《基础微生物学》PPT课件

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菌体
过程:
裂解
供体菌
正常噬菌体 + 完全缺陷噬菌体
少量裂解物 + 大量受体菌
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遗传稳定的转导子
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完全普遍转导
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(1) 普遍性转导(generalized transduction)
过程:
P22在供体菌内增殖时,宿主的核染色体组断裂,待噬
菌体成熟与包装之际,极少数(10 – 6 ~10 – 8)噬菌体
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➢1.2流产普遍性转导(abortive transduction)
概念:受体菌经转导获得的供体DNA片段在受体菌中不发生配 对、交换和整合,也不迅速消失,而只是进行转录和转译 (性状表达),这种现象就称为流产转导。
现象:发生流产转导的细胞在其进行细胞分裂后,只能将这段 外源DNA分配给一个子细胞,而另一子细胞仅获得供体基因 的产物——酶,在表型上表现出轻微的供体菌特征,每经过 一次分裂,就受到一次稀释,
三、转导(transduction)
1.转导及其发现
J.Lederberg等(1952)在Salmonella typhimurium(鼠 伤寒沙门氏菌)中发现的。
Try-his+ A
[-]
Try+hisB
混合培养
[-] [-]
Try+his+
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TryA-his+
Try+hisB
[-]
[-]
的衣壳将与噬菌体头部核心大小相似的一段供体DNA
片段误包入其中,形成了一个完全不含噬菌体自身
DNABaidu Nhomakorabea缺陷噬菌体。
供体菌裂解时,如把少量裂解物与大量受体菌群体相混,
使其感染复数(m.o.i)<1,这种完全缺陷噬菌体就会
将这一外源DNA片段导入受体细胞内。
在这种情况下,由于一个受体细胞只感染了一个完全缺
用LFT裂解物以低 m. o. i(感染复数)感染宿主, 就可获得极少量的局限转导子,即低频转导。
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高频转导和低频转导图解
E.coli K12 ()gal+(供体菌)
U.V.
(大量) + dgal+(10-5)
E.coliK12Sgal-(受体菌)
低频转导
E.coliK12Sgal-/ dgal+ E.coliK12Sgal-/ dgal+/
感染复数——由于每一宿主细胞表面的特异性受体有限, 因此所能吸附的噬菌体数目也有一个限量。每一敏感细胞 所能吸附的噬菌体的数量,m.o.i一般很大,可达250~360。
由于超m.o.i的外源噬菌体吸附而引起的、不能产生子代噬 菌体的裂解,称为自外裂解(lysis from without)。
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定义:通过完全缺陷噬菌体对供体菌任何DNA小片段的“误包” 而实现其遗传性状传递至受体菌的转导现象,称为普遍性转 导。
1.1完全(普遍性)转导:complete transduction。1952年
发现,在Salmonella typhimurium中存在转导现象。在它的 完全普遍性转导实验中:
以其野生型菌株作为供体菌 营养缺陷型菌株作为受体菌 P22噬菌体作为转导媒介,对供体菌是烈性噬菌体,对受体菌是温和噬
陷噬菌体,故受体细胞不会发生往常的溶原化,也不
显示其免疫性,更不会裂解和产生正常的噬菌体;而
由于导入的外源DNA片段可与受体细胞核染色体组上
的同源区段配对,在通过双交换而整合到受体菌染色
体组中,所以使后者成为一个遗传性状稳定的转导子。
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感染复数(m.o.i,multiplicity of infection):
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噬菌体裂解第一个宿主时可能有三种情况: 1)包入的完全是噬菌体的DNA(正常噬菌体) 2)包入的完全是细菌DNA(完全缺陷噬菌体) 3)部分带有噬菌体基因的DNA(部分缺陷噬菌体) 转导分别是由后两种噬菌体参与进行的。
噬菌体裂解第一个宿主
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一个稳定的转导子的形成
1. 第一次交换 2. 第二次交换 3. 交换完成,外源DNA掺入染色体组中
Try+his+
定义:以温和噬菌体为媒介,将供体细胞的DNA 片段携带到受体细胞中,通过交换与整合,从而 使后者获得前者部分遗传性状的现象,称为转导。 获得新遗传性状的受p体pt课细件 胞,称转导子。 2
2.转导的种类
转导
普遍转导
完全普遍转导 流产普遍转导
局限转导
低频转导 高频转导
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(1) 普遍性转导(generalized transduction)
(双重容源转导子)
E.coliK12Sgal-/ dgal+/ (双重容源菌供体)
所以,能在选 择性培养基平 板上形成微小 菌落就是流产 转导的特点。
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2. 局限性转导
定义:通过部分缺陷的温和噬菌体把供体菌的少数 特定基因携带到受体菌中,并获得表达的转导现 象。
特点:
●噬菌体对供体菌和受体菌都是温和噬菌体 ●只能转导供体菌的个别特定基因(一般为噬菌体整合
位点两侧的基因) ●该特定基因由部分缺陷的噬菌体携带 缺陷噬菌体使由于其在形成过程中所发生的低频率(约
“误包”,就形成了一种特殊的
噬菌体——缺陷噬菌体
(defective phage)。它们没有
将宿主溶源化的能力,而是使宿
主成为一个局限转导子,对噬
菌体没有免疫性。
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2.1低频转导(LFT,low frequency transduction)
一般的转导现象中,从宿主染色体上切离时发生不 正常切离的频率极低,故这种裂解物中的部分缺 陷噬菌体的比例是极低的(10 – 4 ~ 10 – 6)。把这 种裂解物称为LFT(低频转导)裂解物 。
10 – 5)“误切”,或由于双重溶源菌的裂解而形成 (约形成50%缺陷噬菌体)
分类:低频转导与高频转导
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转导的过程
➢温和噬菌体感染受体菌后,其DNA会开环,以线状形式整合到宿主染色体的特定 位点上,从而使宿主细胞发生溶源化,并获得对相同温和噬菌体的免疫性。
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➢该溶源菌被诱导裂解时,有极少
数(~ 10 – 5)的前噬菌体
(prophage)发生不正常切离
(abnormal excesion),其结果
会将插入位点两侧之一的少数宿
主基因(如E.coli前噬菌体的两
侧分别为发酵半乳糖的gal基因
或合成生物素的bio基因)连接
到噬菌体DNA上(而噬菌体也
将相应的一段DNA遗留在宿主
的染色体组上),通过衣壳的
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