龙眼多糖清除自由基活性的研究
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第１ ５卷 第 ２期
２１ ０ ０年 ３ 月
集美大学学报 （ 自然科 学Fra Baidu bibliotek ）
Ｊｕ ａ ｏ ｍｅ Ｕ ｉ ｒ ｔ（ ａ ｒ ｃ ｎｅ ｏｒ ｌ ｆ ｉ ｉ ｎ ｅｓｙ Ｎ ｔ ａ Ｓｉ ｃ ） ｎ Ｊ ｖ ｉ ｕｌ ｅ
Ｖ０． ５ Ｎｏ ２ １１ 。
Ｍａ ．２ １ ｒ ００
［ 文章编号 】１ ７ ７０ （００ ０ ００ － ６ ０ — ４５２ １）２— １９ ０ ０
代谢过程中，机体 自 的抗氧化防御体系能够维持体 内氧 自由基平衡ｎ ，一旦机体发生病变或受到 身 Ｊ
紫外线照射、电离辐射 、化学毒物及药物 的影响时，机体 的防御及修复体系就不足以维持机体 自由基 的平衡 ，从而引发机体 自由基稳衡态紊乱 ，产生多余 自由基 ，进而导致 细胞损伤 ，引发心脏病 、 癌症 、动脉粥样硬化等严重疾病和加速衰老过程 Ｊ ．由于化学合成的抗氧化剂存在致癌、毒副作用 等安全问题【 ’，因而 ，天然抗 氧化剂是减轻细胞氧化损伤、预防相关疾病和延缓衰老的最有效措 ６】 一 施 Ｊ ．现代医学研究表明 ， 水果和蔬菜中含有大量的抗氧化活性成分 ‘ ，因此 ，从天然植物 中
（ ・ ０ ）三个方面 ，探讨纯化方法对龙眼多糖清除 自由基活性的影响． 以抗坏血 酸为对 照 ， 用分光光度 利 法分别 测定龙眼粗多糖 （ ＬＳ 、Ｓｖｇ Ｃ Ｐ ） ｅａ 法脱蛋 白制得 的龙 眼粗 多糖半纯品 （ ＬＳ 、Ｔ Ａ法脱蛋 白制得 的 ＳＰ ） Ｃ 龙 眼粗 多糖半纯 品 （ Ｌ＇） Ｔ ｒ 、经 Ｄ Ａ Ｓ Ｅ Ｅ—Ｃ ｌ ｌ ｅ ２离子交换 柱层 析纯化得 到 的龙眼多 糖纯 品 （ Ｐ ｅ ｕ ｓ ｌｏ ５ Ｌ Ｓ一２ ） 对 Ｄ Ｐ ・ ・ Ｈ和 ０ ・ ＰＨ 、 Ｏ 的清除能力．结果显示 ：多糖纯度越 高 ，清除 Ｄ Ｐ 活性也越强 ， 清除活性 Ｐ Ｈ・ 其
・
１ Ｏ・ １
集美大学学报 （自然科学版 ）
第 ｌ ５卷
１ 材 料 与 方 法
１ １ 材料及 主 要试剂 ．
以同安 “ 壳 ”龙 眼干 为实验材 料 ，购于厦 门市集 美市场 ． 赤 １ 一二 苯 基 一２一苦 苯 肼 自 由基 （ Ｐ Ｈ ・） Ｄ ９ ９ （日本 Ｔ Ｉ 司 ） Ｅ Ｅ—Ｃｌ ｌ ｅ５ ，１ ＤＰ ００ Ｃ公 ；Ｄ Ａ ｅｕｏ ２ ｌ ｓ （ｉ 公 司 ） ｅｈｄｘＧ一１０ （ ｈｒａｉ） Ｓｇ ｍａ ；Ｓｐａｅ ０ Ｐ ａｍ ｃ ；浓 硫酸 、苯酚 、正 丁醇 、三 氯 甲烷 、抗 坏血 酸 、水 杨 ａ 酸 、邻苯 三酚等 所有其 他试剂 均为 国产分 析纯．
筛选高效 、安全的天然抗氧化剂成为国内外研究的热点． 龙 眼 （ ｍｏａｐ ｓｏｇ ｎＬ ｕ）俗 名桂 圆 ，属无 患 子科 （ ａｉｄｃａ）龙 眼属 （ ｍｏａｐ ｓ Ｄｉ ｃｒｕ ｎ ａ ｏｒ ｌ Ｓｐｎ ａｅｅ Ｄｉ ｃｒｕ），是 我国南方主要的亚热带水果之一 ，主产于福建、广东、广西、海南等地．龙 眼富含多糖 、蛋 白质 ，还 含有维生素 Ｂ 、维生素 Ｂ 、胡萝 卜 。 素、腺苷、胆碱等人体所必需的多种营养物质 ， 具有很高的营养 价值 和保健 价值 ．现代 药理研 究表 明 ，龙 眼具 有 降血 脂 、增 加 冠 状 动 脉血 流 量 、免 疫 调 节 、抗 癌 防 癌 、排 毒解 毒等功 能 ¨ ．龙 眼多糖 （ ｏｇｎＰｌ ａｃａｉｅ Ｐ ） 是龙 眼中最 重 要 的生 物 活性 成分 ， 引 Ｌｎａ ｏｙ ｃｈｒ ，Ｌ Ｓ ｓ ｄ 目前 已有 关 于龙 眼果 肉热水 浸 提液清 除 自由基 活性 的报道 －－ ］ １ ２ ，但 关 于纯 化 多糖 清 除 自由基 活 性 的 ０ 研究仍未见报道．本文以抗坏血酸为对照 ，分别对龙 眼粗多糖 （ Ｌ Ｓ 、Ｓｖｇ Ｃ Ｐ ） ｅａ 法脱蛋 自制得 的龙 眼
粗 多糖半 纯 品 （Ｌ Ｓ 、Ｔ Ａ法 脱蛋 白制得 的龙 眼粗 多糖半 纯 品 （Ｌ Ｓ 和 由 Ｄ Ａ ＳＰ） Ｃ ＴＰ ） Ｅ Ｅ—Ｃ ｌｌｓ ２离 ｅｕｏｅ５ ｌ 子交 换柱层 析 纯化得 到的龙 眼多糖 纯 品 Ｌ Ｓ一 Ｐ ２进 行 了清 除 自由基 活性 的研究 ，以期 为 龙 眼多糖 的抗
龙 眼 多糖 清 除 自 由基 活 性 的研 究
王雪艳 ，陈发河 ，吴光斌 ，黄 志勇
（ 集美大 学生 物工程 学院 ，福建 厦 ｆ ３ １２ ） － ６ ０ １ ／
［ 摘要 ］从 清除 １ 一二苯基 一 ，１ ２一苦苯 肼 自由基 （ Ｐ Ｈ ・） ＤＰ 、羟 基 自由基 （・ Ｈ） 和超 氧阴离 子 Ｏ
由强到弱依次为 ：Ｉ ＮＳ一 Ｔ Ｐ ２＞ Ｌ Ｓ＞Ｓ Ｐ Ｌ Ｓ＞Ｃ Ｐ ；对于 ・ Ｈ和 ０ ・，ＳＰ ＬＳ Ｏ Ｌ Ｓ清 除活 性最强 ，Ｌ Ｓ一２清除活 Ｐ 性最弱 ，说 明杂蛋 白质抑制了多糖清除 ・ Ｈ、０－・ Ｏ ２ 活性 ，而糖蛋 白中的蛋 白质则起到促进作用．
［ 关键 词］龙眼 ；多糖 ； 纯化方法 ； 自由基 ；清除能力
【 中图分类号］Ｓ５ １ １ ８ ． ７ ． ；Ｒ２４ ２ 【 文献标 志码 ］Ａ
Ｏ 引言
活性氧 （ ｅｃｖ ｘｇｎ ｐｃ ｓ Ｏ ）是氧在体内代谢过程中产生的单线态氧 （Ｏ ） Ｒ ａｔｅ ｙｅ ｅｉ ，Ｒ Ｓ ｉ Ｏ Ｓ ｅ 、过氧化
氢 （ 、羟基 自由基 （・ Ｈ） 和超 氧 阴离 子 （ ・ 等具有 活泼化 学性 质 的产物 ．在正 常生 理 ＨＯ ） Ｏ Ｏ ）
氧化活性研究及开发利用提供一定的理论依据．
［ 收稿 日期 ］２０ — １ １ ０８ １ — ９ ［ 回 日期］２０ ０ — ４ 修 ０９— １ ０ ［ 基金项 目】福建省 自然科学基金资助项 目 （ ０ １０ ６ ；福 建省科技计划重点项 目 （０ ７ ０ ６ Ｂ ５０ ２ ） ２０Ｎ ０ ） ４ ［ 作者简介］王 雪 艳 （９ １ ） １８一 ，女 ，研 究 实 习 员 ，从 事农 产 品 贮 藏 与 加 工 方 向 研究 ．通 讯 作者 ：陈 发 河 （９ ０ ） １６一 ，男 ，教授 ，从事农产 品贮藏与加工方 向研究 ，Ｅｍａ ：ｆｅｅ ＠ｊ ｌ ｅｕ ｅ ． — ｉ ｈｈｎ ｍ１ ｄ． ｎ ｌ ．
２１ ０ ０年 ３ 月
集美大学学报 （ 自然科 学Fra Baidu bibliotek ）
Ｊｕ ａ ｏ ｍｅ Ｕ ｉ ｒ ｔ（ ａ ｒ ｃ ｎｅ ｏｒ ｌ ｆ ｉ ｉ ｎ ｅｓｙ Ｎ ｔ ａ Ｓｉ ｃ ） ｎ Ｊ ｖ ｉ ｕｌ ｅ
Ｖ０． ５ Ｎｏ ２ １１ 。
Ｍａ ．２ １ ｒ ００
［ 文章编号 】１ ７ ７０ （００ ０ ００ － ６ ０ — ４５２ １）２— １９ ０ ０
代谢过程中，机体 自 的抗氧化防御体系能够维持体 内氧 自由基平衡ｎ ，一旦机体发生病变或受到 身 Ｊ
紫外线照射、电离辐射 、化学毒物及药物 的影响时，机体 的防御及修复体系就不足以维持机体 自由基 的平衡 ，从而引发机体 自由基稳衡态紊乱 ，产生多余 自由基 ，进而导致 细胞损伤 ，引发心脏病 、 癌症 、动脉粥样硬化等严重疾病和加速衰老过程 Ｊ ．由于化学合成的抗氧化剂存在致癌、毒副作用 等安全问题【 ’，因而 ，天然抗 氧化剂是减轻细胞氧化损伤、预防相关疾病和延缓衰老的最有效措 ６】 一 施 Ｊ ．现代医学研究表明 ， 水果和蔬菜中含有大量的抗氧化活性成分 ‘ ，因此 ，从天然植物 中
（ ・ ０ ）三个方面 ，探讨纯化方法对龙眼多糖清除 自由基活性的影响． 以抗坏血 酸为对 照 ， 用分光光度 利 法分别 测定龙眼粗多糖 （ ＬＳ 、Ｓｖｇ Ｃ Ｐ ） ｅａ 法脱蛋 白制得 的龙 眼粗 多糖半纯品 （ ＬＳ 、Ｔ Ａ法脱蛋 白制得 的 ＳＰ ） Ｃ 龙 眼粗 多糖半纯 品 （ Ｌ＇） Ｔ ｒ 、经 Ｄ Ａ Ｓ Ｅ Ｅ—Ｃ ｌ ｌ ｅ ２离子交换 柱层 析纯化得 到 的龙眼多 糖纯 品 （ Ｐ ｅ ｕ ｓ ｌｏ ５ Ｌ Ｓ一２ ） 对 Ｄ Ｐ ・ ・ Ｈ和 ０ ・ ＰＨ 、 Ｏ 的清除能力．结果显示 ：多糖纯度越 高 ，清除 Ｄ Ｐ 活性也越强 ， 清除活性 Ｐ Ｈ・ 其
・
１ Ｏ・ １
集美大学学报 （自然科学版 ）
第 ｌ ５卷
１ 材 料 与 方 法
１ １ 材料及 主 要试剂 ．
以同安 “ 壳 ”龙 眼干 为实验材 料 ，购于厦 门市集 美市场 ． 赤 １ 一二 苯 基 一２一苦 苯 肼 自 由基 （ Ｐ Ｈ ・） Ｄ ９ ９ （日本 Ｔ Ｉ 司 ） Ｅ Ｅ—Ｃｌ ｌ ｅ５ ，１ ＤＰ ００ Ｃ公 ；Ｄ Ａ ｅｕｏ ２ ｌ ｓ （ｉ 公 司 ） ｅｈｄｘＧ一１０ （ ｈｒａｉ） Ｓｇ ｍａ ；Ｓｐａｅ ０ Ｐ ａｍ ｃ ；浓 硫酸 、苯酚 、正 丁醇 、三 氯 甲烷 、抗 坏血 酸 、水 杨 ａ 酸 、邻苯 三酚等 所有其 他试剂 均为 国产分 析纯．
筛选高效 、安全的天然抗氧化剂成为国内外研究的热点． 龙 眼 （ ｍｏａｐ ｓｏｇ ｎＬ ｕ）俗 名桂 圆 ，属无 患 子科 （ ａｉｄｃａ）龙 眼属 （ ｍｏａｐ ｓ Ｄｉ ｃｒｕ ｎ ａ ｏｒ ｌ Ｓｐｎ ａｅｅ Ｄｉ ｃｒｕ），是 我国南方主要的亚热带水果之一 ，主产于福建、广东、广西、海南等地．龙 眼富含多糖 、蛋 白质 ，还 含有维生素 Ｂ 、维生素 Ｂ 、胡萝 卜 。 素、腺苷、胆碱等人体所必需的多种营养物质 ， 具有很高的营养 价值 和保健 价值 ．现代 药理研 究表 明 ，龙 眼具 有 降血 脂 、增 加 冠 状 动 脉血 流 量 、免 疫 调 节 、抗 癌 防 癌 、排 毒解 毒等功 能 ¨ ．龙 眼多糖 （ ｏｇｎＰｌ ａｃａｉｅ Ｐ ） 是龙 眼中最 重 要 的生 物 活性 成分 ， 引 Ｌｎａ ｏｙ ｃｈｒ ，Ｌ Ｓ ｓ ｄ 目前 已有 关 于龙 眼果 肉热水 浸 提液清 除 自由基 活性 的报道 －－ ］ １ ２ ，但 关 于纯 化 多糖 清 除 自由基 活 性 的 ０ 研究仍未见报道．本文以抗坏血酸为对照 ，分别对龙 眼粗多糖 （ Ｌ Ｓ 、Ｓｖｇ Ｃ Ｐ ） ｅａ 法脱蛋 自制得 的龙 眼
粗 多糖半 纯 品 （Ｌ Ｓ 、Ｔ Ａ法 脱蛋 白制得 的龙 眼粗 多糖半 纯 品 （Ｌ Ｓ 和 由 Ｄ Ａ ＳＰ） Ｃ ＴＰ ） Ｅ Ｅ—Ｃ ｌｌｓ ２离 ｅｕｏｅ５ ｌ 子交 换柱层 析 纯化得 到的龙 眼多糖 纯 品 Ｌ Ｓ一 Ｐ ２进 行 了清 除 自由基 活性 的研究 ，以期 为 龙 眼多糖 的抗
龙 眼 多糖 清 除 自 由基 活 性 的研 究
王雪艳 ，陈发河 ，吴光斌 ，黄 志勇
（ 集美大 学生 物工程 学院 ，福建 厦 ｆ ３ １２ ） － ６ ０ １ ／
［ 摘要 ］从 清除 １ 一二苯基 一 ，１ ２一苦苯 肼 自由基 （ Ｐ Ｈ ・） ＤＰ 、羟 基 自由基 （・ Ｈ） 和超 氧阴离 子 Ｏ
由强到弱依次为 ：Ｉ ＮＳ一 Ｔ Ｐ ２＞ Ｌ Ｓ＞Ｓ Ｐ Ｌ Ｓ＞Ｃ Ｐ ；对于 ・ Ｈ和 ０ ・，ＳＰ ＬＳ Ｏ Ｌ Ｓ清 除活 性最强 ，Ｌ Ｓ一２清除活 Ｐ 性最弱 ，说 明杂蛋 白质抑制了多糖清除 ・ Ｈ、０－・ Ｏ ２ 活性 ，而糖蛋 白中的蛋 白质则起到促进作用．
［ 关键 词］龙眼 ；多糖 ； 纯化方法 ； 自由基 ；清除能力
【 中图分类号］Ｓ５ １ １ ８ ． ７ ． ；Ｒ２４ ２ 【 文献标 志码 ］Ａ
Ｏ 引言
活性氧 （ ｅｃｖ ｘｇｎ ｐｃ ｓ Ｏ ）是氧在体内代谢过程中产生的单线态氧 （Ｏ ） Ｒ ａｔｅ ｙｅ ｅｉ ，Ｒ Ｓ ｉ Ｏ Ｓ ｅ 、过氧化
氢 （ 、羟基 自由基 （・ Ｈ） 和超 氧 阴离 子 （ ・ 等具有 活泼化 学性 质 的产物 ．在正 常生 理 ＨＯ ） Ｏ Ｏ ）
氧化活性研究及开发利用提供一定的理论依据．
［ 收稿 日期 ］２０ — １ １ ０８ １ — ９ ［ 回 日期］２０ ０ — ４ 修 ０９— １ ０ ［ 基金项 目】福建省 自然科学基金资助项 目 （ ０ １０ ６ ；福 建省科技计划重点项 目 （０ ７ ０ ６ Ｂ ５０ ２ ） ２０Ｎ ０ ） ４ ［ 作者简介］王 雪 艳 （９ １ ） １８一 ，女 ，研 究 实 习 员 ，从 事农 产 品 贮 藏 与 加 工 方 向 研究 ．通 讯 作者 ：陈 发 河 （９ ０ ） １６一 ，男 ，教授 ，从事农产 品贮藏与加工方 向研究 ，Ｅｍａ ：ｆｅｅ ＠ｊ ｌ ｅｕ ｅ ． — ｉ ｈｈｎ ｍ１ ｄ． ｎ ｌ ．