急性肾功能衰竭动物模型的复制

机能实验学实验设计大纲实验名称：急性肾功能衰竭动物模型的复制课题来源：自选

设计班级：2004级临床本科乙班

设计人员：庞路人杜泽东朱慕风黄波梁军设计日期：2006年9月30日

指导老师：张晓荣成

成都医学院实验技术教研室

2006年制

表1-2

夹闭后（1-10min ） 心率 血压 呼吸

B1

B2

B10

表1-3 夹闭后（10-30） 心率 血压 呼吸

B1

B2

…

B10

表1-4

夹闭后（30-60min ） 心率 血压 呼吸

B1

B2

…

B10

（5）统计数据分析：本实验采用计量资料来测定各种指标的数值，所有数据均采用平均数±标准差（±a）表示，A,B 两组间实验数据比较行完全随机单因素方差分析，组间两比较行q 检验.

（1）平均数公式：x=x1+x2+…+xn/n= Σxi/n x=均数 Σ= 总和n =变量值的个数

（标准差）：a=sqr(Σ(xi-u)^2/n) a:总体标准差 xi:观测数的各个变量u:总体均数

四组间实验数据比较行完全随机单因素方差分析，如各组肺系数总体均值的比较，其方法如下：

（1）建立检验假设

H0：1μ=2μ(A.B 两组间的各项生理指标相同）。

H1：1μ、2μ、不等或不全相等，α＝0.05。

（2）计算统计量

夹闭前心率血压呼吸

A1

A2

…

A10

夹闭后（10-30min）心率血压呼吸

A1

A2

…

A10

夹闭后（30-60min）心率血压呼吸

A1

A2

…

A10

（5）统计数据分析

本实验采用计量资料来测定各种指标的数值，所有数据均采用平均数±标准差（±s）表示，A.B间实验数据比较行完全随机单因素方差分析（1）建立检验假设

μ=2μ（各组肺系数总体均值相等）。

H0：1

μ、2μ、不等或不全相等，α＝0.05

H1：1

（2）计算统计量

利用统计学专业软件SPSS做One-way ANOV A 。

( 3 ) 查F值表，确定P值，得出结论。

4、实验方法设计

家兔

实验技术方法

(1).随机抽样：随机20只正常的家兔，并分别编号，再随机平分成2组，

(2)．实验步骤：

（1）取兔、称重、麻醉、固定、备皮。取家兔两只，编号，用婴儿称体重后按1ml/kg从耳缘静脉注入3%戊巴比妥钠溶液，五点法固定于兔台上，剪去颈部和腹部被毛。

（2）手术：1. 颈正中切口，分离出气管，在甲状软骨下方第3～4个环状软骨上做一个倒“T”切口，插入“Y”字形气管插管，用线固定，接上张力换能器，设定输入信号为“张力”。2. 动脉插管：分离一侧颈总动脉，穿双线备用，结扎远心端，近心端用动脉夹夹闭，靠近结扎线处用眼科剪剪一“V”形切口，将连接好的动脉插管打满肝素，插入血管内，结扎固定，将压力换能器连上，放开动脉夹，设定输入信号为“压力”。3. 将A兔沿腹白线剖开，找到两侧肾动脉，并用动脉夹夹闭，造成A兔急性肾功能衰竭，B兔不做此手术。观察A、B两兔呼吸、心率、血压，并做记录。4.用导尿管到尿并做尿钠：尿0.1ml+无水乙醇1.9ml，振荡后置10分钟，2500r/min离心5min，取上清夜备用，按表1-4加好试剂后，混匀，于520nm处比色。计算：Na+（mmol/l）=OD测/OD标*6.5mg*20 肾衰指数=（尿钠mmol/l）/（尿肌酐/血肌酐）＞2。

5技术路线：

夹闭肾动脉→肾血流量减少→肾小球毛细血管压降低→肾小球有效滤过压降低→肾小球滤过压↓→缺血时间过长→急性肾功能衰竭

6可行行分析：

⑴本实验动物来源方便。⑵急性肾功能衰竭动物的复制流程易于操作。⑶实验

器材和药品普遍，实验室能提供充足的条件。⑷所需资金不多，防止了实验过程中

资金不足足带来的问题。

7．预期结果：

术后的兔子血压升高，呼吸加深加快，心率加快，血钾和血钠含量升高，尿少

且比重降低，肌酐的浓度低，各项症状明显易于测定。

8、时间安排，见表1-5

表1-5 时间安排表

时间工作安排

1-10min 麻醉、固定、备皮 10-30min 气管、动脉插管

30-50min 观察各项正常生理指标

50-70min 复制肾衰模型

70-130min 观察各项生理指标的变化

130-160min 尿钠测定

180-190min 完成实验、整理实验室

三、完成时间的条件：实验器械，实验动物，实验药品。

实验设备：

注射器（若干 5ml）、试管（若干）、水浴锅、分光光度计、计算机、压力感受器、张力感受器、塑料管、动脉夹、哺乳动物手术器械一套、玻片

实验动物：

家兔（20只）

实验药品：

3%戊巴比妥钠溶液、、蒸馏水、碱性苦味酸、12.5%NaOH、Na+标准液、

附表

表1-4 尿钠测定的操作表

成分标准管测定管

空白管

尿上清澈— 0.2

—

Na+标准液 0.2 —

—

蒸馏水——

0.2

2%焦锑酸钾 5.0 5.0

5.0

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