多发性骨髓瘤常见分子细胞遗传学异常及其意义

多发性骨髓瘤常见分子细胞遗传学异常及其意义

[摘要] 多发性骨髓瘤是一种常见的浆细胞恶性肿瘤，重要的染色体与基因异常导致疾病的进展，在多发性骨髓瘤中具有独立的预后判断价值。随着检测方法的更新及技术的进步，异常染色体与基因的检出率越来越高，主要包括13号染色体全部或部分缺失伴或不伴14q32/igh的重排等染色体异常。异常染色体与基因的检测具有重要价值，可完善mm预后评估体系，指导临床个体化治疗并为新药开发提供新的靶点。

[关键词] 多发性骨髓瘤；分子细胞遗传学；预后

1染色体数目异常

1.1超二倍体

mm患者超二倍体主要表现为1、3、7、9、11、13、15、17、18、19、21、22三体型[1]；另外，近年来国内也有人发现mm患者8号染色体三体，王晓炜等[2]应用荧光免疫表型和间期细胞遗传学（fiction）技术对mm骨髓涂片进行8号染色体检测，9例mm患者中，发现8号染色体三体1例，这可能与应用fiction技术提高了检测效率有一定关系。

1.2亚二倍体

mm患者亚二倍体主要表现为6、8、13、14、x、y单体型为特征；其中13号染色体单体缺失及其部分缺失是目前研究较为广泛的染色体异常之一。

2染色体结构异常

2.113号染色体异常

13 号染色体部分或完全缺失是mm 最早发现的染色体异常，mm 中较常见，而且是mm预后及生存期预测的指标之一。13号染色体异常，特别是13单体（-13）和13号染色体长臂部分缺失（13q-）与mm预后的关系越来越受到重视。目前认为13号染色体上存在 mm 抑癌基因，其缺失与疾病危重、疗效和预后密切相关。pérez-simón等[3]采用荧光原位杂交（fish）方法分析了15 种不同染色体异常在常规剂量化疗患者中的预后价值，发现13号染色体缺失是最重要的预示生存期短的预后指标，但对治疗反应无影响。由于13q-的断裂点范围在13q11~13q14，rb1基因正好也于这个区域，因此有人推测13号染色体完全或部分缺失所致mm预后不良可能与rb1基因改变有关。

chiecchio等[4]通过fish技术对400例新发mm患者染色体检测发现，至少有一种染色体数目或结构异常者达99%，其中13号染色体缺失：单体缺失及部分缺失约占47%。fonseca等[5]采用cig-fish 技术在54%的mm患者中检测到del（13q14），所使用的探针为rb1和d13s319。shaughnessy等[6]采用11种探针涵盖13号染色体长臂以研究13号染色体缺失，发现86%的mm患者存在13号染色体缺失，最多的丢失位点是d13s272 （13q14.1，占76 %）和d13s31（13q14q21，占68%）两个13q14处不相连的片段。而常见位点rb1

和d13s319 的缺失频率分别是52%和70%。目前认为丢失13号染色体整个长臂或13号染色体完全缺失最常见。

2.214号染色体异常

14号染色体异常是mm最常见的结构异常，绝大多数是由于伙伴染色体与14号染色体交互易位造成；从而形成mm特殊的标记染色体14q+和14号染色体缺失即del（14）。在mm中，应用fish技术检测14号染色体易位，可发现约20%~60%浆细胞伴有14号染色体易位；其中，t（11；14）（q13；q32）是最常见的改变[7]，占14号染色体易位的30%，其肿瘤细胞形态多为小裂浆细胞。其他还有t（8；14）（q24；q31），t（14；18）（q32；q21），t（4；14）（p16；q32），及t（6；14）（q21；q32）等，染色体断裂点几乎都发生在14q32.3。madoka takimoto[8]等应用fish技术检测23例mm患者，发现10例伴有14号染色体易位，约占43.5%，其中11q13/ccnd1占5例、16q23/maf4例、4p16/fgfr3仅1例。

2.2.1t（11；14）（q13；q32）takimoto等[8]应用fish技术检测23例mm患者，发现5例11q13/ccnd1易位，约占21.7%。t（11；14）易位造成了cyclind1的过度表达，断裂点位于11号着丝粒端距cyclind1基因330kb处，无主要易位集簇区（mtc），其断裂点覆盖了整个cyclind1基因。cyclind1蛋白与周期素依赖性激酶cdk4和cdk6联合作用可以使rb磷酸化而使细胞由g1期进入到s 期，是b细胞增殖的重要因子，与mm 发生关系密切。t（11；14）

导致cyclin d1基因高度表达，则可能使细胞的增殖和分化出现异常。由于人类骨髓瘤细胞系（hmcl）t（11；14）（q13；q32）的发生率明显增加，此易位可能造成mm 克隆增殖，从而使得疾病进展恶化。临床发现有t（11；14）的mm细胞出现淋巴细胞样浆细胞的表型，且常规治疗效果较差。研究发现有此易位的mm患者经大剂量化疗和干细胞支持后预后较好[9-11]。

2.2.2t（4；14）（p16.3；q32.3）这种染色体易位用常规细胞遗传学（cc）方法无法发现，然而用间期fish技术可以在15%～20% mm 患者中检出，目前尚未在其它b细胞肿瘤及其它非血液系肿瘤中发现t（4；14）异常，因此t（4；14）可能是mm特有的细胞遗传学改变。4p16.3的断裂点位于染色体着丝粒端，距成纤维细胞生长因子3（fgfr3）基因50~100kb 处，易位到igh 的调节元件区如转录增强子和位点控制区（lcr），引起fgfr3表达失控；同时该易位可引起4号染色体mm set（multiple myeloma set domain）基因的表达明显增强。由此可见，t（4；14）可同时影响fgfr3和mm set 两个基因的表达，易位形成igh-mmset融合基因。fgfr3的高表达引起瘤细胞的增殖，凋亡受抑，而在正常浆细胞未能检出fgfr3表达。mm set基因可编码具有32羟基232甲基戊二酸（32-hydroxy 232-methylglutariacid，hmg）功能域的核蛋白，该蛋白具有4个phd-锌指和1个set功能域；这几个功能域均编码与染色质重构有关的核蛋白，与细胞生长、分化的信号调控有关。且经过对mm set