测定黄芩中黄芩苷的定性和定量方法
黄芩有效成分的含量测定技术
黄芩有效成分的含量测定技术【摘要】黄芩是一种常用的中药材，含有多种有效成分，如黄芩素、栀子苷等。
为了准确测定黄芩中有效成分的含量，科研人员使用了多种技术，包括色谱法、质谱法、光谱法、比色法和电化学法。
通过这些方法，可以对黄芩有效成分的含量进行精确测定，为药材质量评价和药效研究提供重要依据。
这些技术各有优缺点，可以相互补充。
综合研究表明，黄芩有效成分的含量测定技术仍在不断深入研究和完善，为中药研究和开发提供了有力支持。
通过不断探索和创新，将为黄芩的应用和开发提供更多可能性。
【关键词】黄芩、有效成分、含量测定技术、色谱法、质谱法、光谱法、比色法、电化学法、研究。
1. 引言1.1 黄芩有效成分的含量测定技术概述黄芩是一种常见的中药材，其有效成分含量对于其药效起到关键作用。
准确测定黄芩有效成分的含量技术显得尤为重要。
目前，常用的技术包括色谱法、质谱法、光谱法、比色法和电化学法等。
这些技术各有优势和局限性，需要根据实际情况选择合适的方法进行测定。
色谱法是一种常用的测定有效成分含量的技术，通过色谱柱将样品中的成分分离并进行定量分析。
质谱法则是通过测量样品中成分的质量/电荷比来进行分析，具有高灵敏度和高准确性的优点。
光谱法则是通过样品在特定波长下的吸光度来测定有效成分的含量，适用于不同类型的化合物。
比色法则是通过样品的吸光度和已知浓度的标准溶液进行比较，从而得出有效成分的含量。
电化学法是通过测定样品在电化学反应中的电流变化来测定有效成分的含量，具有速度快、灵敏度高的特点。
黄芩有效成分的含量测定技术在不断深入研究中，各种方法的优缺点需要结合具体情况选择合适的技术进行分析，以确保测定结果的准确性和可靠性。
2. 正文2.1 色谱法测定黄芩有效成分含量色谱法是一种常用的分析技术，广泛应用于药物含量测定领域。
在测定黄芩有效成分含量中，色谱法也是一种重要的方法之一。
色谱法主要包括气相色谱法和液相色谱法。
气相色谱法适用于易挥发性和热稳定性较好的物质，而液相色谱法适用于水溶性和热不稳定性较强的物质。
黄芩含量实验报告
一、实验目的1. 学习掌握黄芩中黄芩苷的提取和测定方法。
2. 掌握高效液相色谱（HPLC）技术的基本操作。
3. 通过实验，了解黄芩苷在黄芩中的含量，为黄芩的质量控制和药效评价提供依据。
二、实验原理黄芩苷（Baicalin）是黄芩的主要有效成分，具有抗菌、抗炎、抗氧化等多种生物活性。
本实验采用高效液相色谱法（HPLC）测定黄芩中黄芩苷的含量。
HPLC法是一种高效、灵敏、准确的分离分析方法，适用于中药有效成分的含量测定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：黄芩药材（市售）、甲醇、乙腈、水（均符合色谱分析要求）、黄芩苷标准品。
2. 仪器：高效液相色谱仪、紫外检测器、色谱柱、超声波清洗器、电子天平、移液器、样品处理装置等。
四、实验方法1. 样品制备（1）称取黄芩药材粉末约1.0g，置于100ml具塞锥形瓶中。
（2）加入甲醇50ml，超声提取30分钟。
（3）过滤，滤液于60℃水浴中浓缩至近干。
（4）加入水5ml，溶解残渣，转移至10ml容量瓶中，定容至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
2. 标准曲线制备（1）精密称取黄芩苷标准品10.0mg，置于100ml容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，得100μg/ml的标准溶液。
（2）分别取标准溶液0.5ml、1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml，置于10ml容量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，得浓度分别为5μg/ml、10μg/ml、15μg/ml、20μg/ml、25μg/ml的标准溶液。
（3）分别取上述标准溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，测定峰面积，以浓度C 为横坐标，峰面积A为纵坐标，绘制标准曲线。
3. 供试品溶液测定（1）分别取供试品溶液和标准溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，测定峰面积。
（2）根据标准曲线，计算供试品溶液中黄芩苷的含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线线性关系良好，线性范围为5μg/ml～25μg/ml，相关系数R²=0.999。
不同制剂中的黄芩苷含量测定方法与应用
不同制剂中的黄芩苷含量测定方法与应用（作者:___________单位: ___________邮编: ___________）【关键词】黄芩黄芩苷化学分析含量测定黄芩苷具有抗菌消炎、降压利尿等作用，是中药黄芩的主要有效成分之一。
黄芩苷几乎不溶于水、乙醚、苯、氯仿，难溶于甲醇、乙醇、丙酮，微溶于热冰乙酸、碳酸氢钠，易溶于N，N二甲基甲酸胺、吡咯。
本文仅就不同制剂中黄芩苷含量测定方法与应用，介绍如下。
1 方法与应用陶涛等［1］用薄层紫外分光光度法测定双解口服液中黄芩苷的含量，用硅胶H作固定相，乙酸乙酯—丁酮—甲酸—水(5∶3∶1∶1)为展开剂，样品液直接点样，刮下斑点后用50%乙醇洗脱，同时做空白，在岛津UV2100，278 nm处测定其吸收度，标准曲线为Y=18.871X+0.437(r=0.9999)，平均回收率为98.2%。
该方法受主观因素影响较多，容易造成较大误差，重复性差已较少使用。
孟蕾蕾［2］用双波长紫外分光光度法测定小儿安金丸中黄芩苷含量，在以光束紫外可见分光光度计TU1901下测定,参比波长为250 nm，测定波长为278 nm，平均回收率为99.80%,RSD=1.23%，方法可靠。
颜耀东等［3］采用双波长薄层扫描法测定牛黄清胃丸中黄芩苷的含量，样品用甲醇提取，在聚酰胺板上用醋酸—乙醇(6∶1)，2次展开分离后,在岛津CS930双波长薄层扫描仪中以LR=280 nm，XS=207 nm进行扫描测定，平均回收率为98.19%,RSD=1.47%。
应用该方法测定牛黄清胃丸中黄芩苷含量，分离效果好，结果准确。
卢劲伟［4］采用双波长薄层扫描法对凉膈散中黄芩苷含量进行测定,样品用50%乙醇提取,在聚酸胺薄膜上用30%醋酸展开,在岛津CS930双波长薄层扫描仪中以测定波长KS=282 nm;参比波长KR=360 nm,平均回收率为98.9%,RSD=1.03%。
本法对黄芩苷分离效果好,不用特殊处理就可将干扰成分与欲测成分分离，方法简便、灵敏。
黄芩含量测定方法
黄苓含量测定方法（黄苓苷）黄苓为唇形科植物黄苓Scutellaria baicalensis Georgi 的干燥根。
2005版《中国药典》一部采用高效液相色谱法测定其黄苓苷的含量，文献报道的含量测定方法较多，主要有高效液相色谱法、薄层扫描法和紫外分光光度法等。
一、高效液相色谱法2005 版《中国药典》黄苓含量测定项下:色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇水-磷酸（47: 53：0.2 ）为流动相；检测波长为280nm理论板数按黄苓苷峰计算应不得低于2500。
供试品溶液的制备：取本品中粉约0.3g，精密称定，加70聽醇40ml，加热回流3小时，放冷，滤过，滤液置100ml量瓶中，用少量70聽醇分次洗涤容器和残渣，洗液滤入同一量瓶中，加70聽醇至刻度，摇匀。
精密量取1ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。
文献报道的采用HPLC法测定黄苓苷的含量，所用的色谱条件较多，按照常用的流动相系统介绍。
•—%™'KOA :甲醇-水-磷酸系统:①Waters 600 高效液相色谱仪；Shim-pack ODS 38柱（150m材 6.0mm ;流动相为甲醇-0.4%磷酸水溶液（45: 55）;流速1.0ml/min ;检测波长280nm②日本岛津LC-4A高效液相色谱仪；色谱柱：ZORBAX sb-C18（4.6mm x 25cm ）;流动相：甲醇-0.4% 磷酸（1 : 1）;流速 1.0mL/min ;室温25C±2C；检测波长280nm③ waters -600高效液相色谱仪；色谱柱：ODSC18柱（610nm x 150nm）；流动相：磷酸（1 f 146）-乙腈（18 : 7）;流速1ml/min ;检测波长277nm柱温:25C④ Waters 515 高效液相色谱仪；色谱柱：HangBang C18 (200mm< 4.6mm, 5卩m）；流动相：甲醇-水-磷酸（47 : 53 : 0.2）；检测波长280nm流速为1.0mL/0 中国植提论坛|植提网&eJ7W5S NP⑤岛津LC-2010高效液相色谱仪；色谱柱C18反相柱（150mm< 4.6mm）;柱温40C；流动相：甲醇-水-磷酸（47 : 53 : 0.2）;流速1.0ml/min ;检测波长280nm 样品一般用甲醇、流动相、70聽醇超声或回流提取，也有蒸馏水为提取溶剂的植提之家植提间中国植提坛< 提论坛血网QSX” 0%m"MB :甲醇-水-冰醋酸系统:①液相色谱仪（美国光谱物理公司）；色谱柱：DiamonsilTM （钻石）C18反相柱（4.6mm< 250 mm,5卩m）；流动相：甲醇-乙腈-水-冰醋酸（25 : 22：75：1）；柱温室温；流速1.0 ml/min ；检测波长为277nm供试品溶液的制备：咳喘静糖浆用正丁醇5分3次萃取（以PbAC试液检查母液中黄苓苷为负反应），取上层液合并，80C水浴蒸干。
黄芩中黄芩苷的提取与鉴定
黄芩中黄芩苷的提取与鉴定黄芩（Scutellaria baicalensis Georgi）是一种常见的中草药，具有抗炎、抗菌、抗氧化等多种药理活性。
其中，黄芩苷是黄芩中的主要有效成分之一，具有广泛的药理活性和应用价值。
本文将从黄芩苷的提取和鉴定两个方面介绍黄芩苷的相关知识。
黄芩苷的提取是利用黄芩中的有效成分黄酮类化合物进行的。
黄芩干燥根茎部分被研磨成粉末状，然后通过溶剂提取的方法来获得黄芩苷。
常用的溶剂有乙醇、甲醇等。
提取过程中，需要注意溶剂的选择、浸提时间和浸提温度等因素，以保证黄芩苷的高效提取。
提取后的溶液经过过滤、浓缩、结晶等步骤，最终得到黄芩苷的纯品。
黄芩苷的鉴定主要通过理化性质鉴定和分析方法鉴定两个方面进行。
首先是理化性质鉴定，黄芩苷是一种白色或微黄色结晶性粉末，熔点为223-225℃。
它在水中几乎不溶，在乙醇、甲醇和酒精中溶解度较大。
其次是分析方法鉴定，常用的方法有红外光谱法、高效液相色谱法和质谱法等。
红外光谱法可以通过检测黄芩苷的红外吸收峰来确定其结构特征；高效液相色谱法可以用于检测黄芩苷的含量和纯度；质谱法可以通过检测黄芩苷的质荷比和碎片峰来确定其分子结构。
黄芩苷作为黄芩的主要有效成分，具有多种药理活性和应用价值。
研究表明，黄芩苷具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤、抗菌等作用。
它可以通过抑制炎症因子的产生和释放，发挥抗炎作用；通过清除自由基，增强抗氧化能力，发挥抗氧化作用；通过抑制肿瘤细胞的增殖和诱导肿瘤细胞凋亡，发挥抗肿瘤作用；通过抑制细菌的生长和繁殖，发挥抗菌作用。
因此，黄芩苷在药物研发和临床应用方面具有重要的价值和潜力。
黄芩苷作为黄芩中的主要有效成分，是一种具有广泛药理活性和应用价值的化合物。
通过黄芩苷的提取和鉴定，可以获得高纯度的黄芩苷，并进一步研究其药理机制和应用价值。
希望通过对黄芩苷的深入研究，能够为人们的健康带来更多的福祉。
黄芩的实验报告
一、实验目的1. 掌握黄芩提取的有效方法，提高黄芩苷的提取率。
2. 了解黄芩苷的理化性质，鉴定其结构。
3. 探讨黄芩的药理作用及其在中医药中的应用。
二、实验原理黄芩（Scutellaria baicalensis Georgi）为唇形科植物，其根具有清热解毒、凉血止血、泻火解毒等功效。
黄芩苷（baicalin）是黄芩中的主要活性成分，具有抗炎、抗菌、抗氧化等多种生物活性。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：黄芩根、甲醇、乙醇、石油醚、水合氯醛、硅胶、薄层色谱板等。
2. 仪器：超声波提取仪、旋转蒸发仪、高效液相色谱仪、紫外分光光度计、电子天平等。
四、实验方法1. 黄芩苷的提取（1）称取黄芩根粉末，用甲醇进行超声提取，提取时间为30分钟。
（2）将提取液过滤，旋转蒸发去除溶剂，得到黄芩苷粗品。
（3）将黄芩苷粗品用甲醇溶解，转移至容量瓶中，定容至一定体积。
2. 黄芩苷的鉴定（1）采用高效液相色谱法（HPLC）对黄芩苷进行定量分析。
（2）采用紫外分光光度法对黄芩苷进行定性分析。
（3）采用薄层色谱法（TLC）对黄芩苷进行结构鉴定。
3. 黄芩苷的药理活性研究（1）采用细胞实验，研究黄芩苷对炎症细胞的影响。
（2）采用动物实验，研究黄芩苷对动物模型的治疗作用。
五、实验结果与分析1. 黄芩苷的提取通过超声提取法，黄芩苷的提取率可达80%以上。
2. 黄芩苷的鉴定（1）HPLC分析：黄芩苷在HPLC柱上出峰时间为7.6分钟，与标准品峰形一致，表明提取得到的黄芩苷纯度较高。
（2）紫外分光光度法：黄芩苷在274nm处有最大吸收峰，符合黄芩苷的理化性质。
（3）TLC分析：黄芩苷在硅胶板上与标准品呈现相同的斑点，进一步证明提取得到的黄芩苷为黄芩苷。
3. 黄芩苷的药理活性研究（1）细胞实验：黄芩苷对炎症细胞具有抑制作用，表明其具有抗炎作用。
（2）动物实验：黄芩苷对动物模型具有明显的治疗效果，表明其具有抗炎、抗菌、抗氧化等药理作用。
黄芩苷的实验报告
一、实验目的1. 掌握从黄芩中提取黄芩苷的原理和方法。
2. 掌握黄芩苷的鉴定原理和实验操作。
3. 了解黄芩苷含量的测定方法。
二、实验原理黄芩苷（Baicalin）是黄芩（Scutellaria baicalensis）的主要活性成分之一，具有清热解毒、抗炎、抗菌、抗病毒等药理作用。
本实验采用超声波辅助提取法从黄芩中提取黄芩苷，并利用高效液相色谱法（HPLC）对提取的黄芩苷进行鉴定和含量测定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 黄芩药材：购自药店，经鉴定为正品黄芩。
- 甲醇：分析纯。
- 超声波清洗机。
- 高效液相色谱仪（HPLC）。
- 色谱柱：C18柱（4.6 mm × 250 mm，5 μm）。
- 流动相：乙腈-水（体积比70:30）。
- 紫外检测器（UV）。
2. 实验试剂：- 黄芩苷对照品：纯度≥98%。
- 甲醇：分析纯。
- 磷酸：分析纯。
四、实验方法1. 黄芩苷的提取- 称取黄芩药材粉末1.0 g，置于50 mL具塞锥形瓶中。
- 加入10 mL甲醇，超声提取30 min。
- 提取液用0.45 μm微孔滤膜过滤，滤液备用。
2. 黄芩苷的鉴定- 将提取液进行HPLC分析，检测波长为280 nm。
- 将黄芩苷对照品进行HPLC分析，检测波长为280 nm。
- 比较提取液和对照品的保留时间，确认提取物中黄芩苷的存在。
3. 黄芩苷含量的测定- 将提取液进行HPLC分析，检测波长为280 nm。
- 计算黄芩苷的峰面积，并根据对照品溶液的浓度和峰面积计算提取液中黄芩苷的含量。
五、实验结果与分析1. 黄芩苷的提取- 超声波辅助提取法能有效地从黄芩中提取黄芩苷，提取率较高。
2. 黄芩苷的鉴定- 提取液在280 nm波长下与黄芩苷对照品具有相同的保留时间，说明提取液中含有黄芩苷。
3. 黄芩苷含量的测定- 提取液中黄芩苷的含量为0.8 mg/g。
六、实验结论1. 本实验采用超声波辅助提取法成功从黄芩中提取黄芩苷。
高效液相色谱法测定黄芩中黄芩苷含量
３４ 加 样 回收 率 试 验 ： 供 试 品 溶 液 过 直 径 为 ０ ４ ｍ 的 ． 取 ． ５ｒ ｉ 微 孔 滤 膜 ， 别 进 样 １ Ｌ， 据 批 号 分 别 测 定 ， 平 均 值 。 分 Ｏ 根 取 结 果 表 明 ， 芩 中 含 有 黄 芩 苷 Ｏ ２ ２ｍｇ ｇ 黄 芩 苷 含 量 为 黄 ． ４ ／ ， ５ ５ 。具 体 分 别 为 ： 号 ２ １０ ８ 、 ０ １ ５０ ２ １ ０ １ ．２ 批 ０ １ ５ ０ ２ １ ０ ３ 、０ １５ ２
甲醇 稀 释 至刻 度 ， ３ ０ｎ 测 吸 光 度 。以 吸 收 度 值 ｙ对 浓 于 ７ ｍ 度 Ｘ 进 行 线 性 回 归 ， 算 回 归 方 程 ｙ一０ Ｏ ０２ ． ６ Ｘ， 计 ． ０ ＋０ ２ ４ ｒ 一０ ９ ９６ 线性 范 围 ５ ２ ｇ ｍＬ ． ９ ， ～ ５ｔ ／ 。 ￣
２ ３ 供 试 品 溶 液 的 制 备 ： 芩 药 材 约 ０ ５ｇ 精 密 称 定 ； ． 黄 ． ， 置
于 ５ ０ｍＬ三 角 烧 瓶 中 ， ２ 加 ５ｍＬ 甲醇 回 流 ３ ｎ 冷 却 ； ０ｍｉ， 转
移 至 ５ ＯｍＬ量 瓶 中 ， 甲醇 至 刻 度 ， 匀 ， 过 ； 续 滤 液 ５ 加 摇 滤 取
３ １ 精 密 度 试 验 ： 对 照 品 溶 液 ２ ． 取 ０ｍＬ， 行 连 续 进 样 ６ 进 次 ， 得 黄 芩 面 积 的相 对 标 准 偏 差 （ Ｓ ） 别 为 ０ ５ ％ ， 测 ＲＤ分 ． ９ 显 示 其 精 密 度 良 好 。然 后 精 密 称 取 已 知 含 量 的 ３份 黄 芩 药 材 ， 样 品 准 备 与 处 理 方 法 制 备 计 算 回 收 率 ， 果 分 别 为 按 结
１２ ４ ６ ８ｈ测 定 ，以各 色 谱 峰 峰 面 积 的 积 分 值 计 算 ， Ｓ ， ， ， ， ＲＤ
黄芩有效成分的含量测定技术
黄芩有效成分的含量测定技术黄芩是一种常见的中药材，具有清热解毒、凉血止血等药效，在中医药领域中应用广泛。
黄芩含有多种有效成分，如黄芩苷、黄芩酸、黄芩素等。
这些有效成分对于黄芩的药效起着至关重要的作用。
对黄芩中有效成分的含量进行准确测定，对于保证药材质量和药效的稳定具有重要意义。
目前，黄芩有效成分的含量测定技术主要有色谱法、分光光度法、生物学法和质谱法等。
这些技术各有特点，可以根据实际情况选择合适的方法进行测定。
一、色谱法色谱法是测定黄芩有效成分的常用方法之一。
常用的色谱方法包括高效液相色谱（HPLC）和气相色谱（GC）。
HPLC主要用于测定黄芩中的黄芩苷、黄芩素和黄芩酸等化合物，该方法操作简便，灵敏度高，分离效果好，已成为测定黄芩有效成分含量的首选方法。
GC主要用于测定黄芩中的挥发油成分，该方法分离效果好，可以有效地测定黄芩中的挥发性成分含量，但对于非挥发性成分的测定能力较弱。
二、分光光度法分光光度法是用于测定黄芩有效成分含量的另一种常用方法。
分光光度法主要用于测定黄芩中的黄酮类成分含量，如黄芩素。
该方法操作简便，成本低，适用范围广，但灵敏度相对较低，不适用于低含量的有效成分的测定。
三、生物学法生物学法是通过生物学活性的测试，测定药材中有效成分的含量。
黄芩中含有多种生物活性成分，如黄芩苷对抗氧化、抗炎、抗菌等作用，可以通过生物学活性的测试，间接测定其含量。
但这种方法受到样品的复杂成分影响较大，操作较为繁琐，所以在实际应用中较少采用。
四、质谱法质谱法是近年来发展起来的一种新型的测定方法。
质谱法可以直接测定黄芩中的有效成分的分子结构和含量，具有操作简便、灵敏度高、准确性好等优点，但成本较高，设备要求较高，不适用于一般的药材质量控制。
以上几种测定技术各有特点，可以根据实际情况进行选择。
在实际应用中，除了测定技术外，样品的前处理工作也是非常重要的。
例如样品的提取、净化、浓缩等工作，都会对最终的测定结果产生影响。
黄芩中黄芩苷的提取、分离与鉴定
药学专业综合实验（二）题目：黄芩中黄芩苷的提取、分离与鉴定学院：医药学院班级： xxxxxxxxxxx姓名： xxxxxxxxxxxxxxx学号： xxxxxxxxx黄芩中黄芩苷的提取、分离与鉴定黄芩简介：黄芩又名山茶根、黄芩茶、土金茶根；为唇形科植物，以根入药。
有清热燥湿，凉血安胎，解毒等功效。
含多种黄酮类化合物，主要为黄芩甙，黄芩素，汉黄芩甙，汉黄芩素，７-甲氧基黄芩素，７-甲氧基去甲基汉黄芩素，黄芩黄酮Ⅰ，黄芩黄酮Ⅱ等。
主治温热病、上呼吸道感染、肺热咳嗽、湿热黄胆、肺炎、痢疾、咳血、目赤、胎动不安、高血压、痈肿疖疮等症。
产于河北、辽宁、陕西、山西、山东、内蒙古、黑龙江等。
一、实验目的1掌握从黄芩中提取、精制黄芩苷的原理、方法及操作要点。
2掌握黄芩苷的结构鉴定原理及方法。
二、实验原理黄芩苷为一连有葡萄糖醛酸结构的黄酮化合物，具有一定的脂溶性和弱酸性，提取时可以选择一定浓度的乙醇溶液，同时其可在碱性溶液中溶解，形成钠盐，在提取液中加酸酸化，使黄芩苷游离析出。
利用黄芩苷能溶于碱，不溶于酸的性质使之与酸性杂质分离。
三、实验材料与仪器材料：黄芩干燥根仪器：旋转蒸发仪离心沉淀机 200g摇摆式高速中药粉碎机电子天平真空泵抽滤装置圆底烧瓶水浴锅索氏提取器量筒玻璃棒PH试纸试剂：浓盐酸 60%乙醇 40%氢氧化钠 95%乙醇 50%乙醇2mol/l盐酸镁粉二氧化锆枸橼酸三氧化铝四、实验步骤1、黄芩苷的提取、分离黄芩粗粉100g加10倍量水煎煮2次，每次1h过滤4h，抽滤(粗制黄芩苷)2、黄芩苷的鉴定（1）盐酸-镁粉反应：取黄芩苷少许置于试管中，以乙醇1ml水浴微温振摇溶解，加镁粉适量，滴加浓盐酸数滴，观察颜色变化。
（2）锆-枸橼酸反应：取黄芩苷少许置于试管中，加水2ml置水浴上温热至溶解，加数滴5%二氧化锆溶液，振荡后，观察颜色变化；再加2%枸橼酸试剂，观察颜色变化。
（3）三氧化铝反应：取黄芩苷少许置于试管中，加水2ml置水浴上温热至溶解，加入2%三氧化铝甲醇溶液数滴，观察颜色变化。
黄芩中黄芩苷的提取分离及测定方法的研究
黄芩中黄芩苷的提取分离及测定方法的研究
黄芩中黄芩苷的提取分离及测定方法的研究是对黄芩这种中药
材中黄芩苷的提取、分离和测定方法进行探究。
黄芩苷是一种黄酮类化合物，在黄芩中含量较低，但是它具有多种药用价值，可用于清热解毒、止血止痛、降低血压等方面。
因此，对黄芩苷的提取分离及测定方法进行研究，有助于提高黄芩的药用价值，为中医药的发展做出贡献。
该研究通常需要使用化学分离方法，如色谱法、电泳法等，以及物理分离方法，如离心法、过滤法等。
在实验中，需要对提取方法、分离方法、测定方法等进行探究，以提高黄芩苷的提取率和测定准确度。
同时，还需要对实验材料、仪器和试剂等进行选择和优化，以确保实验结果的准确性和可靠性。
具体实验步骤通常包括：黄芩原料的选择和处理、黄芩苷的提取、黄芩苷的分离和纯化、黄芩苷的测定等。
在实验过程中，需要严格控制实验条件，以保证实验结果的准确性和可靠性。
最后，需要对实验结果进行分析和总结，并提出改进意见和建议，以进一步提高黄芩苷的提取率和测定准确度。
黄芩中黄芩苷的提取分离及测定方法的研究是对中医药发展具
有重要意义的实验研究，它的成功开展有助于提高中医药的药用价值，为人们的健康做出贡献。
黄芩苷检验操作规程
黄芩苷检验操作规程1. 引言黄芩苷是一种重要的草药成分，具有抗炎、抗氧化和抗肿瘤等多种药理活性。
为了保证黄芩苷的质量，需要进行检验，以确保药材的安全性和有效性。
本文档旨在制定黄芩苷的检验操作规程，以确保检验结果的准确性和一致性。
2. 设备和试剂准备•高效液相色谱仪（HPLC）•黄芩苷标准物质•乙腈、甲醇、水等溶剂•各类试剂瓶、容量瓶、移液器等实验室器材3. 样品制备1.将黄芩苷药材样品研磨成粉末。
2.取黄芩苷药材粉末10克，加入100毫升甲醇，超声处理30分钟，使黄芩苷充分溶解。
3.将上述溶液过滤，取上清液作为待测样品。
4. 仪器参数设定1.打开HPLC仪器，检查系统压力是否正常。
2.设置流速为1.0毫升/分钟，柱温为30℃，检测波长为270纳米。
3.进行柱平衡，经过30分钟才能开始检测样品。
5. 黄芩苷检测操作步骤1.装载色谱柱，并调整流速至设定值。
2.取一定量的黄芩苷标准物质，溶解于适量的乙腈中，制备浓度为1毫克/毫升的标准溶液。
3.使用自动进样器，依次加入待测样品和标准溶液。
4.进行色谱分离，记录色谱图。
5.通过比较待测样品的色谱峰与标准溶液的色谱峰，根据峰面积计算黄芩苷的含量。
6.计算结果以百分比表示，如含量小于等于10%，精确至小数点后两位；如含量大于10%，精确至小数点后一位。
6. 数据处理和结果分析1.根据色谱峰面积，计算待测样品中黄芩苷的含量，使用以下公式：含量（%）=（待测样品黄芩苷峰面积 / 标准溶液黄芩苷峰面积）× 标准溶液浓度 × 100%2.对于重复样品，进行三次独立测定，并计算平均值和相对标准偏差。
3.分析结果应满足黄芩苷含量的质量控制标准，如国家药典要求。
7. 结论黄芩苷的检验操作规程制定了样品制备、仪器参数设定和检测操作步骤等内容，以确保对黄芩苷的检测结果准确可靠。
通过HPLC技术，我们可以快速测定黄芩苷的含量，为草药质量控制提供有效的数据支持。
运用高效液相色谱法测定某黄芩制剂中黄芩苷的含量-分析化学论文-化学论文
运用高效液相色谱法测定某黄芩制剂中黄芩苷的含量-分析化学论文-化学论文——文章均为WORD文档，下载后可直接编辑使用亦可打印——干姜黄芩黄连人参汤出自《伤寒论》之厥阴篇, 由干姜、黄芩、黄连、人参4 味中药组成, 用于治疗胃热呕吐兼肠寒腹痛、下利、肠鸣之上热下寒之证.现代临床多用于治疗胃肠炎[1]、消化性溃疡[2]、腹泻、糖尿病[3]等疾病.干姜芩连人参煎膏剂是在原方基础上进行剂型的改良, 为了能够有效地控制该制剂的质量、保证其稳定性, 本课题参考《中国药典》[4]及相关资料, 采用HPLC 法对本制剂中主药之一黄芩中黄芩苷的含量进行测定.现报告如下.1 材料与方法1. 1仪器与试药紫外线分析仪(ZF-I 型, 上海顾村电光仪器厂);高效液相色谱仪(Waters1515 型, 美国Waters 公司);对照品黄芩苷( 批号:110715-201117) ;甲醇为色谱纯试剂;水为二次蒸馏水, 其他试剂均为分析纯, 煎膏剂自制( 批号分别为150201、150202、150301、150302、150401、150402).1. 2方法1. 2. 1色谱条件色谱柱:AgilentExtendODS反相柱(4.6mm250 mm, 5 m) ;流动相:甲醇-水-磷酸(45:55:0.2) ;检测波长:278 nm ;流速:1.0 ml/min ;柱温:室温.1. 2. 2溶液的制备1. 2. 2. 1供试品溶液的制备精密量取样品0.3 ml, 置50 ml 容量瓶中, 加入60%甲醇定容至刻度, 摇匀, 过滤, 取续滤液,作为供试品溶液.1. 2. 2. 2对照品溶液的制备取黄芩苷对照品适量, 精密称定, 加甲醇溶解制成55 g/ml 的溶液, 作为对照品溶液.1. 2. 2. 3阴性样品溶液的制备按处方制备不含黄芩药材的模拟制剂, 精密量取0.3 ml, 按照 1.2.2.1 法制备成缺黄芩的阴性样品溶液.1. 2. 3最佳吸收波长的确定以流动相作为空白对照, 将黄芩苷对照品溶液和供试品溶液在200~600 nm 内进行光谱扫描, 结果黄芩苷在278 nm 处显示有最大吸收.因此选择278 nm 作为检测波长.2 结果2. 1专属性试验分别精密吸取供试品溶液、对照品溶液与阴性样品溶液各10 l, 注入液相色谱仪中, 记录 3 份溶液的色谱图.结果表明, 阴性样品在与黄芩苷峰相近的保留时间内出现两个干扰峰, 但测得两峰峰面积均为供试品峰面积的2%以下, 因此可以说明阴性对黄芩苷的测定无影响, 本方法专属性良好.2. 2线性关系的试验精密称取黄芩苷对照品适量, 加甲醇制成每1 毫升含0.203 mg 的对照品贮备液.精密吸取上述贮备液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0 ml, 分别置于10 ml 量瓶中, 加甲醇稀释至刻度, 摇匀.分别精密吸取上述溶液10l, 注入液相色谱仪中, 以进样量为横坐标, 色谱峰面积为纵坐标, 绘制标准曲线, 得回归方程Y=2.88107X+7.45104,r=0.9992, 结果表明黄芩苷在0.0203~0.1421 mg/ml 内线性关系良好.2. 3精密度试验精密吸取供试品溶液10 l, 注入液相色谱仪中, 重复进样 6 次, 测定黄芩苷峰面积, RSD 为 1.62%.结果表明仪器精密度良好.2. 4重复性试验量取同一批样品0.3 ml, 6 份, 制成样品溶液, 进样10 l, 记录峰面积.计算得黄芩苷含量平均值为70.25 g/ml , RSD 值为2.26%.表明重现性较好.2. 5稳定性试验精密吸取供试品溶液10 l, 每间隔1 h 进样1 次, 8 h 内测定黄芩苷峰面积, RSD 值为1.86%.结果表明供试品溶液在8 小时内稳定性良好.2. 6加样回收率试验量取样品共6 份, 分别精密加入1.75 mg/ml 的对照品溶液1 ml, 按2.2.1 法制成样品溶液, 照样品含量测定方法进行测定, 计算回收率.见表 1.该法测定黄芩苷的含量方法学合理, 准确、可靠.【1】2. 7取6 批中试产品( 批号分别为150201、150202、150301、150302、150401、150402), 按供试品溶液制备方法制备, 精密吸取10 l 样品溶液进样, 测定黄芩苷含量分别为11.71 mg/ml、11.86 mg/ml、15.27 mg/ml、15.04 mg/ml、13.49 mg/ml、13.88 mg/ml.3 小结黄芩为方中君药之一, 在本制剂的临床疗效中起着重要作用, 所以对其有效成分黄芩苷进行了定量研究, 结果表明,黄芩苷含量测定方法操作简便, 专属性强, 回收率高[5-8].本方法的建立, 可使干姜芩连人参煎膏剂的质量得到控制,以确保其在临床应用的安全有效.参考文献[1] 陈岩. 干姜黄芩黄连人参汤治疗慢性结肠炎56 例疗效观察. 新中医, 2010, 42(10):38-39.[2] 徐州, 周德端, 段国勋, 等. 干姜芩连人参汤治疗消化性溃疡临床观察. 四川中医, 1994(1):23-25.[3] 金末淑, 陈欣燕, 姬航宇, 等. 仝小林教授运用干姜黄芩黄连人参汤治疗 2 型糖尿病辨证要点分析. 云南中医学院学报, 2011,34 (1):32-34.[4] 国家药典委员会. 中华人民共和国药典. : 化学工业出版社, 2010:116.[5] 彭智平. 基于干姜黄芩黄连人参汤临床有效的煮散工艺研究及其药效学分析. 中国中医科学院,2014:15-16.[6] 郑德柱. 干姜黄芩黄连人参汤临床应用. 河北中医, 1991(5):125-126.[7] 胡俊辉. 干姜黄芩黄连人参汤中11 种药效成分的RP-HPLC测定. 中药新药与临床药理, 2014, 1(1):77-81.[8] 陈欣燕,金末淑,姬航宇, 等. 仝小林教授运用干姜黄芩黄连人参汤治疗 2 型糖尿病80 例临床观察. 中华中医药杂志,2013(2):463-465.。
HPLC法测定川黄芩中黄芩苷的含量
HPLC法测定川黄芩中黄芩苷的含量发表时间：2012-05-24T14:42:26.723Z 来源：《医药前沿》2012年第1期供稿作者：杨逆1 冯远驰2 [导读] 高效液相色谱法定量测定川黄芩中的黄芩苷，方法简单、准确度高。
杨逆1 冯远驰2（ 1 凉山州妇幼保健院四川四川凉山 6 1 5 0 0 0 ; 2 凉山州食品药品检验所四川凉山 6 1 5 0 0 0 ）【摘要】目的探讨高效液相色谱法测定川黄芩中的黄芩苷含量的方法学特点。
方法取川黄芩样品粉末（共5批），比较70%乙醇、稀乙醇、甲醇、50%甲醇对其黄芩苷的提取效率。
取黄芩苷对照品溶液10ul，连续5次注入液相色谱仪，研究黄芩苷进样量与峰面积的线性关系，并进行精密度试验、重复性试验、加样回收实验、耐用性实验，最后进行样品测定。
结果测定波长选定为277nm，选用甲醇-水-磷酸（47：53：0.2）作为测定流动相，70%乙醇为本品的提取溶剂，以回流提取3小时为提取方法。
黄芩苷在进样量为30.31～1212.4μg之间时，与峰面积线性关系良好。
结果表明，该法精密度、重现性、准确度及耐用性均较好。
结论高效液相色谱法定量测定川黄芩中的黄芩苷，方法简单、准确度高。
【关键词】川黄芩黄芩苷含量测定【中图分类号】R927.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2012）01-0109-02 川黄芩系常用药材，为唇形科黄芩属植物滇黄芩Scutellaria amoenaC. H.Wright,连翘叶黄芩Scutellaria hypericifolia Levl.或韧黄芩展毛变种Scutellaria tenax W. W.Smith var.patentipilosa(Hand.-Mazz.)C. Y.Wu的干燥根。
主产于四川西南部、西部、西北部，云南及贵州等省[1]。
川黄芩主要含黄芩苷和黄芩素、汉黄芩素、滇黄芩素和汉黄芩苷等［3、4］。
黄芩苷为川黄芩中含量较高的成分。
黄芩苷提取和测定方法研究
黄芩苷提取和测定方法研究黄芩苷是一种具有良好的药理学活性的天然多糖类化合物，广泛存在于中草药，特别是黄芩属植物中，具有抗氧化、抗肿瘤等作用，因此在现代药物研究中受到重视。
但其中提取与分析方法尚未完善，相关研究还非常不完善。
研究者期望采用有效、简便、容易操作的方法来提取和测定黄芩苷，以此为基础深入研究其药理学作用和药代动力学特性。
一、提取黄芩苷黄芩苷主要存在于植物的叶片和根系中，在植物的接受部位中存在着差异，因此其提取方法也不一样。
常用的提取方法有溶剂提取法、水萃取法、超声波提取法和气相色谱提取法等。
（1）溶剂提取法：溶剂提取法是一种有效的黄芩苷提取方法，在提取前，可用热水溶解植物细胞壁，然后采用溶剂提取技术，以某种溶剂和分散液混合检测植物样品中的黄芩苷，最终得到溶剂提取液。
（2）水萃取法：水萃取法是将植物样品和蒸馏水混合，在特定的时间和温度下进行搅拌萃取，然后经过离心分离和过滤，以膜过滤器过滤得到水萃取液，然后经过浓缩和精制可得到大量的水萃取物。
（3）超声波提取法：超声波提取法是通过植物样品与溶剂在某种特定超声振动条件下混合共振，以物理方式将被提取物与有效成分从植物体内分离，提取出有效成分的一种方法。
（4）气相色谱提取法：气相色谱提取法是一种综合的液体样品提取分离技术，它可用来提取黄芩苷及其他有毒物质，可以有效提取微量物质。
二、测定黄芩苷黄芩苷的测定通常包括定性和定量两个方面。
定性一般采用薄层色谱法，可以有效分离出黄芩苷，以迅速确定黄芩苷的情况；定量通常采用核磁共振成像技术，可以准确的测量黄芩苷的结构含量和含量大小。
（1）薄层色谱法：薄层色谱法是一种定性分析黄芩苷的方法，它采用植物提取液和色谱剂混合，在色谱板上用一定的条件进行吸附和分离，以其特定的特性或染色来确定被测物质的存在或缺失。
（2）核磁共振成像技术：核磁共振成像技术是一种非常有效的测试黄芩苷含量的方法，通过测量植物样品中的核磁共振信号，可以准确的测量黄芩苷的结构含量和含量大小。
黄芩有效成分的含量测定技术
黄芩有效成分的含量测定技术当前，测定黄芩中有效成分含量的技术主要有传统的色谱法、质谱法和化学分析法等。
下面将详细介绍其中几种常用的技术。
1. HPLC法：高效液相色谱法（HPLC）是目前最常用的测定黄芩有效成分含量的方法之一。
该方法具有准确、灵敏、高效等优点。
一般采用C18反相色谱柱，流动相为乙腈和0.1%磷酸水溶液，并使用紫外检测器检测。
2. TLC法：薄层色谱法（TLC）是一种常用的快速筛查有效成分的方法。
通过在薄层板上涂抹黄芩提取物，使用合适的展开剂进行展开，再使用紫外灯或化学染色剂进行检测。
该方法操作简单、快速，但准确性较低。
3. 高分辨质谱法：利用质谱技术可以对黄芩中的有效成分进行定性和定量分析。
通过质谱仪设备进行测定，可以得到各种有效成分的质谱图谱，并通过比对标准品或者文献报道的谱图进行定量分析。
4. 化学分析法：通过化学反应，将黄芩中的有效成分转化成可以测定的物质，如使用硫酸铁作为试剂，与黄芩中的黄酮类化合物发生酸碱反应后形成有色产物，再通过分光光度法进行测定。
这种方法简单易行，但是对试剂的选择和反应条件的控制要求严格。
需要注意的是，由于黄芩中含有多种有效成分，因此在测定中需要选择合适的方法，同时还需对测定结果进行综合考虑，以获得最准确的含量测定结果。
不同品种和产地的黄芩可能在有效成分含量上存在差异，测定时应进行合理的样品筛选和对比分析。
测定黄芩有效成分含量的技术主要包括HPLC法、TLC法、质谱法和化学分析法等。
这些方法各有优缺点，选择合适的方法需要根据实际需求和实验条件进行综合考虑。
对于黄芩有效成分含量的准确测定有助于指导临床应用和制药工艺的优化。
测定黄芩中黄芩苷的定性和定量方法
测定黄芩中黄芩苷的定性和定量方法1.薄层色谱法定性鉴别薄层色谱法是将适宜的吸附剂或载体涂布于玻璃板、塑料或铝基片上,成一均匀薄层,待点样、展开后,与适宜的对照物按同法在同板上所得的色谱图对比,用于中药制剂的鉴别。
该法是黄芩苷常用的定性分析方法,一般采用吸附薄层鉴定,常用硅胶和聚酞胺作为吸附剂。
1.1样品处理适当有效的样品处理可将被测成分黄芩苷从制剂中溶出,还可分离精制纯化样品,一定程度上避免共存成分的干扰,使定性鉴别过程中显色反应更加清楚明了。
常用甲醇、乙醇进行提取或萃取。
1.2固定相固定相通常用硅胶和聚酞胺。
在硅胶薄层色谱中,硅胶除对黄芩苷产生物理吸附外,还与黄芩苷的游离酚轻基产生氢键吸附,故易出现拖尾现象,采用氢氧化钠或醋酸钠制备的硅胶G板可有效改善拖尾现象。
聚酞胺薄层色谱法利用聚酞胺与黄答普的酚轻基产生氢键吸附的原理进行分离。
1.3展开剂用硅胶薄层色谱鉴定时，根据黄芩苷的极性,展开剂常含酸或水。
聚酞胺对黄芩苷的吸附能力较大，需用具有较强极性的展开剂，常用醋酸。
1.4显色剂黄芩苷具有游离的邻二酚轻基，可与金属离子如铝离子、铁离子等发生络合反应而显色，故可用三氯化铝、三氯化铁或通用显色剂硫酸进行显色。
显色反应可采用在紫外光下观察斑点和喷显色剂相配合的方法。
2.高效液相色谱法定量分析高效液相色谱法与紫外分光光度法和薄层扫描法相比，具有高效的分离,灵敏的检测和快速的分析的特点，既能用于微量组分的分析测定，又能用于大量的制备分离，是中药成分研究中一种非常重要的分析手段，现在HPLC已成为测定黄芩及其制剂中黄芩苷的主要方法。
2.1样品处理黄芩本身含有多种成分，含黄芩的复方制剂化学成分更加复杂，进行样品处理可以将黄答首从样品中释放出来，并制成便于分析测定的稳定试样，还可除去杂质、纯化样品,提高含量测定的重现性和准确度，也起到了保护色谱柱的作用。
通常用甲醇或乙醇作提取或萃取液，经过一系列分离、纯化，最后用0.45um微孔滤膜滤过。
黄芩有效成分的含量测定技术
黄芩有效成分的含量测定技术黄芩是一种常见的中药材，被广泛应用于中医药中。
它具有清热解毒、泻火除烦、泻肝胆和抑菌作用，对于治疗热病、痈肿疮毒、感冒发热、黄疸等病症有着良好的疗效。
其中黄芩中的有效成分黄芩苷和黄芩素被广泛认为是其主要药效成分。
准确、快速地测定黄芩中的有效成分含量对于保证其质量和药效具有重要意义。
本文将介绍有关黄芩有效成分含量测定技术的相关内容。
一、黄芩有效成分的含量黄芩中的有效成分主要包括黄芩苷和黄芩素。
黄芩苷是一种黄酮类化合物，具有抗氧化、抗炎和抗肿瘤等作用；黄芩素是一种苯丙素类化合物，具有抗菌、抗炎和抗氧化等作用。
这两种有效成分不仅决定了黄芩的药效，还直接影响黄芩的质量和功效。
对于黄芩中黄芩苷和黄芩素含量的准确测定具有重要意义。
二、测定方法1. 薄层色谱法薄层色谱法是目前常用的一种测定黄芩有效成分含量的方法。
其操作简单、快速，且具有较高的准确性和灵敏度。
具体操作步骤如下：（1）样品制备：将黄芩粉末加入80%乙醇中超声提取，过滤收集提取液，再用乙醚萃取，得到乙醚层，将其浓缩干燥得到样品。
（2）色谱条件：采用硅胶G薄层板作为固定相，用乙酸乙酯-甲醇-乙酸-水（10:5:2:3）作为移动相，进行薄层色谱分离。
（3）显色剂：将分离后的薄层板放入紫外灯下照射，目测黄芩苷和黄芩素的斑点。
（4）测定含量：根据标准品的相对移动率，计算出黄芩苷和黄芩素的含量。
2. 高效液相色谱法以上就是目前常用的两种测定黄芩有效成分含量的方法，它们各自具有一定的优势和适用范围，可以根据具体需要选择合适的方法进行测定。
三、存在的问题与发展趋势目前，黄芩有效成分含量的测定技术已经相对成熟，但仍然存在着一些问题。
部分测定方法需要使用昂贵的仪器设备，操作复杂，不适合大规模生产使用；一些方法的检测灵敏度和准确性还有待提高。
为了解决这些问题，未来黄芩有效成分含量测定技术的发展趋势是朝着快速、便捷、高效和低成本的方向发展。
微波辅助提取、超声波提取、高效液相色谱-质谱联用等新技术的应用将会成为发展的重点。
最新UPLC法测定黄芩提取物中黄芩苷和黄芩素的含量--论文
武汉轻工大学毕业设计（论文）论文题目：UPLC法测定黄芩提取物中黄芩苷和黄芩素的含量Determination of BaicaLin and BaicaLein inScuteLLarein by UPLC method2015年6月目录摘要 (1)Abstract (3)第一章绪论 (4)1. 黄芩的研究进展 (4)1.1黄芩的药理作用 (4)1.2黄芩的有效成分 (5)1.3黄芩的检测方法 (5)2.研究内容 (8)3. 研究意义 (8)3.1禽类 (8)3.2猪 (9)3.3 反刍动物 (10)第二章实验研究 (11)1. 材料方法 (11)1.1 实验材料 (11)1.2 实验方法 (12)2．方法学验证 (13)2.1系统适应性 (13)2.2标准曲线及线性关系考察 (14)2.3精密度试验 (15)2.4稳定性试验 (16)2.5重复性试验 (17)2.6加标回收率的测定 (18)3．黄芩的提取液含量测定 (18)4．讨论 (18)5．试验方法的优缺点 (19)5.1缺点 (19)5.2优点 (20)参考文献 (21)致谢 (24)摘要建立用超高效液相色谱（UPLC）同时测定黄芩中黄芩苷、黄芩素的方法。
方法:将适量黄芩提取液溶于甲醇，于100mL容量瓶中定容，配成黄芩供试品溶液。
检测方法：Waters 超高效液相色谱仪，色谱柱为ACQUITY UPLC®BEH C18 (2.1×50mm ,1.7um) ，流动相为乙腈（流动相C），0.05% 磷酸（流动 D ）；0～0.68min ,30%C,70%D；0.68～1.02min,30%→40% C,70% →60%D;1.02～1.36min ，40% →65% C，60% →35% D;1.36～2.30min,30%C ,40%D的梯度洗脱。
流速为0.61mL/min，柱温30℃，紫外检测波长为278nm，进样量为0.02µL。
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测定黄芩中黄芩苷的定性和定量方法
1.薄层色谱法定性鉴别
薄层色谱法是将适宜的吸附剂或载体涂布于玻璃板、塑料或铝基片上,成一均匀薄层,待点样、展开后,与适宜的对照物按同法在同板上所得的色谱图对比,用于中药制剂的鉴别。
该法是黄芩苷常用的定性分析方法,一般采用吸附薄层鉴定,常用硅胶和聚酞胺作为吸附剂。
1.1样品处理
适当有效的样品处理可将被测成分黄芩苷从制剂中溶出,还可分离精制纯化样品,一定程度上避免共存成分的干扰,使定性鉴别过程中显色反应更加清楚明了。
常用甲醇、乙醇进行提取或萃取。
1.2固定相
固定相通常用硅胶和聚酞胺。
在硅胶薄层色谱中,硅胶除对黄芩苷产生物理吸附外,还与黄芩苷的游离酚轻基产生氢键吸附,故易出现拖尾现象,采用氢氧化钠或醋酸钠制备的硅胶G板可有效改善拖尾现象。
聚酞胺薄层色谱法利用聚酞胺与黄答普的酚轻基产生氢键吸附的原理进行分离。
1.3展开剂
用硅胶薄层色谱鉴定时，根据黄芩苷的极性,展开剂常含酸或水。
聚酞胺对黄芩苷的吸附能力较大，需用具有较强极性的展开剂，常用醋酸。
1.4显色剂
黄芩苷具有游离的邻二酚轻基，可与金属离子如铝离子、铁离子等发生络合反应而显色，故可用三氯化铝、三氯化铁或通用显色剂硫酸进行显色。
显色反应可采用在紫外光下观察斑点和喷显色剂相配合的方法。
2.高效液相色谱法定量分析
高效液相色谱法与紫外分光光度法和薄层扫描法相比，具有高效的分离,灵敏的检测和快速的分析的特点，既能用于微量组分的分析测定，又能用于大量的制备分离，是中药成分研究中一种非常重要的分析手段，现在HPLC已成为测定黄芩及其制剂中黄芩苷的主要方法。
2.1样品处理
黄芩本身含有多种成分，含黄芩的复方制剂化学成分更加复杂，进行样品处理可以将黄答首从样品中释放出来，并制成便于分析测定的稳定试样，还可除去杂质、纯化样品,提高含量测定的重现性和准确度，也起到了保护色谱柱的作用。
通常用甲醇或乙醇作提取或萃取液，经过一系列分离、纯化，最后用0.45um微孔滤膜滤过。
如在小儿清肺口服液的质量标准研究，精密吸取样品溶液5.0ml，加甲醇稀释至50ml,混匀，过滤，续滤液作为供试品溶液。
用HPLC法测定小儿感冒片中黄芩苷的含量。
样品用70%乙醇超声提取,滤过,滤液置50ml 容量瓶中，加70%乙醇至刻度作为供试品。
2,2固定相
黄芩苷具有羟基，在硅胶柱上直接进行高效液相色谱分离效果不太好，而用RP一HPLC法分离效果较好。
现常用固定相是烷基键合相如C8,Cl8键合相,其中又以Cl8最常用。
2.3流动相
流动相通常以水为基础溶剂，加入一定量的能与水互溶的极性调整剂，常用甲醇、乙腈，因黄芩苷呈弱酸性,为抑制解离在流动相加入少量的酸如磷酸、醋酸等,能改善峰形更加尖锐利于分析。
亦有将离子对试剂加入含水的流动相中,用反相离子对色谱法来分析。
2.4检测方法
黄芩苷有紫外吸收，常用紫外检测器，又以光电二极阵列检测器最常用。
因黄芩苷在280nm 处有最大吸收,通常在280nm左右进行检测。
3.药典方法
取黄芩苷粉末(通过三号筛)约0.5g,精密称定,置锥形瓶中,加乙醇85ml，加热回流1.5h，放冷，连同沉淀一并移至100ml量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀。
用干燥滤纸滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液5ml，置50ml量瓶中，加乙醇至刻度，再精密吸取5ml，置25ml量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀。
照分光光度法(药典附录31页)，在275士1nm的波长处测定吸收度，
按的吸收系数为673计算,即得。
所含黄酮以黄芩苷计算。
4.微波提取法测定黄芩中黄芩苷的含量
4. 1 供试品溶液的制备取黄芩饮片样品，粉碎( 过40 目筛) ，精密称定约0. 15 g，置微波提取罐中，精密加入30% 乙醇20 mL，称定质量，微波协助萃取，5 min 内升温至120 ℃，保温10 min，取出，冷却至室温，再精密称定，用30% 乙醇补足减失的质量，过滤，取续滤液1 mL 置10 mL 量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，即得。
4. 2 对照品溶液的制备取黄芩苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL 含60 μg 的溶液，摇匀，即得。
4. 3 色谱条件Dikma Diamonsil C18色谱柱( 4. 6mm ×150 mm，5 μm) ，流动相甲醇-水-磷酸( 47 ∶53 ∶0. 2 ) ，检测波长280 nm，柱温30 ℃，流速1 mL·min－1。
4. 4 样品测定取黄芩样品，按2. 1 供试品溶液的制备项下制备，按2. 3 色谱条件进行测定，计算黄芩苷的含量。
体会和疑问：微波提取法比药典法大幅度缩短了提取时间，由加热3h缩短为微波提取15 min，微波法比药典法提取时间缩短了94. 4% ，因此微波提取法可用于黄芩中黄芩苷的含量测定。
为什么药典中不选用微波提取法进行推广？。