园艺植物生物技术
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酸铵从1650mg.L-1升至4950g.L-1,磷酸二氢钾从 170 mg.L-1升至510 mg.L-1,成为一个极高盐的配 方。 归入此类的配方还有BL,BM,ER和MT等。
高KNO3型培养基
对于喜钾、喜硝或忌铵的外植体材料而言,选用此类培养
基是比较适宜的,此类配方有B5(1968)和N6(1974),
用。
低盐型培养基
特点:无机盐浓度低,适用于生根培养、成熟胚胎培 养或种质材料的保存,包括White (1943),改良 White(1963),HB(1963),WS(1966)和Knop(1965) 等,其中Knop(1965)仅包括4种成分,可用作水培
的培养液,改良White(1963)则比较多用于木本植
B5的特点是铵盐较低,盐酸硫胺素较高,对枇杷胚状体 的诱导效果较佳。
N6 由我国的朱至清等发明,高硝酸铵,不含钼,特别适 用于禾谷类作物的花药培养,曾获国家发明二等奖,在国 内外都有广泛的使用。
中盐型培养基
中盐型培养基包括H(1967),Nitsch(1969)和 Miller(1963)等,在离体培养中也有广泛的应
培养基的选择
一、培养基的种类及组成
在植物组织培养发展进程中,研究者们根据不同的研究目的和培
养物对营养的需求,开发了数十种组分各异的培养基配方。根据不同
的植物和培养部位及不同的培养目的需选用不同的培养基。 培养基的产生最早是Sacks(1680)和Knop(1681),他们对绿色植 物的成分进行了分析研究,根据植物从土中主要是吸收无机盐营养, 设计出了由无机盐组成的 Sacks和Knop溶液,至今仍在作为基本的无 机盐培养基得到广泛应用。 White培养基在20世纪40年代用得较多,现在还常用。
其它复杂有机附加物,包括有些成分尚不完全清楚的天 然提取物(附加物),如椰乳、香蕉汁、番茄汁、酵母
提取物、麦芽膏等。
在培养基中添加植物生长调节物
在培养基的各成分中,生长调节物质是离体培养中最关键 的物质,其用量虽然很少,但对外植体的脱分化和分化起 着决定性的作用。它能以极微小的量影响到植物的细胞分 化、分裂、发育,影响到植物的形态建成、开花、结实、 成熟、脱落、衰老和休眠以及萌发等生理生化活动。 以生长素类和细胞分裂素类最为常用。
20世纪60和70年代则大多采用MS等高浓度培养基,可以保证培养 材料对营养的需要,并生长快、分化快,且由于浓度高,在配制、消 毒过程中某些成分有些出入,也不致影响培养基的离子平衡。
培养基的命名:
对于培养基的命名,一般采用“发明人+发 表年份”或“培养基代号+发表年份”表示。 例如:Murashige和Skoog(1962)培养基(简称MS 培养基),也有对某些成分进行改良称作改良培养 基。
们的活性强弱为:2,4-D>NAA>IBA>IAA。
(2) 细胞分裂素类
在培养基中添加细胞分裂素的作用: ① 促进细胞分裂与扩大; ② 抑制根的分化,诱导芽的分化,促进侧芽的萌发与生长; ③ 增强蛋白质的合成,抑制衰老;
④ 能够改变其它激素的作用。
因此,细胞分裂素多用于诱导不定芽的分化和茎、苗的
增殖,而在生根培养时Leabharlann Baidu用较少或用量较低。
(1) 生长素类
生长素类的作用是促进细胞伸长(主要)和分裂(次要)、诱
导受伤组织的表面细胞恢复分裂能力(愈伤组织)、促进胚 状体的分化和试管苗生根等。另外,生长素与细胞分裂素 配合使用,还能诱导腋芽及不定芽的发生。 常用的生长素有2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸)、NAA(萘乙
酸,分α和β型 )、IBA(吲哚丁酸)和IAA(吲哚乙酸)等,它
二、几类常用培养基的特性
植物培养基种类繁多,因成分(主要是无机盐水平)不同, 可以大体划分成几类,分别适用于不同的培养目标。
高盐型培养基
高KNO3型培养基 中盐型培养基 低盐型培养基
高盐型培养基
MS是最广泛使用的培养基。它是1962年由Murashige和 Skoog为培养烟草细胞而设计的。 特点:无机盐和离子浓度较高,养分齐全,铵态氮和硝态氮 含量高,比例比较适合,离子平衡较好,使用误差较小, 为较稳定的平衡溶液,能满足植物组织对矿质营养的要求,
物。 低盐培养基的另一种来源方式,是在高盐或中盐 配方上进行减量,如1/2 MS,1/3 MS和1/4 MS等。
培养基可以按不同的分类标准进行分类:
依据培养基形态的不同,可分为固体培养基和液体培养基 固体培养基因加有固化剂(如琼脂或卡拉胶)而呈固体 状态;液体培养基不加固化剂,培养基为液体状态。 两类培养基的操作技术和使用目的差别较大。
固体培养基与液体培养基相比:
优点:操作简便,通气问题易于解决,便于经常观察研究 等。 缺点:培养物与培养基的接触(即吸收)面积小,各种养分 在琼脂中扩散较慢,影响养分的充分利用,同时培养物排 出的一些代谢废物,聚集在吸收表面,对组织产生毒害作 用。
依据培养基中是否加有生长调节物质和附加物质,则可
将培养基分为基本培养基和完全培养基
基本培养基:只含有无机营养物(包括大量元素和微量 元素)、维生素、氨基酸、碳水化合物和水; 完全培养基:是在基本培养基的基础上,根据各种不同 试验要求,附加一些物质,如各种植物生长调节剂:BA、
ZT、KT、2-iP、2,4-D、NAA、IAA、IBA、GA3等,以及
利于愈伤组织的诱导和增殖,特别适用于高需肥量植物种
类或生长迅速的培养材料。它的硝酸盐含量较其他培养基 为高,广泛地用于植物的器官、花药、细胞和原生质体培
养,效果良好。
与MS较为接近的配方,还有LS(1965)和RM
(1964),它们的基本成分均同于MS,但LS培养基
去掉了甘氨酸、烟酸和盐酸吡多醇,后者则把硝
高KNO3型培养基
对于喜钾、喜硝或忌铵的外植体材料而言,选用此类培养
基是比较适宜的,此类配方有B5(1968)和N6(1974),
用。
低盐型培养基
特点:无机盐浓度低,适用于生根培养、成熟胚胎培 养或种质材料的保存,包括White (1943),改良 White(1963),HB(1963),WS(1966)和Knop(1965) 等,其中Knop(1965)仅包括4种成分,可用作水培
的培养液,改良White(1963)则比较多用于木本植
B5的特点是铵盐较低,盐酸硫胺素较高,对枇杷胚状体 的诱导效果较佳。
N6 由我国的朱至清等发明,高硝酸铵,不含钼,特别适 用于禾谷类作物的花药培养,曾获国家发明二等奖,在国 内外都有广泛的使用。
中盐型培养基
中盐型培养基包括H(1967),Nitsch(1969)和 Miller(1963)等,在离体培养中也有广泛的应
培养基的选择
一、培养基的种类及组成
在植物组织培养发展进程中,研究者们根据不同的研究目的和培
养物对营养的需求,开发了数十种组分各异的培养基配方。根据不同
的植物和培养部位及不同的培养目的需选用不同的培养基。 培养基的产生最早是Sacks(1680)和Knop(1681),他们对绿色植 物的成分进行了分析研究,根据植物从土中主要是吸收无机盐营养, 设计出了由无机盐组成的 Sacks和Knop溶液,至今仍在作为基本的无 机盐培养基得到广泛应用。 White培养基在20世纪40年代用得较多,现在还常用。
其它复杂有机附加物,包括有些成分尚不完全清楚的天 然提取物(附加物),如椰乳、香蕉汁、番茄汁、酵母
提取物、麦芽膏等。
在培养基中添加植物生长调节物
在培养基的各成分中,生长调节物质是离体培养中最关键 的物质,其用量虽然很少,但对外植体的脱分化和分化起 着决定性的作用。它能以极微小的量影响到植物的细胞分 化、分裂、发育,影响到植物的形态建成、开花、结实、 成熟、脱落、衰老和休眠以及萌发等生理生化活动。 以生长素类和细胞分裂素类最为常用。
20世纪60和70年代则大多采用MS等高浓度培养基,可以保证培养 材料对营养的需要,并生长快、分化快,且由于浓度高,在配制、消 毒过程中某些成分有些出入,也不致影响培养基的离子平衡。
培养基的命名:
对于培养基的命名,一般采用“发明人+发 表年份”或“培养基代号+发表年份”表示。 例如:Murashige和Skoog(1962)培养基(简称MS 培养基),也有对某些成分进行改良称作改良培养 基。
们的活性强弱为:2,4-D>NAA>IBA>IAA。
(2) 细胞分裂素类
在培养基中添加细胞分裂素的作用: ① 促进细胞分裂与扩大; ② 抑制根的分化,诱导芽的分化,促进侧芽的萌发与生长; ③ 增强蛋白质的合成,抑制衰老;
④ 能够改变其它激素的作用。
因此,细胞分裂素多用于诱导不定芽的分化和茎、苗的
增殖,而在生根培养时Leabharlann Baidu用较少或用量较低。
(1) 生长素类
生长素类的作用是促进细胞伸长(主要)和分裂(次要)、诱
导受伤组织的表面细胞恢复分裂能力(愈伤组织)、促进胚 状体的分化和试管苗生根等。另外,生长素与细胞分裂素 配合使用,还能诱导腋芽及不定芽的发生。 常用的生长素有2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸)、NAA(萘乙
酸,分α和β型 )、IBA(吲哚丁酸)和IAA(吲哚乙酸)等,它
二、几类常用培养基的特性
植物培养基种类繁多,因成分(主要是无机盐水平)不同, 可以大体划分成几类,分别适用于不同的培养目标。
高盐型培养基
高KNO3型培养基 中盐型培养基 低盐型培养基
高盐型培养基
MS是最广泛使用的培养基。它是1962年由Murashige和 Skoog为培养烟草细胞而设计的。 特点:无机盐和离子浓度较高,养分齐全,铵态氮和硝态氮 含量高,比例比较适合,离子平衡较好,使用误差较小, 为较稳定的平衡溶液,能满足植物组织对矿质营养的要求,
物。 低盐培养基的另一种来源方式,是在高盐或中盐 配方上进行减量,如1/2 MS,1/3 MS和1/4 MS等。
培养基可以按不同的分类标准进行分类:
依据培养基形态的不同,可分为固体培养基和液体培养基 固体培养基因加有固化剂(如琼脂或卡拉胶)而呈固体 状态;液体培养基不加固化剂,培养基为液体状态。 两类培养基的操作技术和使用目的差别较大。
固体培养基与液体培养基相比:
优点:操作简便,通气问题易于解决,便于经常观察研究 等。 缺点:培养物与培养基的接触(即吸收)面积小,各种养分 在琼脂中扩散较慢,影响养分的充分利用,同时培养物排 出的一些代谢废物,聚集在吸收表面,对组织产生毒害作 用。
依据培养基中是否加有生长调节物质和附加物质,则可
将培养基分为基本培养基和完全培养基
基本培养基:只含有无机营养物(包括大量元素和微量 元素)、维生素、氨基酸、碳水化合物和水; 完全培养基:是在基本培养基的基础上,根据各种不同 试验要求,附加一些物质,如各种植物生长调节剂:BA、
ZT、KT、2-iP、2,4-D、NAA、IAA、IBA、GA3等,以及
利于愈伤组织的诱导和增殖,特别适用于高需肥量植物种
类或生长迅速的培养材料。它的硝酸盐含量较其他培养基 为高,广泛地用于植物的器官、花药、细胞和原生质体培
养,效果良好。
与MS较为接近的配方,还有LS(1965)和RM
(1964),它们的基本成分均同于MS,但LS培养基
去掉了甘氨酸、烟酸和盐酸吡多醇,后者则把硝