液）二氢钾2克，硫酸镁1克，琼脂20克，VB1 10毫克，水1000毫升。

25度培养7天备用。

2、初级摇瓶制作①配方土豆200克葡萄糖20克酵母膏2克蛋白胨3克磷酸二氢钾2克硫酸镁1克V B110毫克水1000毫升。

（配方2：玉米粉4%，蔗糖3%，麸皮2%，酵母膏0.5%，2氢钾0.25%，硫酸镁0.1%，VB1 0.01%，豆油0.05%）。

②制作：土豆去皮切成薄块，煮沸后保持20分钟，四层纱布过滤后取滤液，补足1000毫升水，称取其他成份，与土豆液充分搅匀然后装入三角瓶。

初级摇瓶采用500ml三角瓶，装入200ml,放入玻璃球5粒（0.5cm 直径）用二层纱布包裹制作棉塞，塞紧棉塞后再用二层纱布外层加报纸做罩，扎紧瓶胫，防止摇动时棉塞活动。

③灭菌：把三角瓶放入立式高压锅，加足水紧好盖，开启放气阀，接通电源，有蒸汽冒出时关闭放气阀，待压力表达到0.05MPa时,断掉电源,打开放气阀,放冷空气至压力表回0，再关闭放气阀，接通电源，当压力表显示0.11 MPa，温度达到121℃后开时计时，保持45min。

断电使其自然降至0.02 MPa时放气归0，趁热微开盖，使剩余蒸汽烘干棉塞，然后出锅降温至25℃即可接种。

④接种：首先，封闭接种室，用开启紫外线灯30分钟，再用臭氧灭菌器灭菌60分钟或用烟雾剂每立方5克熏蒸30分钟，进行接种环境灭菌。

把灭菌后的三角瓶放入超净台（或接种箱）,把斜面母种、工具、酒精灯、75%的酒精棉球瓶同时放入，母种用灭过菌的报纸遮盖，打开紫外线灯和无菌风开关，保持15min后，关闭紫外线灯进行接种。

操作人员应着干净的隔离衣，带好卫生帽、口罩，手洗净，用75%酒精擦拭手、母种试管、工具，点燃酒精灯，灼烧工具及试管口20秒，在严格无菌操作程序下，把斜面菌种切割成0.5厘米小块（不带培养基），移入三角瓶中，使其浮在液面，一般接入5-6块，塞好棉塞，接完后重新封好棉塞罩，放到25℃恒温环境净置培养72小时。