园艺植物生物技术

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们的活性强弱为:2,4-D>NAA>IBA>IAA。
(2) 细胞分裂素类
在培养基中添加细胞分裂素的作用: ① 促进细胞分裂与扩大; ② 抑制根的分化,诱导芽的分化,促进侧芽的萌发与生长; ③ 增强蛋白质的合成,抑制衰老;
④ 能够改变其它激素的作用。
因此,细胞分裂素多用于诱导不定芽的分化和茎、苗的
增殖,而在生根培养时使用较少或用量较低。
利于愈伤组织的诱导和增殖,特别适用于高需肥量植物种
类或生长迅速的培养材料。它的硝酸盐含量较其他培养基 为高,广泛地用于植物的器官、花药、细胞和原生质体培
养,效果良好。
与MS较为接近的配方,还有LS(1965)和RM
(1964),它们的基本成分均同于MS,但LS培养基
去掉了甘氨酸、烟酸和盐酸吡多醇,后者则把硝
依据培养基中是否加有生长调节物质和附加物质,则可
将培养基分为基本培养基和完全培养基
基本培养基:只含有无机营养物(包括大量元素和微量 元素)、维生素、氨基酸、碳水化合物和水; 完全培养基:是在基本培养基的基础上,根据各种不同 试验要求,附加一些物质,如各种植物生长调节剂:BA、
ZT、KT、2-iP、2,4-D、NAA、IAA、IBA、GA3等,以及
培养基的选择
一、培养基的种类及组成
在植物组织培养发展进程中,研究者们根据不同的研究目的和培
养物对营养的需求,开发了数十种组分各异的培养基配方。根据不同
的植物和培养部位及不同的培养目的需选用不同的培养基。 培养基的产生最早是Sacks(1680)和Knop(1681),他们对绿色植 物的成分进行了分析研究,根据植物从土中主要是吸收无机盐营养, 设计出了由无机盐组成的 Sacks和Knop溶液,至今仍在作为基本的无 机盐培养基得到广泛应用。 White培养基在20世纪40年代用得较多,现在还常用。
20世纪60和70年代则大多采用MS等高浓度培养基,可以保证培养 材料对营养的需要,并生长快、分化快,且由于浓度高,在配制、消 毒过程中某些成分有些出入,也不致影响培养基的离子平衡。
培养基的命名:
对于培养基的命名,一般采用“发明人+发 表年份”或“培养基代号+发表年份”表示。 例如:Murashige和Skoog(1962)培养基(简称MS 培养基),也有对某些成分进行改良称作改良培养 基。
物。 低盐培养基的另一种来源方式,是在高盐或中盐 配方上进行减量,如1/2 MS,1/3 MS和1/4 MS等。
其它复杂有机附加物,包括有些成分尚不完全清楚的天 然提取物(附加物),如椰乳、香蕉汁、番茄汁、酵母
提取物、麦芽膏等。
在培养基中添加植物生长调节物
在培养基的各成分中,生长调节物质是离体培养中最关键 的物质,其用量虽然很少,但对外植体的脱分化和分化起 着决定性的作用。它能以极微小的量影响到植物的细胞分 化、分裂、发育,影响到植物的形态建成、开花、结实、 成熟、脱落、衰老和休眠以及萌发等生理生化活动。 以生长素类和细胞分裂素类最为常用。
B5的特点是铵盐较低,盐酸硫胺素较高,对枇杷胚状体 的诱导效果较佳。
N6 由我国的朱至清等发明,高硝酸铵,不含钼,特别适 用于禾谷类作物的花药培养,曾获国家发明二等奖,在国 内外都有广泛的使用。
中盐型培养基
中盐型培养基包括H(1967),Nitsch(1969)和 Miller(1963)等,在离体培养中也有广泛的应
酸铵从1650mg.L-1升至4950g.L-1,磷酸二氢钾从 170 mg.L-1升至510 mg.L-1,成为一个极高盐的配 方。 归入此类的配方还有BL,BM,ER和MT等。
高KNO3型培养基
对于喜钾、喜硝或忌铵的外植体材料而言,选用此类培养
基是比较适宜的,此类配方有B5(1968)和N6(1974),
培养基可以按不同的分类标准进行分类:
依据培养基形态的不同,可分为固体培养基和液体培养基 固体培养基因加有固化剂(如琼脂或卡拉胶)而呈固体 状态;液体培养基不加固化剂,培养基为液体状态。 两类培养基的操作技术和使用目的差别较大。
固体培养基与液体培养基相比:
优点:操作简便,通气问题易于解决,便于经常观察研究 等。 缺点:培养物与培养基的接触(即吸收)面积小,各种养分 在琼脂中扩散较慢,影响养分的充分利用,同时培养物排 出的一些代谢废物,聚集在吸收表面,对组织产生毒害作 用。
二、几类常用培养基的特性
植物培养基种类繁多,因成分(主要是无机盐水平)不同, 可以大体划分成几类,分别适用于不同的培养目标。
高盐型培养基
高KNO3型培养基 中盐型培养基 低盐型培养基
高盐型培养基
MS是最广泛使用的培养基。它是1962年由Murashige和 Skoog为培养烟草细胞而设计的。 特点:无机盐和离子浓度较高,养分齐全,铵态氮和硝态氮 含量高,比例比较适合,离子平衡较好,使用误差较小, 为较稳定的平衡溶液,能满足植物组织对矿质营养的要求,
பைடு நூலகம்
用。
低盐型培养基
特点:无机盐浓度低,适用于生根培养、成熟胚胎培 养或种质材料的保存,包括White (1943),改良 White(1963),HB(1963),WS(1966)和Knop(1965) 等,其中Knop(1965)仅包括4种成分,可用作水培
的培养液,改良White(1963)则比较多用于木本植
(1) 生长素类
生长素类的作用是促进细胞伸长(主要)和分裂(次要)、诱
导受伤组织的表面细胞恢复分裂能力(愈伤组织)、促进胚 状体的分化和试管苗生根等。另外,生长素与细胞分裂素 配合使用,还能诱导腋芽及不定芽的发生。 常用的生长素有2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸)、NAA(萘乙
酸,分α和β型 )、IBA(吲哚丁酸)和IAA(吲哚乙酸)等,它
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