扫描电镜制样步骤(样品小于1cm
合集下载
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
扫描电镜制样步骤
生物样品(如动植物、细胞)需进行1-7步骤的操作(耗时长)
干燥的非导电样品(如花粉、制剂粉末、塑料等)无需进行1-5步骤操作而粘于样品台喷金再于电镜观察即可
导电样品(如金属样品)直接粘于样品台电镜观察,无需1-7步
注:取材时所需2.5%戊二醛溶液、0.1M PH7.0磷酸盐缓冲液需自行配置,配方详见《电镜固定液、缓冲液、染液配方》
送样前请先与我们联系以安排时间在我处制样。
生物样品制样耗时,请安排好个人时间
生物样品(小于1cm3)于2.5%戊二醛溶液4℃固定过夜,再按下列步骤操作:
1、漂洗:弃去戊二醛固定液,用0.1M PH7.0磷酸盐缓冲液漂洗3次,每次15min
2、1%饿酸固定1-2h(通风厨操作)
3、漂洗:弃去饿酸固定液,用0.1M PH7.0磷酸盐缓冲液漂洗3次,每次15min
4、梯度洗脱:50%、70%、80%、90%、95%系列浓度的乙醇溶液梯度脱水各15min,
再用100%的乙醇脱水2次每次20min
注:样品较大延长脱水时间
5、乙醇:醋酸异戊酯=1:1(V:V)处理30min,再用纯醋酸异戊酯处理1-2h
注:通风厨操作
相容性较差,需用醋酸异戊酯置换
乙醇、丙酮等脱水剂与CO
2
6、自然干燥/临界点干燥(英国EMTIECH K850)
7、日立E1010型离子溅射仪喷金30s,利用导电碳胶将样品固定于样品台,调节样品台高度,
8、日立S-3000N扫描电镜观察。