不育症及自然流产与男性精子形态相关性的分析

男性精子构成胚胎基因组成分的一半，正常的精子形态和结构是保证精子完成受精的基础。

常规精液分析是评价男性生育能力的主要实验室手段，但不能满足临床深入诊断的需求。

近年来，精子形态学分析是国际上越来越重视的检测方法。

本文对不育症及自然流产夫妇中男性进行精液常规检测及形态学染色分析，以探讨男性精子形态与不育症及自然流产之间的相关性。

1资料与方法
1.1一般资料：2010年1~12月来本院生殖科就诊的不孕不育及自然流产夫妇中的男方以及优生检查、婚检的男性患者378例，年龄20~47岁，平均30.5岁。

将优生检查、婚检的男性以及确诊不育原因在于女方的男性作为对照组，其余为研究组，研究组又分为不育症组和自然流产组。

1.2精液标本采集：检查前禁欲3~7天，在取精室通过手淫方
不育症及自然流产与男性精子形态相关性的分析
谭艳，易艳萍，毛武塬，王敏
（株洲市妇幼保健院生殖科，湖南株洲412000）
【摘要】目的：研究男性精子形态与不育症及自然流产的相关性。

方法：将2010年来本院优生体检、婚检的男性以及在生殖科门诊检查中确诊不育原因在于女方的男性作为对照组，其余归为研究组，共378例。

研究组又分为不育症组和自然流产组。

严格按照WHO技术规范，对其精液进行常规检测，同时进行形态学染色分析。

结果：不育症组及自然流产组精子正常形态与对照组相比较差异有统计学意义（P＜0.05），不育症组精子的头、颈、尾部畸形率均高于对照组，少精症、死精症以及少精合并弱精症常与畸精症同时存在，且精子畸形指数与不育症和自然流产的关系密切，是男性不育诊断的重要参数。

结论：精子形态异常是影响男性生育力的重要因素，与少、弱、死精等各种不育病因存在相关性，因此精子形态学分析应该与精液常规检测一起作为不育症及自然流产的首要检查项目，并分析精子畸形指数，提高临床确诊率。

【关键词】不育症；自然流产；精子形态学；精子畸形指数
文章编号：1009-5519（2011）13-1989-03中图分类号：R6文献标识码：A
法取精于干燥无菌的广口杯内，放36℃水浴箱液化后进行分析检测。

1.3精液常规及形态学分析：严格按照WHO标准[1]，采用清华同方精子动态图像检测分析系统检测精液常规，采用深圳华康生物医学工程有限公司的精子染色检测试剂盒染色后进行精子形态学分析。

1.3.1精液完全液化后，用移液器吸取10μL精液于MAKLER 精子计数板上，进行CASA常规检测，每份标本随即选取视野观察，计数至少200个精子，获得精子密度、活动力、活率以及动态参数。

1.3.2取完全液化的精液50μL加适量生理盐水离心洗涤，取20μL精子悬液涂片，干燥后用WHO推荐的Diff-Quik法染色，然后按照WHO的严格标准[1]计数200个以上的精子，得出正常形态精子百分率以及头、颈、尾部缺陷的精子百分率，并计算出畸形精子指数以及精子畸形指数。

1.4统计学分析：采用SPSS13.0统计分析包进行数据处理，资料以（x±s）表示，组间比较采用t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2结果
2.1不育症组、自然流产组和对照组之间进行精子形态学的比较，正常精子形态及精子畸形指数存在统计学差异（P＜0.05），不育症组精子头、颈、尾部畸形比率均高于对照组（P＜0.05），见表1。

注：P1为不育症组与对照组之间的比较，P2为自然流产组与对照组之间的比较。

2.2精子形态与男性不育病因之间存在一定的相关性，少精症、死精症、少精合并弱精症畸形精子均明显增高（P＜0.05），弱精症与正常精液正常形态精子比较差异有统计学意义（P＞0.05），但颈部畸形精子高于正常精液（P＜0.05），见表2。

注：*表示与正常精液相应项目比较差异有统计学意义（P＜0.05）。

2.3不育症组畸形精子比率高达82.1%（211/257），自然流产组畸形精子比率也高达81.3%（13/16），且正常形态精子百分率均以中度畸形（正常形态精子百分率＞5%~≤10%）为主，分别为3
3.5%和37.5%。

而对照组63.6%的精子形态正常，见表3。

3讨论
研究显示，已婚育龄夫妇不育症发生率为10%，其中男性因素不育比例占40%左右。

正常的精子形态和结构是保证精子完成受精的基础。

因此，精子形态和结构异常必将成为导致体内和体外受精失败的重要原因。

由于精子形态异常引起的不育或生育力低下比例很高，约30%~40%，以往临床上诊断为不明原因不育症患者，其中很多人实际上是由于畸形精子率高导致受精率低或失败。

有研究[2]显示，精子形态与其功能密切相关，任何精子形态上的缺陷都将导致其功能下降，从而影响男性生育力，并认为正常形态精子百分率比精子浓度、精液量、运动性等参数更能在受孕中起预测作用。

自然流产与不育症一样，是导致生育障碍的常见原因。

男性精子构成胚胎基因组成分的一半，精子遗传异常可影响胚胎继续发育而导致流产。

近年来，精子形态异常在不育症及自然流产中所起的作用引起了极大关注，已有研究[3]表明，精子核蛋白组型转换异常、染色质结构异常、精核蛋白缺陷、DNA断裂与精子形态异常有关，而精子核异常与精子染色体非整倍体率有关，减数分裂异常可导致精子核异常。

染色质异常精子经常表现为头部形态异常，如大头精子、不定形头精子，这类精子运动速度减慢，不能到达输卵管，无法与卵结合；位于精子头部的顶体异常可使精子丧失受精能力，导致不育，甚至引发流产。

精子尾部畸形也是影响精子运动的重要因素。

精子尾部线粒体提供能量和正常形态的微管结构是精子运动的基础，尾部畸形的精子会使精子运动障碍，导致生育力下降，如无尾、短尾、无轴丝、卷尾、体尾胞质残余等精子的运动能力明显下降[3]。

由本文也可见，不育症组和自然流产组的正常形态精子与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05），不育症组精子的畸形比率更高于自然流产组，且头、颈、尾部畸形精子比率与对照组比较差异也有统计学意义（P＜0.05）。

近年的研究表明，少精和畸形精子症患者的精子中存在增高的非整倍体精子。

本文研究也发现，少精症、死精症、少精合并弱精症患者的精子形态与正常精液（精液量＞2mL、精子密度＞20×106/mL、精子活动力a级＞25%或a+b级＞50%）相比较，在精子形态上差异有统计学意义（P＜0.05），尤其是少精合并弱精症头部畸形精子、颈部畸形精子、畸形精子指数（TZI）、精子畸形指数（SDI）都高于正常精液（P＜0.05），可见，少精合并弱精症患者畸精症的可能性也相当大。

值得一提的是，本文研究发现弱精的精子形态与正常精液相比差异无统计学意义（P＞0.05），不同于国内相关报道[4]，这也许与样本来源主要为生殖科不孕不育门诊患者有关系，而且样本量相对不足。

但是，弱精症颈部畸形精子比率却显著高于正常精液（P＜0.05）。

精子颈部的胞质小滴是生殖细胞胞浆残余物，大部分被睾丸支持细胞吞噬，其余附着在伸长精子的颈部，在精子排放过程中脱落。

有研究认为，胞质小滴可产生大量活性氧，过多残余胞质可导致精子功能下降，引起男性不育[5]。

因此，是否可以认为精子颈部畸形与精子活动力存在着某种联系，共同导致不育，这将需要以后进一步表3研究组和对照组正常形态精子百分率构成比（例，%）组别
不育症组
自然流产组
对照组
≤5
(重度畸形)
75(29.2)
2(12.5)
8(7.5)
例数
257
16
105
>5~≤10
(中度畸形)
86(33.5)
6(37.5)
18(17.1)
>10~<15
(轻度畸形)
50(19.5)
5(31.3)
11(10.3)
≥15
46(17.9)
3(18.8)
68(63.6)
表1研究组与对照组精子形态分析结果比较（x±s）
正常形态精子(%)头部畸形精子(%)颈部畸形精子(%)尾部畸形精子(%)畸形精子指数(TZI)精子畸形指数(SDI)9.43±6.30
76.56±14.66
25.75±9.05
46.04±12.90
1.64±0.16
1.48±0.19
研究组
不育症组(n=257)自然流产组(n=16)
11.33±5.33 67.98±16.20 25.20±8.62 48.69±11.22 1.60±0.18 1.42±0.1516.82±7.88
67.39±14.48
23.07±9.12
43.82±12.86
1.61±0.19
1.34±0.21
对照组
(n=105)P1
<0.05
<0.05
<0.05
<0.05
>0.05
<0.05
P2
<0.05
>0.05
>0.05
>0.05
>0.05
<0.05
表2精子形态与男性不育病因的相关性分析（x±s）项目
正常形态精子(%)头部畸形精子(%)颈部畸形精子(%)尾部畸形精子(%)畸形精子指数(TZI)精子畸形指数(SDI)11.82±7.25
72.19±15.75
26.00±9.06*
45.24±13.00
1.63±0.18
1.44±0.20
弱精症
(n=184)
9.83±7.00*
76.79±13.55
25.14±9.68
47.99±11.02
1.66±0.13
1.55±0.17*
少精症
(n=48)
6.98±6.03*
84.13±14.40
26.23±9.00
35.84±13.25
1.57±0.11
1.46±0.14
死精症
(n=8)
少精合并弱精症
(n=24)
12.74±7.66
72.63±15.04
22.63±8.27
46.33±13.11
1.62±0.18
1.42±0.21
正常精液
(n=114)
6.97±4.83*
81.98±11.91*
28.02±10.47*
45.70±11.21
1.67±0.12*
1.56±0.17*
探讨研究。

形态异常的精子经常有多种缺陷。

如果一个精子同时有头部、颈部和尾部的缺陷，记录时将这三种缺陷分别记录在相应的分类中，而这个精子只作为一个细胞被计数。

精子所有缺陷的总数除以畸形精子数，即为畸形精子指数；缺陷总数除以精子总数，即为精子畸形指数。

畸形精子指数的数值介于1.00（每个异常精子只有一种缺陷）和3.00（每个异常精子都有头、中段和尾部的缺陷）之间。

以前的报道提示，畸形精子指数＞1.6与未经治疗不育夫妇的低生育率有关，而且精子畸形指数1.6是体外受精失败的阈值。

本文可见，无论是不育症组的畸形精子指数（1.64±0.16），还是自然流产组的畸形精子指数（1.60±0.18），均＞1.6，与报道相符。

国内有报道[6]指出，精子畸形指数与男性不育症患者精液精子密度、活动率、正常精子形态率呈负相关，而畸形精子指数与上述各参数间无相关性。

本文也可发现，不育症组及自然流产组的精子畸形指数与对照组精子畸形指数比较差异有统计学意义（P＜0.05），并且少精症以及少精合并弱精症的精子畸形指数高于正常精液精子畸形指数（P＜0.05），但所有研究项目畸形精子指数与对照比较（除少精合并弱精症外），差异均无统计学意义（P＞0.05）。

由此可见，精子畸形指数与不育症和自然流产的关系更密切，是男性不育诊断的重要参数[7]。

本文研究可见，不育症畸形精子比率高达82.1%（211/257），自然流产畸形精子比率也高达81.3%（13/16），并且不育症和自然流产的精子均以中度畸形（正常形态精子百分率＞5%~≤10%）为多，分别为33.5%和37.5%。

对照组63.6%的精子形态正常，如果只做精液常规检测，会有36.4%的畸精症患者将漏检。

因此精子形态学分析应该与精液常规检测一起作为不育症及自然流产的首要检查项目，并分析精子畸形指数，提高临床确诊率。

参考文献：
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用实验室检验手册[M]．4版．北京：人民卫生出版社，2001：15. [2]Yu JJ，Xu YM.Ultrastructural defects of acrosome in infertile men[J]．
Arch Androl，2004，50(6)：405.
[3]王瑞雪，孙卉芳，刘睿智．畸形精子症研究进展[J]．生殖与避孕，
2007，27(4)：292.
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实用医学杂志，2009，25(14)：2248.
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不育症患者精子密度、活动率及精子形态的关系[J]．广东医学，
2006，27(2)：231.
收稿日期：2011-02-14。