6.荧光分析法的特点和应用

2.生物与有机化合物的分析
芳香族化合物因具有共轭的不饱和体系，多数能发生 荧光，可直接用荧光法测定。 维生素、氨基酸和蛋白质、胺类、甾族化合物、酶和 辅酶等，均可用荧光法分析。
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荧光源自文库析法的特点和应用
一.荧光定性分析
将样品的荧光物质的激发光谱和荧光光 谱图的形状、位置与标准溶液光谱图进行比 较，从而鉴别样品是否与标准溶液是同一种 物质。
二.荧光定量分析
（1）优缺点 优点： 1、灵敏度高 比紫外-可见分光光度法高2～4个数量级； 检测下限：10-10～10-12g/ml 2、选择性强 既可依据特征发射光谱，又可根据特征吸收光谱； 3、试样量少和方法简单 缺点： 应用范围小。
F Fx
Cx
Cs
3）多组分样品的荧光分析 a.无相互干扰，分别测定
b.有干扰，同紫外－可见吸收光谱定量方法
解联立方程组法 等吸收双波长消去法
三.荧光分析法的应用
1.无机化合物的分析
与有机试剂配合物后测量；可测量约60多种元素。 铍、铝、硼、镓、硒、镁、稀土常采用荧光分析法； 氟、硫、铁、银、钴、镍采用荧光熄灭法测定； 铜、铍、铁、钴、锇及过氧化氢采用催化荧光法测； 铬、铌、铀、碲采用低温荧光法测定； 铈、铕、锑、钒、铀采用固体荧光法测定
（2）定量依据与方法 1、定量依据 荧光强度If 正比于吸收的光强度Ia和荧光量
子产率Φ ：
I f I a
bC
由朗伯-比耳定律得：
I a I 0 I t I 0 1 10

荧光强度 If ：
对于稀溶液，当 2.303bC < 0.05时：
I f 2.303 f I 0 bC
式中：
If ----荧光强度； I0 ----入射光强度；
Φ f ----荧光量子产率；
b ---- 吸收光程； ---- 摩尔吸光系数； C ---- 物质浓度。
简化为：
I f KC
2、定量方法 1）标准曲线法： 配制一系列标准浓度试样测定荧光强度绘 制标准曲线，再在相同条件下测量未知试样 的荧光强度，在标准曲线上求出浓度；