电离辐射防护与辐射源安全基本标准

关于药学院同位素实验室申请豁免的报告

设备处：

因科研工作需要，我院需要建立一个同位素实验室，用于放射性同位素的相关实验研究。

我院结构生物学实验室的重要课题——《基于结构的PDE抑制剂设计和研究》受到国家自然科学基金（面上项目）、中国博士后基金（面上项目和特别资助）及广东省自然科学基金（面上项目）的资助，该实验将继续进行至少3

年的时间，主要使用3H标记的cAMP或cGMP作为示踪底物测定环核苷酸磷酸二酯酶PDE酶活性。另外，我院药理毒理学、药物化学等学科也需要迫切需要使用放射性同位素3H进行科学研究。

基于上述目的，目前我院已经购买了一台PerkinElmer Tri-Carb2910TR液体闪烁分析仪，以方便开展同位素实验。该仪器目前由药学院中心实验室管理，可对外开放，校内外各单位老师都可在仪器负责人的监管下，在符合国家相关法律法规规定的情况下使用。根据我们的预期，拟建立的同位素实验室将采用一般湿式操作进行实验。预计放射性核素的最大等效日操作量低于2×107Bq，最大等效年操作量低于1010Bq。

目前，根据国家《电离辐射防护与辐射源安全基本标准》中规定的第三类丙级实验室场所的卫生防护要求，我院已在药学院大楼顶层东侧一间实验室进行了室内表面装修、通风系统的改造及购置了如辐射监测仪等相关配套设备；工作人员已经接受了由广东省环境保护局举办的辐射安全培训班的培训，取得了辐射工作安全许可证；对于放射性试剂的购买、使用及放射性废物的处理，我们也将遵循环保部门和中山大学的相关规定严格执行。

鉴于我们拟使用的同位素活度较低，且是在组织良好、人员训练有素的实验室进行医学研究，因此特申请豁免。

望批准。谢谢！

附件：PDE活性测定方法

PDE活性测定方法

1. 2 μL 0.20 μM 氚代底物3H-cAMP或者3H-cGMP（Sigma-Aldrich，USA，

20000-30000 cpm/assay）用Assay Buffer1（组成20 mM Tris·HCl，10 mM MgCl2，1 mM DTT，pH值为7.5）或者Assay Buffer2（组成20 mM Tris·HCl，

4 mM MnCl2，1 mM DTT，pH值为7.5）稀释至60 μL。

2.加入40 μL已用Assay Buffer1或者Assay Buffer2稀释的蛋白质缓冲液。

3.混合液在25℃下静置反应15 min。

4.依次加入200 μL 0.2 M ZnSO4和200 μL 0.2 M Ba(OH)2溶液，振荡混合。

5.将混合物离心（14000 rpm，5 min）。

6.取上清液430 μL加入3.5mL Liquid Scintillation Cocktails（ScintiSafe

PlusTM 50％，Fisher Scientific，USA）

7.振荡混合后用PE Tricarb2910计数器测量混合物。

8.cAMP水解率控制在20-35％。

关于测定的说明：

1．所有反应均在25℃下进行。

2．所有容器均为一次性用品，无需洗涤。用完后按有无放射性分类收集。对有放射性的废物，按固体、液体分别收集。无放射性污水从下水道排出。3．放射性操作均在指定位置进行，每次完成实验后需测定各操作位置的辐射情况，并记录。

4．操作应小心谨慎。若不慎有放射性溶液溅出，需采用吸水纸擦拭，直至监测到的残留辐射强度降至正常控制值以下。