草鱼肠道细菌产消化酶能力的初步研究
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关键 词 ： 鱼 ； 道 细菌 ； 草 肠 消化 酶
中 图分 类 号 ： ９ １３ ￥ ４ ． 文 献 标 志码 ： Ａ 文 章编 号 ：０ ２—１０ （０ ０ ０ ０ ３ ０ １０ ３ ２ ２ １ ）５— ３ ０— ２
１ ３ 产酶 菌种 筛选 ．
草 鱼 （ ｔ ｏｈｒｎｏｏ ｅｓ ） 我 国 淡 水 养 殖 ４大 家 Ｃｅ ｐ ａｙｇｄｎｉ ｌｕ 是 ｎ ｄｌ 鱼 的主 要养 殖 品种 之 一 。草 鱼 为 草 食 性 鱼 类 ， 食 各 种 水 草 喜
２ １ 菌 种分 离纯 化 ．
道 菌及 其 产 酶 能力 的 分 析 ， 解 肠 道 菌 在 草 鱼 食 物 消 化 中的 了
作用 ， 为促进草鱼的健康养殖与饲料合理投喂、 以期 提高饵料 的 利用 率 、 高 草鱼 养 殖产 量 提 供技 术 支持 ， 提 同时 也 为分 离 水
产 动物 益 生 菌 ， 开发 与 研制 草 鱼 饲用 微生 态 制 剂 打下 基 础 。
态 环境 和微 生 物群 落组 成 而 发挥 作 用 。本 研 究通 过 对 草鱼 肠
为 ７２ ； ． 产淀粉酶菌株培养基 ： 可溶性淀粉 １．０ｇ 蛋白胨 ０ ０ ，
５ ０ ， 母 膏 １ ．０ｇ琼 脂 １ ．０ｇ蒸 馏 水 １ ０ Ｌ ｐ ．０ｇ酵 ００ ， ５０ ， ０ｍ ，Ｈ值 ０
１ 材料 与 方 法
１ １ 材料 ．
从 草 鱼肠 道 中共 分离 出 ３ 细菌 ， ０株 编号 为 Ｂ １一Ｂ ０ ３ 。其
中，３ Ｂ 、 ７ Ｂ 、２ 、２ Ｂ 、４ Ｂ 、９ Ｂ ０ Ｂ ４共 ６株 为革 兰氏阳性菌 ， 其余 ２ ４
株 为革 兰 氏阴性 茵 。 ２ ２ 产蛋 白酶 菌株 的 筛选 ．
的意义 ， 道 内存在 的微 生 物 ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ 鱼 类 的 生 长 过 程 中起 着 重 要 肠 的 作用 ， 些 作 用包 括 屏 障 、 这 免疫 、 养 以及 辅 助 消 化 。其 消 营
化 过程 是 通 过 分 泌 消 化酶 分 解 食 物 中蛋 白质 、 肪 、 脂 淀粉 ， 尤
象的平板 ， 测量水解圈直径和菌落直径并记录 ， 对于有晕圈现 象的平板 ， 测量晕圈直径和菌落直径并记录。各培养基配方
摘要 ： 为了解草鱼肠道细 菌在食饵消化过程中的作用 ， 为微生态饲用添加剂的开发研究打下基础 ， 从健 康的草鱼 肠道中分离出 ３ Ｏ株细菌 ， 对其进行 了革兰氏染色鉴定和产消化酶能力分析 。结果表 明： 中有 ６株为革兰 氏阳性菌 ， 其 ２ ４株为革兰 氏阴性菌 ， ４ ．７ 有 ６ ６ ％的菌株 能分泌蛋 白酶，３ ３ ％的菌株 能分泌脂肪酶 ，０ ０ ％ 的菌株能分泌淀粉酶 ， ４ ．３ ４ ．ｏ １．７ ６ ６ ％的菌株能分泌纤维素酶 ， 其中产 ４种酶的有 ３株， ３种酶的有 ３株 ， ２种酶的有 ６株 ， １ 产 产 产 种酶的有 １ ， ４株 不产酶的仅有 ４株 ， 产酶菌株的 比例 高达 ８ ．７ ６６ ％。
一
３０ 一 ３
江 苏 农 业科 学
２１ ００年第 ５期
黄玉柳．草鱼肠道细菌产消化酶能力的初步研 究『］ Ｊ ．江苏农业科学， １ （ ）３０— ３ ２ ０ ５ ：３ ３ ２ ０
草鱼肠 道 细菌产 消化酶 能力 的初 步研究
黄 玉柳
（ 西 水 产研 究 所 ， 西南 宁 ５ ０２ ） 广 广 ３０ １
其 是 难 分 解 成 分 纤 维 素 ， 放 出可 被 草 鱼 吸 收 的 营 养 成 分 。 释
肠道中这类微生物的存在和活动 ， 能促进草鱼的生长 ， 缩短草
鱼养 殖 的生 长 周期 。 微 生态 制 剂是 指 应 用动 物 体 内外 正 常 的有 益微 生 物经 特 殊 工 艺 而制 成 的 活 菌 制 剂 … 。它 通 过 改 变 动 物 胃 肠 道 微 生
将保存的菌株点接在预先准备好 的４种产酶菌筛选平板
上， ２ 在 ８℃培 养 箱 中培 养 适 当 的时 间后 观 察 ， 于 有 水 解 现 对
和陆生岸草 ， 它不仅食量大而且消化能力强 ， 日可消耗等于 每 自身体重 ２ ％的草料 。草鱼虽食草 ， ０ 但不完全 依赖草 ， 对动 物性饵料也不拒绝。研究草鱼的肠道菌群对于其养殖有重要
成原液。然后进行 ｌ ０倍系列稀释 ， 中 ３ 取其 个适宜的稀 释度 各 ０ １ｍ ． Ｌ于 Ｆ ＷＡ（ 酸 镁 ０ ０ ， 肉 膏 ２ ５ ， 化 钠 硫 ．５ ｇ 牛 ．０ ｇ 氯
取 健康 草 鱼肠 道 ， 菌 水 冲洗 数 次后 ， 确称 取 １ｇ肠 道 无 准 放入 组 织 匀浆 器 中 ， ９ｍＬ０ ８ ％ 的 无 菌 生 理 盐 水 匀 浆 ， 加 ．５ 制
选用酪蛋 白作为底物 ， 菌落长出之后 ， 若菌落四周出现透
明 的水 解 圈 ， 明该 菌 株 能 产 生 蛋 白酶 水 解 培 养 基 中的 酪 蛋 说
如 下 ， 蛋 白酶 菌 株 培 养 基 ： 产 酪蛋 白 １．０ｇ 酵 母 膏 １０ ， ０ ０ ， ．０ ｇ 琼脂 １ ．０ｇ蒸 馏 水 １ ０ Ｌ ｐ ５０ ， ０ｍ ，Ｈ值 为 ７２ ； 肪 酶 菌株 ０ ． 产脂
培养 基 ； 蛋 白胨 ５ Ｏ ， 母 粉 １ Ｏ ， 化 钙 ０ １ ｇ 胰 ．Ｏｇ 酵 ．０ｇ 氯 ． ， Ｔ ｅｎ０为 １ ｍ ， 脂 ｌ．０ｇ 蒸 馏 水 为 １００ｍ ，Ｈ 值 ｗ ｅ８ ０ｃ 琼 ５ ０ ， ０ Ｌ ｐ
为 ７２ ； ． 产纤维素酶菌株培养基 ： Ｍ ． ８ｇ磷 酸氢二钾 Ｃ Ｃ １ ８ ， ０５ ， 酸 镁 ０ ２ ， 果 红 ０ ２ ， 胶 ２ ０ ， 脂 ．０ｇ 硫 ．５ｇ 刚 ．０ｇ 明 ． ０ｇ 琼
１．０ｇ 蒸 馏水 １００ｍ ，Ｈ值 为 ７ ２ 。 ５ ０ ， ０ Ｌ ｐ ． ２ 结 果 与分 析
中 图分 类 号 ： ９ １３ ￥ ４ ． 文 献 标 志码 ： Ａ 文 章编 号 ：０ ２—１０ （０ ０ ０ ０ ３ ０ １０ ３ ２ ２ １ ）５— ３ ０— ２
１ ３ 产酶 菌种 筛选 ．
草 鱼 （ ｔ ｏｈｒｎｏｏ ｅｓ ） 我 国 淡 水 养 殖 ４大 家 Ｃｅ ｐ ａｙｇｄｎｉ ｌｕ 是 ｎ ｄｌ 鱼 的主 要养 殖 品种 之 一 。草 鱼 为 草 食 性 鱼 类 ， 食 各 种 水 草 喜
２ １ 菌 种分 离纯 化 ．
道 菌及 其 产 酶 能力 的 分 析 ， 解 肠 道 菌 在 草 鱼 食 物 消 化 中的 了
作用 ， 为促进草鱼的健康养殖与饲料合理投喂、 以期 提高饵料 的 利用 率 、 高 草鱼 养 殖产 量 提 供技 术 支持 ， 提 同时 也 为分 离 水
产 动物 益 生 菌 ， 开发 与 研制 草 鱼 饲用 微生 态 制 剂 打下 基 础 。
态 环境 和微 生 物群 落组 成 而 发挥 作 用 。本 研 究通 过 对 草鱼 肠
为 ７２ ； ． 产淀粉酶菌株培养基 ： 可溶性淀粉 １．０ｇ 蛋白胨 ０ ０ ，
５ ０ ， 母 膏 １ ．０ｇ琼 脂 １ ．０ｇ蒸 馏 水 １ ０ Ｌ ｐ ．０ｇ酵 ００ ， ５０ ， ０ｍ ，Ｈ值 ０
１ 材料 与 方 法
１ １ 材料 ．
从 草 鱼肠 道 中共 分离 出 ３ 细菌 ， ０株 编号 为 Ｂ １一Ｂ ０ ３ 。其
中，３ Ｂ 、 ７ Ｂ 、２ 、２ Ｂ 、４ Ｂ 、９ Ｂ ０ Ｂ ４共 ６株 为革 兰氏阳性菌 ， 其余 ２ ４
株 为革 兰 氏阴性 茵 。 ２ ２ 产蛋 白酶 菌株 的 筛选 ．
的意义 ， 道 内存在 的微 生 物 ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ 鱼 类 的 生 长 过 程 中起 着 重 要 肠 的 作用 ， 些 作 用包 括 屏 障 、 这 免疫 、 养 以及 辅 助 消 化 。其 消 营
化 过程 是 通 过 分 泌 消 化酶 分 解 食 物 中蛋 白质 、 肪 、 脂 淀粉 ， 尤
象的平板 ， 测量水解圈直径和菌落直径并记录 ， 对于有晕圈现 象的平板 ， 测量晕圈直径和菌落直径并记录。各培养基配方
摘要 ： 为了解草鱼肠道细 菌在食饵消化过程中的作用 ， 为微生态饲用添加剂的开发研究打下基础 ， 从健 康的草鱼 肠道中分离出 ３ Ｏ株细菌 ， 对其进行 了革兰氏染色鉴定和产消化酶能力分析 。结果表 明： 中有 ６株为革兰 氏阳性菌 ， 其 ２ ４株为革兰 氏阴性菌 ， ４ ．７ 有 ６ ６ ％的菌株 能分泌蛋 白酶，３ ３ ％的菌株 能分泌脂肪酶 ，０ ０ ％ 的菌株能分泌淀粉酶 ， ４ ．３ ４ ．ｏ １．７ ６ ６ ％的菌株能分泌纤维素酶 ， 其中产 ４种酶的有 ３株， ３种酶的有 ３株 ， ２种酶的有 ６株 ， １ 产 产 产 种酶的有 １ ， ４株 不产酶的仅有 ４株 ， 产酶菌株的 比例 高达 ８ ．７ ６６ ％。
一
３０ 一 ３
江 苏 农 业科 学
２１ ００年第 ５期
黄玉柳．草鱼肠道细菌产消化酶能力的初步研 究『］ Ｊ ．江苏农业科学， １ （ ）３０— ３ ２ ０ ５ ：３ ３ ２ ０
草鱼肠 道 细菌产 消化酶 能力 的初 步研究
黄 玉柳
（ 西 水 产研 究 所 ， 西南 宁 ５ ０２ ） 广 广 ３０ １
其 是 难 分 解 成 分 纤 维 素 ， 放 出可 被 草 鱼 吸 收 的 营 养 成 分 。 释
肠道中这类微生物的存在和活动 ， 能促进草鱼的生长 ， 缩短草
鱼养 殖 的生 长 周期 。 微 生态 制 剂是 指 应 用动 物 体 内外 正 常 的有 益微 生 物经 特 殊 工 艺 而制 成 的 活 菌 制 剂 … 。它 通 过 改 变 动 物 胃 肠 道 微 生
将保存的菌株点接在预先准备好 的４种产酶菌筛选平板
上， ２ 在 ８℃培 养 箱 中培 养 适 当 的时 间后 观 察 ， 于 有 水 解 现 对
和陆生岸草 ， 它不仅食量大而且消化能力强 ， 日可消耗等于 每 自身体重 ２ ％的草料 。草鱼虽食草 ， ０ 但不完全 依赖草 ， 对动 物性饵料也不拒绝。研究草鱼的肠道菌群对于其养殖有重要
成原液。然后进行 ｌ ０倍系列稀释 ， 中 ３ 取其 个适宜的稀 释度 各 ０ １ｍ ． Ｌ于 Ｆ ＷＡ（ 酸 镁 ０ ０ ， 肉 膏 ２ ５ ， 化 钠 硫 ．５ ｇ 牛 ．０ ｇ 氯
取 健康 草 鱼肠 道 ， 菌 水 冲洗 数 次后 ， 确称 取 １ｇ肠 道 无 准 放入 组 织 匀浆 器 中 ， ９ｍＬ０ ８ ％ 的 无 菌 生 理 盐 水 匀 浆 ， 加 ．５ 制
选用酪蛋 白作为底物 ， 菌落长出之后 ， 若菌落四周出现透
明 的水 解 圈 ， 明该 菌 株 能 产 生 蛋 白酶 水 解 培 养 基 中的 酪 蛋 说
如 下 ， 蛋 白酶 菌 株 培 养 基 ： 产 酪蛋 白 １．０ｇ 酵 母 膏 １０ ， ０ ０ ， ．０ ｇ 琼脂 １ ．０ｇ蒸 馏 水 １ ０ Ｌ ｐ ５０ ， ０ｍ ，Ｈ值 为 ７２ ； 肪 酶 菌株 ０ ． 产脂
培养 基 ； 蛋 白胨 ５ Ｏ ， 母 粉 １ Ｏ ， 化 钙 ０ １ ｇ 胰 ．Ｏｇ 酵 ．０ｇ 氯 ． ， Ｔ ｅｎ０为 １ ｍ ， 脂 ｌ．０ｇ 蒸 馏 水 为 １００ｍ ，Ｈ 值 ｗ ｅ８ ０ｃ 琼 ５ ０ ， ０ Ｌ ｐ
为 ７２ ； ． 产纤维素酶菌株培养基 ： Ｍ ． ８ｇ磷 酸氢二钾 Ｃ Ｃ １ ８ ， ０５ ， 酸 镁 ０ ２ ， 果 红 ０ ２ ， 胶 ２ ０ ， 脂 ．０ｇ 硫 ．５ｇ 刚 ．０ｇ 明 ． ０ｇ 琼
１．０ｇ 蒸 馏水 １００ｍ ，Ｈ值 为 ７ ２ 。 ５ ０ ， ０ Ｌ ｐ ． ２ 结 果 与分 析