东南大学博士研究生开题报告
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3、GDNF 的神经营养作用主要是通过胶质细胞源性神经营养因子受体 alpha( GFRαs) 亚基和受体酪氨酸激酶Ret 亚基结合，并引起酪氨酸残基 自磷酸化, 从而引起下游的信号转导。
4、GDNF的生理功能：对运动神经元、感觉神经元、多巴胺神经元的营养支 持； GDNF对缺血性损伤的保护作用；在痛觉通路中发挥作用；参与血-脑 屏障的形成。
负担，而在其支配下的自伤、自杀、扩大性自杀等暴力行 为更是危害巨大
抑郁症病因
❖ 遗传因素
家系研究、双生子研究、分子遗传学研究
❖ 神经生物学因素
神经传递异常、神经生理异常(睡眠)、神经内分泌异 常
❖ 素质和躯体因素
体质体型学说、早年经历和人格特点、躯体状况和疾 病
❖ 心理社会因素
抑郁症的病理机制假说
实验技术路线（1）
出生24小时的SD大鼠
星型胶质细胞的纯化培养和鉴定
空白对照组
氟西汀干预组
不 同 时 间 点
不 同 药 物 浓 度
ELISA、real-time PCR
实验技术路线（2）
对照组 对照组+ 氟
西汀 应激组 应激组+ 氟西汀
无应激 氟西汀 应激
应激+氟西汀 21 days
● Glial number in subgenual prefrontal cortex in familial MDD (24%) and BPD (41%) (Ongur et al 1998)
● Glial cell density in layer V (30%) in prefrontal cortex (area 9) in MDD (Cotter et al 2002)
型胶质细胞分泌的GDNF水平、real-time PCR检测mRNA GDNF 的表达。 2、 建立应激大鼠模型，给予氟西汀干预后， 来研究星型胶质细胞的 数目和密度。通过real-time PCR和WestBlot分别检测mRNA GDNF和GDNF蛋白的表达。 3、 ELISA检测抑郁症患者抗抑郁药和电休克治疗前后血清GDNF水平 的变化。
● Glial cell density in layer VI (22%) in anterior cingulate cortex in MDD (Cotter et al 2001)
● Glial cell counts, glial density, and glia-to-neuron ratios in amygdala in MDD (Bowley et al 2002)
抑郁症的流行病学
❖ 全球有抑郁症患者约1.2-2.0 亿 ❖ WHO（1996）在中国的调查发现抑郁症的患病率已经达到
7% ▪ 到2020年，抑郁症在全球疾病总负担中将升至第二位 ▪ 我国有超过2600万人患有抑郁症，造成直接和间接经济损
失每年超过640亿元人民币 ▪ 抑郁症引起的精神残疾给患者、家庭和社会带来了沉重的
胶质源性神经生长因子（GDNF）生理特点
1、1993年Lin等从大鼠B49胶质细胞系中分离、纯化并成功克隆。人的GDNF 基因位于5P13.1-13.3,大鼠与人的GDNF氨基酸序列有93%相同。
2、GDNF以前体形式合成，修饰为含134个氨基酸的成熟蛋白形式分泌。 GDNF含7个保守的半胱氨基酸残基，GDNF为TGF- β超家族的一员。
❖ “三个”假说
单胺神经递质（5-HT、NE和DA）的缺乏 பைடு நூலகம்胺递质缺乏引起相应受体上调 神经可塑性：神经再生受损，海马体积减少
抗抑郁剂的作用示意图
3维脑影像显示海马体积：有抑郁史者减少大约10%
Reduced Glia in MDD & BPD
● Density/size of glia in dorsolateral prefrontal cortex and caudal oribito frontal cortex in MDD & BPD-layer specific (Miguel-Hidalgo and Rajkowska 2002; Rajkowska et al 1999)
抗抑郁剂、情感稳定剂及电休克治疗 （ECT ）的可能机制
1、不同类型的抗抑郁药能够促进神经病胶质瘤C6细胞株分泌GDNF， GDNF的分泌量与抗抑郁药干预存在时间和浓度的依赖。
2、抗抑郁药（氟西汀）能够阻断应激导致的大鼠模型中星型胶质细 胞的体积和数目的减少。
3、情感稳定剂（如：碳酸锂、丙戊酸盐）能够使抑郁大鼠模型中 mRNA BDNF表达上调。
4、电休克的治疗作用与神经胶质细胞可能有部分联系。 在电休克治 疗的动物模型的齿状回等脑区GFAP（神经胶质酸性蛋白）表达 与合成增加。 抗抑郁剂、情感稳定剂及电休克治疗（ECT ）对抑郁的治疗作用 可能是通过星型胶质细胞来发挥效果？
研究目标
本课题拟做如下研究： 1、给予纯化培养的大鼠海马星型胶质细胞氟西汀处理，ELISA检测星
星形胶质细胞的生理功能
1、成年脑中近90 %的细胞是胶质细胞,其中主要是星型胶质细胞(ast rocytes , AS)， AS 长期以来被认为是脑组织中简单的堆积物，发挥着 连接、支持、固定脑组织的作用，为神经元提供营养以及清除突触间隙 中过多的离子和/ 或神经递质。 2、1997 年Pfrieger 等首次报道AS能强烈促进神经元间的突触联系后， 对AS的认识进入了一个崭新的阶段。一系列对于AS 的研究证实:AS还 可以调节神经元的周围环境,分泌神经营养因子（如：GDNF、BDNF、 NGF、NT3/4等 ），参与血脑屏障构成, 调节神经元突触的生长和功能 成熟，调控神经的发生，参与脑中信号传递等。 3、 AS能够回吸收5-羟色胺（5-HT），在AS细胞膜存在有5-HT和类固 醇受体。
● Glial cell density in sublayer IIIc (19%) (and a trend to decrease in layer Va) in dorsolateral prefrontal cortex (area 9) in BPD (Selemon, unpublished data)
4、GDNF的生理功能：对运动神经元、感觉神经元、多巴胺神经元的营养支 持； GDNF对缺血性损伤的保护作用；在痛觉通路中发挥作用；参与血-脑 屏障的形成。
负担，而在其支配下的自伤、自杀、扩大性自杀等暴力行 为更是危害巨大
抑郁症病因
❖ 遗传因素
家系研究、双生子研究、分子遗传学研究
❖ 神经生物学因素
神经传递异常、神经生理异常(睡眠)、神经内分泌异 常
❖ 素质和躯体因素
体质体型学说、早年经历和人格特点、躯体状况和疾 病
❖ 心理社会因素
抑郁症的病理机制假说
实验技术路线（1）
出生24小时的SD大鼠
星型胶质细胞的纯化培养和鉴定
空白对照组
氟西汀干预组
不 同 时 间 点
不 同 药 物 浓 度
ELISA、real-time PCR
实验技术路线（2）
对照组 对照组+ 氟
西汀 应激组 应激组+ 氟西汀
无应激 氟西汀 应激
应激+氟西汀 21 days
● Glial number in subgenual prefrontal cortex in familial MDD (24%) and BPD (41%) (Ongur et al 1998)
● Glial cell density in layer V (30%) in prefrontal cortex (area 9) in MDD (Cotter et al 2002)
型胶质细胞分泌的GDNF水平、real-time PCR检测mRNA GDNF 的表达。 2、 建立应激大鼠模型，给予氟西汀干预后， 来研究星型胶质细胞的 数目和密度。通过real-time PCR和WestBlot分别检测mRNA GDNF和GDNF蛋白的表达。 3、 ELISA检测抑郁症患者抗抑郁药和电休克治疗前后血清GDNF水平 的变化。
● Glial cell density in layer VI (22%) in anterior cingulate cortex in MDD (Cotter et al 2001)
● Glial cell counts, glial density, and glia-to-neuron ratios in amygdala in MDD (Bowley et al 2002)
抑郁症的流行病学
❖ 全球有抑郁症患者约1.2-2.0 亿 ❖ WHO（1996）在中国的调查发现抑郁症的患病率已经达到
7% ▪ 到2020年，抑郁症在全球疾病总负担中将升至第二位 ▪ 我国有超过2600万人患有抑郁症，造成直接和间接经济损
失每年超过640亿元人民币 ▪ 抑郁症引起的精神残疾给患者、家庭和社会带来了沉重的
胶质源性神经生长因子（GDNF）生理特点
1、1993年Lin等从大鼠B49胶质细胞系中分离、纯化并成功克隆。人的GDNF 基因位于5P13.1-13.3,大鼠与人的GDNF氨基酸序列有93%相同。
2、GDNF以前体形式合成，修饰为含134个氨基酸的成熟蛋白形式分泌。 GDNF含7个保守的半胱氨基酸残基，GDNF为TGF- β超家族的一员。
❖ “三个”假说
单胺神经递质（5-HT、NE和DA）的缺乏 பைடு நூலகம்胺递质缺乏引起相应受体上调 神经可塑性：神经再生受损，海马体积减少
抗抑郁剂的作用示意图
3维脑影像显示海马体积：有抑郁史者减少大约10%
Reduced Glia in MDD & BPD
● Density/size of glia in dorsolateral prefrontal cortex and caudal oribito frontal cortex in MDD & BPD-layer specific (Miguel-Hidalgo and Rajkowska 2002; Rajkowska et al 1999)
抗抑郁剂、情感稳定剂及电休克治疗 （ECT ）的可能机制
1、不同类型的抗抑郁药能够促进神经病胶质瘤C6细胞株分泌GDNF， GDNF的分泌量与抗抑郁药干预存在时间和浓度的依赖。
2、抗抑郁药（氟西汀）能够阻断应激导致的大鼠模型中星型胶质细 胞的体积和数目的减少。
3、情感稳定剂（如：碳酸锂、丙戊酸盐）能够使抑郁大鼠模型中 mRNA BDNF表达上调。
4、电休克的治疗作用与神经胶质细胞可能有部分联系。 在电休克治 疗的动物模型的齿状回等脑区GFAP（神经胶质酸性蛋白）表达 与合成增加。 抗抑郁剂、情感稳定剂及电休克治疗（ECT ）对抑郁的治疗作用 可能是通过星型胶质细胞来发挥效果？
研究目标
本课题拟做如下研究： 1、给予纯化培养的大鼠海马星型胶质细胞氟西汀处理，ELISA检测星
星形胶质细胞的生理功能
1、成年脑中近90 %的细胞是胶质细胞,其中主要是星型胶质细胞(ast rocytes , AS)， AS 长期以来被认为是脑组织中简单的堆积物，发挥着 连接、支持、固定脑组织的作用，为神经元提供营养以及清除突触间隙 中过多的离子和/ 或神经递质。 2、1997 年Pfrieger 等首次报道AS能强烈促进神经元间的突触联系后， 对AS的认识进入了一个崭新的阶段。一系列对于AS 的研究证实:AS还 可以调节神经元的周围环境,分泌神经营养因子（如：GDNF、BDNF、 NGF、NT3/4等 ），参与血脑屏障构成, 调节神经元突触的生长和功能 成熟，调控神经的发生，参与脑中信号传递等。 3、 AS能够回吸收5-羟色胺（5-HT），在AS细胞膜存在有5-HT和类固 醇受体。
● Glial cell density in sublayer IIIc (19%) (and a trend to decrease in layer Va) in dorsolateral prefrontal cortex (area 9) in BPD (Selemon, unpublished data)