苏教版选修一生物全册教学课件
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
37℃恒温箱中培养12h和24h后，观察并记录
1.制备牛肉膏蛋白胨培养基（用于培养细菌）
操作步骤
1．计算、称量 2．溶化 3．调pH： pH7．6 4．过滤：这一步可以省去。 5．分装：分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上， 以免沾污棉塞而引起污染。分装三角烧瓶的量以不超过三角 烧瓶容积的一半为宜。 6．加塞 7．包扎
按功能来分
鉴别培养基
伊红美蓝乳糖培养基 当大肠杆菌分解乳糖产酸时细菌带正电荷被染成红色，再 与美蓝结合形成紫黑色菌落，并带有绿色金属光泽。常用 的伊红美蓝乳糖培养基，可用来鉴别饮用水和乳制品中是 否存在大肠杆菌等细菌
按化学成分来分
天然培养基：
天然培养基有血清、血浆、和组织提取液（如鸡胚和牛胚浸 液）。 优点：营养成分丰富，培养效果好 缺点：来源受限;成分复杂，影响对某些实验产物的提取和实验 结果的分析;易发生支原体污染;
(2)消毒的方法：
1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min 2、巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min或 80 ℃ 下煮15min 如牛奶的消毒 3、化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消 毒;氯气消毒水源 4、紫外线消毒 ……
灭菌 ① 概念：使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，
需，而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、 嘧啶)以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。
(2)碳源
可作为碳源的物质有:
含碳无机物: 碳酸盐 碳酸氢、盐 二氧化碳 、
含碳有机物：
糖类（主要）葡萄糖 乳糖 蛋白质
脂肪酸
不同微生物所利用的碳源不同
a.异养型微生物的碳源为 b.自养型微生物的碳源为
15-30min 通常用于培养基的灭菌
大肠杆菌的培养和分离
超净工件台 倒平板
灭菌
接种液体 培养
wenku.baidu.com
划线分离 培养
培养基的 配制
菌种保存
3.微生物实验室培养的基本操作程序
1、器具的灭菌 2、培养基的配制 3、培养基的灭菌 4、倒平板 5、微生物接种 6、恒温箱中培养 7、菌种的保存
1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污 染
1.培养基的类型和用途 （1）按物理状态来分：培养基可分为固体培养基、半固体培养 基和液体培养基。其中固体培养基用于菌种分离、鉴定菌落等， 而液体培养基一般用于工业生产。 （2）按功能来分，可分为选择培养基和鉴别培养基。 （3）按化学成分来分，可分为天然培养基和合成培养基。
按物理状态来分 液体培养基：
血清中含有： ①多种蛋白质（白蛋白、球蛋白、铁蛋白等） ②多种金属离子； ③激素； ④促贴附物质，如纤粘蛋白、冷析球蛋白、胶原等。 ⑤各种生长因子 ⑥转移蛋白 ⑦不明成分
2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方 .
3.培养基内所含的基本物质
一般营养物质(1)水 (2)碳源 (3)氮源 (4)无机盐 其他物质 pH、特殊营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必
消毒
（1）消毒定义： 利用化学或物理方法，杀死大部份致病微生物的过程。区分为 高 程 度 消 毒 （ High-level Disinfection ） 、 中 程 度 消 毒 （ Intermediate-level Disinfection ） 、 低 程 度 消 毒 （ Low-level Disinfection）三种方式。
包括芽孢和孢子。 ② 方法：a 灼烧灭菌 b 干热灭菌 c 高压蒸汽灭菌
a. 灼烧灭菌 注意适用范围 微生物的接种工具 (接种环、 接种针)或其他金属用具直接 在火焰的充分燃烧层灼烧
b. 干热灭菌
160－170℃ ；1－2h 能耐高温的需要保持干燥
的物品( 玻璃器皿)
c. 高压蒸汽灭菌 100kPa 121℃
含碳有机物（有机碳） 含碳无机物（无机碳）
(3)氮源
可作为氮源的物质有:
含氮无机物： 氮气 、氨气 、 氨盐 、 硝酸盐
含氮有机物：
蛋白胨
牛肉膏 尿素
固氮微生物所利用的氮源是 氮气
培养基配制原则：
营养要协调 目的要明确 PH要适宜
无菌技术
1.无菌技术的概念 无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌 污染的方法。
外，还有什么目的？ 答：无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。
2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要， 请选择合适的方法。 （1） 培养细菌用的培养基与培养皿 （2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管 （3） 实验操作者的双手
答：（1）、（2）需要灭菌；（3）需要消毒。
实验操作
1.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 2.纯化大肠杆菌 3.将接种后的培养基和一个未接种的培养基放入
表面生长
均匀混浊生长
沉淀生长
按物理状态来分 固体培养基：菌落，菌苔
按物理状态来分 半固体培养基：
无动力 有动力(弥散)
观察细菌的运动、厌氧菌的分离和菌种鉴定
按功能来分 选择培养基
加入青霉素的培养基:分离酵母菌、霉菌等真菌 加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌 不加氮源的无氮培养基: 分离固氮菌 不加含碳有机物的无碳培养基: 分离自养型微生物 加入青霉素等抗生素的培养基: 分离导入了目的基因的受体细胞
1.1 微生物的分离和培养（Ⅰ）
一、课题目标： 了解有关培养基的基础知识，进行无菌技术的 操作，进行微生物的培养。
二、课题重点和难点： 无菌技术的操作。
三、技能目标： 掌握培养基的制备、高压蒸气灭菌和平板划线 法等基本操作技术，熟练、规范地进行无菌操 作，成功地培养微生物。
培养基
培养基（培养液）是由人工方法配制而成的，专供微生物 生长繁殖使用的混合营养液。
从制备培养基到接种与培养等全部实验过程要无菌操作
（1）对实验操作空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒 ； （2）将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌 ； （3）为避免周围微生物污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行； （4）避免已灭菌处理的材料用具与周围物品相接触。
2.消毒与灭菌的概念及两者的区别
按化学成分来分
合成培养基:
根据细胞生存所需物质的种类和数量，用人工方法模拟合 成的。 合成培养基主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无 机盐和其它一些辅助物质。 优点：标准化生产，组分和含量相对固定;成本低 缺点： 缺少某些成分，不能完全满足体外细胞生长需要。
按化学成分来分
人工合成培养基只能维持细胞生存，要想使细胞生长和繁殖， 还需补充一定量的天然培养基（如血清）。
1.制备牛肉膏蛋白胨培养基（用于培养细菌）
操作步骤
1．计算、称量 2．溶化 3．调pH： pH7．6 4．过滤：这一步可以省去。 5．分装：分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上， 以免沾污棉塞而引起污染。分装三角烧瓶的量以不超过三角 烧瓶容积的一半为宜。 6．加塞 7．包扎
按功能来分
鉴别培养基
伊红美蓝乳糖培养基 当大肠杆菌分解乳糖产酸时细菌带正电荷被染成红色，再 与美蓝结合形成紫黑色菌落，并带有绿色金属光泽。常用 的伊红美蓝乳糖培养基，可用来鉴别饮用水和乳制品中是 否存在大肠杆菌等细菌
按化学成分来分
天然培养基：
天然培养基有血清、血浆、和组织提取液（如鸡胚和牛胚浸 液）。 优点：营养成分丰富，培养效果好 缺点：来源受限;成分复杂，影响对某些实验产物的提取和实验 结果的分析;易发生支原体污染;
(2)消毒的方法：
1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min 2、巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min或 80 ℃ 下煮15min 如牛奶的消毒 3、化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消 毒;氯气消毒水源 4、紫外线消毒 ……
灭菌 ① 概念：使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，
需，而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、 嘧啶)以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。
(2)碳源
可作为碳源的物质有:
含碳无机物: 碳酸盐 碳酸氢、盐 二氧化碳 、
含碳有机物：
糖类（主要）葡萄糖 乳糖 蛋白质
脂肪酸
不同微生物所利用的碳源不同
a.异养型微生物的碳源为 b.自养型微生物的碳源为
15-30min 通常用于培养基的灭菌
大肠杆菌的培养和分离
超净工件台 倒平板
灭菌
接种液体 培养
wenku.baidu.com
划线分离 培养
培养基的 配制
菌种保存
3.微生物实验室培养的基本操作程序
1、器具的灭菌 2、培养基的配制 3、培养基的灭菌 4、倒平板 5、微生物接种 6、恒温箱中培养 7、菌种的保存
1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污 染
1.培养基的类型和用途 （1）按物理状态来分：培养基可分为固体培养基、半固体培养 基和液体培养基。其中固体培养基用于菌种分离、鉴定菌落等， 而液体培养基一般用于工业生产。 （2）按功能来分，可分为选择培养基和鉴别培养基。 （3）按化学成分来分，可分为天然培养基和合成培养基。
按物理状态来分 液体培养基：
血清中含有： ①多种蛋白质（白蛋白、球蛋白、铁蛋白等） ②多种金属离子； ③激素； ④促贴附物质，如纤粘蛋白、冷析球蛋白、胶原等。 ⑤各种生长因子 ⑥转移蛋白 ⑦不明成分
2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方 .
3.培养基内所含的基本物质
一般营养物质(1)水 (2)碳源 (3)氮源 (4)无机盐 其他物质 pH、特殊营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必
消毒
（1）消毒定义： 利用化学或物理方法，杀死大部份致病微生物的过程。区分为 高 程 度 消 毒 （ High-level Disinfection ） 、 中 程 度 消 毒 （ Intermediate-level Disinfection ） 、 低 程 度 消 毒 （ Low-level Disinfection）三种方式。
包括芽孢和孢子。 ② 方法：a 灼烧灭菌 b 干热灭菌 c 高压蒸汽灭菌
a. 灼烧灭菌 注意适用范围 微生物的接种工具 (接种环、 接种针)或其他金属用具直接 在火焰的充分燃烧层灼烧
b. 干热灭菌
160－170℃ ；1－2h 能耐高温的需要保持干燥
的物品( 玻璃器皿)
c. 高压蒸汽灭菌 100kPa 121℃
含碳有机物（有机碳） 含碳无机物（无机碳）
(3)氮源
可作为氮源的物质有:
含氮无机物： 氮气 、氨气 、 氨盐 、 硝酸盐
含氮有机物：
蛋白胨
牛肉膏 尿素
固氮微生物所利用的氮源是 氮气
培养基配制原则：
营养要协调 目的要明确 PH要适宜
无菌技术
1.无菌技术的概念 无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌 污染的方法。
外，还有什么目的？ 答：无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。
2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要， 请选择合适的方法。 （1） 培养细菌用的培养基与培养皿 （2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管 （3） 实验操作者的双手
答：（1）、（2）需要灭菌；（3）需要消毒。
实验操作
1.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 2.纯化大肠杆菌 3.将接种后的培养基和一个未接种的培养基放入
表面生长
均匀混浊生长
沉淀生长
按物理状态来分 固体培养基：菌落，菌苔
按物理状态来分 半固体培养基：
无动力 有动力(弥散)
观察细菌的运动、厌氧菌的分离和菌种鉴定
按功能来分 选择培养基
加入青霉素的培养基:分离酵母菌、霉菌等真菌 加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌 不加氮源的无氮培养基: 分离固氮菌 不加含碳有机物的无碳培养基: 分离自养型微生物 加入青霉素等抗生素的培养基: 分离导入了目的基因的受体细胞
1.1 微生物的分离和培养（Ⅰ）
一、课题目标： 了解有关培养基的基础知识，进行无菌技术的 操作，进行微生物的培养。
二、课题重点和难点： 无菌技术的操作。
三、技能目标： 掌握培养基的制备、高压蒸气灭菌和平板划线 法等基本操作技术，熟练、规范地进行无菌操 作，成功地培养微生物。
培养基
培养基（培养液）是由人工方法配制而成的，专供微生物 生长繁殖使用的混合营养液。
从制备培养基到接种与培养等全部实验过程要无菌操作
（1）对实验操作空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒 ； （2）将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌 ； （3）为避免周围微生物污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行； （4）避免已灭菌处理的材料用具与周围物品相接触。
2.消毒与灭菌的概念及两者的区别
按化学成分来分
合成培养基:
根据细胞生存所需物质的种类和数量，用人工方法模拟合 成的。 合成培养基主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无 机盐和其它一些辅助物质。 优点：标准化生产，组分和含量相对固定;成本低 缺点： 缺少某些成分，不能完全满足体外细胞生长需要。
按化学成分来分
人工合成培养基只能维持细胞生存，要想使细胞生长和繁殖， 还需补充一定量的天然培养基（如血清）。