玉米纹枯病菌生物学特性的研究

玉米纹枯病菌生物学特性的研究

摘要：本文主要研究了温度、湿度、pH值、光照与营养对玉米纹枯病菌生长的影响。该菌菌丝生长的温度范围为15℃～35℃，最适温度范围为25℃～30℃；菌核形成的温度范围为15℃～30℃，最适温度范围为25℃～30℃。菌丝与菌核在相对湿度在90%以上时生长最为适宜。在pH值为2-11的范围内病菌均能生长，但以PH值为5-6最适宜。光暗交替将加快菌丝生长速度，提前形成菌核，增大菌核的粒数和菌核的重量。在以碳源（淀粉）和氮源（天门冬酰胺）不同浓度比的范围中，碳源浓度为40.0-42.5g/l ,氮源浓度为2.59—2.78g/l 为该试验最佳浓度组合范围。以淀粉为C源时，玉米纹枯病菌菌丝生长和菌核形成均达到最佳状态。以天门冬酰氨为氮源时，玉米纹枯病菌生长较快（平均生长速度为0.262cm/h），产生菌核数目最多，达688粒/皿，干量也较大，达0.254g/皿，为玉米纹枯病菌生长的最佳氮源。

Abstract:This paper mainly studies the effects of temperature, humidity, pH, light and nutrition on the growth of Maize Rhizoctonia solani. Mycelial growth of bacteria for the temperature range 15 ℃~ 35 ℃, the optimum temperature range of 25 ℃~ 30 ℃; sclerotium formation temperature range of 15 ℃~ 30 ℃, the optimum temperature range of 25 ℃~ 30 ℃. Mycelium and sclerotia in the relative humidity above 90 percent is the most appropriate level of growth. Bacteria can grow when PH value in the range of 2-11, but the PH value of 5-6 is the most appropriate. Alternating of light and darkness will accelerate the mycelial growth rate,bring the formation of sclerotia forward, and increase number and the weight of sclerotia. In different ratio range of C source (starch) and N source (asparagine) concentrations. The C source concentration 40.0-42.5g / l and N source concentration 2.59-2.78g / l is the best concentration combination range of the test.Taking starch as C source, Maize Rhizoctonia solani and sclerotium formation grow best .Taking Aroylamino aspartate as N source, Maize Rhizoctonia solani grows more quikly (average growth rate of 0.262cm / h), the largest number of sclerotia produced, amounting to 688 / petri dish, the larger dry weight—up to 0.254g /petri dish . Asparagine is the best N source for the growth of Maize Rhizoctonia solani.

关键词：纹枯病玉米菌丝菌核

玉米是我国主要粮食作物之一，纹枯病主要致病菌为立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)的AG1-IA融合亚群，病菌以菌丝和菌核在土壤中越冬。当温度等条件适宜时，土壤中的菌丝生长、菌核萌发侵染玉米引起发病[1]，是玉米上的一种真菌性病害，可通过表皮、气孔和自然孔口侵入。主要发生在叶鞘和叶片上，在近地面处发病，向上部叶鞘、叶片和四周发展。在长江流域中下游地区，六月上旬，玉米田土表和浅土表的菌核开始萌发菌丝，浸染玉米植株基部叶鞘，逐步向上蔓延扩散；七月初感病玉米株表面开始形成菌核；玉米收获时，菌核落入表土，成为下一年浸染的主要来源。随着栽培水平的提高，种子更替，尤其随着紧凑型玉米的引进推广与高肥技术的应用，已上升为主要病害之一[2-5]。我们从安徽各地采集和征集玉米纹枯病菌的病叶标样和病原菌，采用组织分离和单孢分离的方法获得纯菌株，，并对其培养性状和生理特性进行了较详细的研究，以期为玉米纹枯病的防治研究提供参考和依据，从而提高玉米的产量。

1 材料与方法

1.1 供试菌种

从安徽各地玉米田内采集典型的病害样本和外表无病害症状的玉米，在安徽科技学院植物保护实验室按照常规方法进行组织分离培养，得到的玉米病株上分离出来的玉米纹枯病，经分离、纯化获得，冷藏保存，同时将病菌接种在PDA培养基上，置于28℃恒温箱内根据试验需要培养相应的天数，然后活化备用。

1.2 温度对纹枯病菌丝生长速度和菌核干重的影响

在PDA平板上培养了2d的玉米纹枯病菌菌落边缘打孔，制成直径为0.7cm 的菌龄一致的菌块，然后分别挑取菌块置于PDA平板培养基的中央（每皿20ml 培养基），分别置于5、15、20、25、30、35和40℃的恒温箱中培养，每处理5次重复。每8h用直尺十字交叉法量取菌落直径，直到菌丝长满平板，取菌落直径平均值，计算生长速率，然后每天观察菌核的变化情况。第十天统计菌核数量，再将菌核置于50～60℃的烘箱内烘1～2h，分别称其干重[6]。

1.3湿度对纹枯病菌丝生长和菌核干重的影响

将灭菌过的PDA培养基熔化、倒平板、打孔、制成菌饼，然后用接种针挑取一块置于平板培养基中央，最后放入温度为28ºC、湿度为50%、65%、70%、75%、80%、85%、90%等7个阶段的人工智能培养箱内培养。从放入培养箱培养时间算起每8个小时测量菌落直径,观察菌丝的生长情况，至菌丝长满后，观察菌核形成状况[5]。

1.5 PH值对纹枯病菌丝、菌核的影响

用HCl和NaOH将灭菌后的PDA培养基pH值调到1～12间共12种，每个血内倒入20mL培养基，摇匀制板，凝固后在菌龄为3d的PDA平板菌落外缘半径相同的圆周上打取直径为7mm的菌饼，移植至不同酸碱度的PDA平板中央，最后倒置放入温度为28℃的人工智能培养箱内培养。进入箱后每隔6h，以菌饼为圆心十字交叉法测量菌落直径，直至长满皿底为止，计算菌丝生长速率，同时观察菌核的形成情况，待15d后菌核无变化时用挑针挑下菌核记数，并在50℃下烘2h，自然冷却后称重。

1.6 光照对菌丝生长速度和菌核形成、干重的影响

试验前48小时将菌种移至PDA平板上，培养活化。菌种分别来自于自然光

（A

1）、12小时光12小时暗（A

2

）、全日光（B1）、和全日暗（B2）、8小时暗8小

时光8小时暗（C1）、8小时光8小时暗8小时光（C2）、16小时光8小时暗（D1）、16小时暗8小时光（D2）八个处理，温度28℃±0.5，光照强度为1500LX的处理结果，每个处理重复五次。然后在菌种的同心圆上用直径0.7cm的打孔器打出若干菌饼，用接种针把菌饼分别接种、培养。培养后每6个小时选菌丝疏密，观看菌核形成的快慢、大小、数量及颜色的变化并记录。10天后数菌核粒数，烘干冷却后称其干重[5]。

1.7 不同C源对纹枯病菌丝生长和菌核干重的影响

用基础培养基PDA是以葡萄糖为碳源的，分别以相通含碳量的果糖、蔗糖、淀粉、鼠李糖、麦芽糖、乳糖和木糖替换葡萄糖，配置成含有不同碳源的培养基。按上述碳源溶于基础培养基中培养、倒平板和接种，之后测量菌丝长度。直至菌丝长满后观察菌核生长的颜色、大小等状况，15天后记录菌核个数，并烘干后称重[7]。

1.8 不同N源对纹枯病菌丝生长速率和菌核干重的影响

用基础培养基PDA是以脯氨酸、组氨酸、半胱酰氨、天门冬酰氨组成的有机氮源和以硝酸铵、硫酸铵、尿素、亚硝酸钠组成的无机氮源。形成不同氮源的培养基。按上述氮源制成不同氮源的培养基，经过灭菌、倒平板、恒温培养后测