不同固定液对冷冻组织病理切片HE染色质量比较

不同固定液对冷冻组织病理切片HE染色质量比较

发表时间：2019-12-12T12:59:46.697Z 来源：《医药前沿》2019年32期作者：黄荣

[导读] 结论：新型的环保固定液的冷冻组织病理切片HE染色质量与常规固定液无较大差异，但图像清晰度较高。

（海门市第四人民医院江苏海门 226141）

【摘要】目的：探讨不同固定液对冷冻组织病理切片HE染色的质量。方法：选取我院2016年1月—2018年12月检测的280例冷冻组织病理切片，随机分成对照组和观察组各140例。对照组用常规固定液做HE染色，观察组用新型固定液做HE染色，比较两组冷冻组织病理切片HE染色质量。结果：相较于对照组的HE染色质量，观察组的色彩、对比度和渗透力以及图像呈现速度比较无显著差异（P＞0.05）；但观察组的HE染色图像清晰度与对照组比较有差异，I级率和Ⅱ级率均比对照组高，差异显著（P＜0.05）。结论：新型的环保固定液的冷冻组织病理切片HE染色质量与常规固定液无较大差异，但图像清晰度较高。

【关键词】冷冻组织病理切片；不同固定液；HE染色质量

【中图分类号】R446.8 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2019）32-0228-02

近年临床上可使用的固定液较多，但均存在一定的局限性，同时HE染色的质量也存在不同，故而本次研究中采用不同固定液对280例冷冻组织病理切片做HE染色，旨在比较其HE染色质量以及相关情况。

1.资料与方法

1.1 一般资料

选择的280例组织主要源自甲状腺和胃、乳腺以及肠、肺、脑、子宫、平滑肌等，均是患者活检、术后遗留的组织；资料源自我院2016年1月—2018年12月检测的280例冷冻组织病理切片，随机将280例对象分成对照组和观察组各140例：对照组男性患者83例和女性患者57例，年龄19～63岁、平均（35.8±5.6）岁；观察组男性患者81例和女性患者59例，年龄21～62岁、平均（35.2±5.4）岁。两组一般资料比较无差异，P＞0.05，有可比性。

1.2 方法

对照组：常规试剂采用的是二甲苯和无水乙醇、分化液、含汞苏木素以及伊红等，HE染色根据规定步骤进行。

观察组：新型试剂采用的是环保试剂，把140例患者的病理组织切片后，将其用无苯切片脱蜡液I和Ⅱ各处理5min，随后再用Ⅲ号脱蜡液将其处理10min；采用无水乙醇I将其处理1min，并用Ⅱ号再处理1min，随后以95%和85%的乙醇将其处理10s；将病理组织放在自来水龙头下将其缓流清洗1min，之后采用苏木素稳定剂将其再处理30s，再者是用苏木素染色液将其处理9min，用自来水将其再进行缓流冲洗1min；随即用0.5%分化液将其处理2s，并再次用自来水缓流清洗1min；再用返蓝染色液将其处理5s，并用自来水对其缓流清洗1min；用伊红染色液将其处理2min，再用自来水缓流清洗5s；以85%的乙醇将其处理5s，并用95%的乙醇将其再处理10s；随后再用无水乙醇I和Ⅱ对标本各处理10s；随后再用无苯切片透明液I对其进行20s的处理，Ⅱ号液体再处理1min，Ⅲ号液体再处理2min；上述各项操作完成后则将标本湿封。

1.3 观察指标和评价标准

选取的280例患者病理组织标本均采用LED型光学显微镜进行观察，用MRNN型高清数字显微镜相机对CCD图像进行采集，观察病理组织的色彩颜色及其渗透性、对比度和组织结构等情况。HE染色质量等级划分标准参照[1]。

1.4 统计学方法

统计学软件选择SPSS24.0，性别占比和HE染色I级、Ⅱ级以及Ⅲ级资料用（%）表示，行χ2检验；年龄资料用（x-±s）表示，行t检验；P＜0.05时，表示差异有统计学意义。

2.结果

相较于对照组的HE染色质量，观察组的色彩、对比度和渗透力以及图像呈现速度比较无差异（P＞0.05）；但观察组的HE染色图像清晰度与对照组比较有差异，I级率和Ⅱ级率均比对照组高，差异显著（P＜0.05）。

表两组冷冻组织病理切片HE染色质量比较（例）

3.讨论

冷冻切片的质量与切片的固定有关，常用的固定液中主要含有乙醇、贡等物质，乙醇虽然能够去除切片上的水分，对切片的组织结构保存有效，但会导致组织切片中的球蛋白和白蛋白等物质沉淀，这时核蛋白沉淀并会溶解在水中，造成着色异常或者不佳；贡会对人体组

织造成较大的破坏，极易造成切片组织出现黄色的氧化汞，从而影响组织病理诊断[2]。

本次采用的新型环保固定液中不含汞，切片组织可以在短时间内着色，进行分化后则用流水冲洗，促使组织切片快速返蓝，缩短了组织着色时间。由于是采用无汞固定液，病理组织不会被破坏，固定液的稳定性得到加强，消除了常规固定液的一些不足，确保了病理组织的着色质量，同时新试剂更换时无需再做相关处理。固定液的改良，使得其中的有害物质均被分离，不会出现大量挥发或者生物降解的问题，亦不会造成病理组织标本异常收缩，可以获得色彩良好且对比度佳的图像[3]。

综上所述，新型试剂HR染色色彩对比度和渗透力以及图像呈现速度与常规试剂无较大差异，但其染色图像清晰度较高，这对病理组织的快速诊断有着积极作用。

【参考文献】

[1]陈杰，常秀青.质量永远是病理诊断的生命线[J].中华病理学杂志，2016，45(1):1.

[2]周君，谢明，彭茜茜，等.4种固定液对快速冷冻切片的制片效果的影响[J].中国医学工程，2016，24(9):32-33.

[3]林红.GS环保固定与传统固定染色在冷冻切片中应用[J].中国医药科学，2014，4(20):139-141.