肝脏B超形态学变化、MMP—2及TIMP—2水平与肝纤维化分期的关系

肝脏B超形态学变化、MMP—2及TIMP—2水平与肝纤维化分期的关系
作者：张京红卢振方哲平
来源：《中国现代医生》2013年第17期
[摘要] 目的研究慢性乙型肝炎患者肝脏B超形态学改变、血清基质金属蛋白酶-2（MMP-2）及其组织抑制因子水平（TIMP-2）与其肝纤维化程度的关系。

方法选择我院收治的76例慢性乙型肝炎患者作为研究对象，对所有观察对象进行B超引导下肝活检及肝组织纤维化分期，B超检查测定门静脉主干、脾静脉宽度及脾脏厚度；使用ELISA检测法检测慢性乙型肝炎患者血清MMP-2和TIMP-2含量，另外选取15例健康成人作为对照，分析MMP-2、TIMP-2与患者肝纤维化程度之间的关系。

结果慢性乙型肝炎患者的脾脏厚度、门静脉主干及脾静脉宽度随患者肝纤维化分级的增加而增大；血清MMP-2、TIMP-2水平随肝纤维化程度加重而升高，r值分别为0.805、0.771，P < 0.05。

结论肝脏B超形态学改变及血清MMP-2、TIMP-2水平变化对慢性乙型肝炎患者早期肝纤维化的诊断具有重要意义。

[关键词] 超声检查；金属基质蛋白酶-2及其组织抑制因子；肝炎；乙型肝炎；肝硬化
[中图分类号] R575.2 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2013）17-0058-03
乙肝是全球分布，对人类危害严重的传染病，发展为慢性乙肝后容易发生肝脏纤维化、肝癌，判断肝纤维化程度较可靠的方法是进行肝脏活检[1-5]，但创伤较大，难以使用，基质金属蛋白酶（MMPs）及组织抑制剂（TIMPS）可调节肝细胞外基质（ECM）的代谢。

肝脏纤维化的发生是由于ECM合成增多，而降解相对减少导致肝内水平增多导致。

其中MMPS可促进ECM的降解，TIMPS可通过抑制MMPS阻止ECM的降解而加速肝脏纤维化，肝脏MMPS活性受到抑制，TIMPS功能活性增强导致细胞外基质降解减少[6，7]，在肝脏纤维化的病理发展过程中ECM降解发挥着重要作用，而其降解过程中起主要作用的MMPS是MMP-1、
MMP2、MMP3、MMP9，与肝纤维化关系最密切的是MMP2。

本文选择76例慢性乙型肝炎患者作为研究对象，分析MMP-2、T1MP-2与肝纤维化程度之间的关系，现报道如下。

1 资料与方法
1.1 一般资料
选择我院2007年5月～2009年12月入院的慢性乙型肝炎患者76例做为研究对象。

其中男46例，女30例，年龄56～71岁，平均（63.5±12.4）岁；病例入选标准：所有患者均符合1995年第四届北京全国病毒性肝炎会议制定的相关诊断标准，另外选择15例健康体检者作为对照，病例排除标准[8] ：排除病情恶化合并严重肝肾心脏疾病；肌肉骨骼疾病；合并有活动
性肝病、充血性心力衰竭、恶性肿瘤、呼吸功能衰竭的严重疾病者。

经过统计学处理，两组患者年龄、性别等基线资料差异无统计学意义（P > 0.05），具有可比性。

1.2 方法
肝脏活检病理组织学检查：在B超引导下进行经皮肝脏穿刺活组织检查术，仪器选用美国Tru-cut16G穿刺针，每例患者检查不同部位穿刺两次，穿刺标本长度要求≥1.0 cm，至少在显微镜下包括3个以上汇管区。

甲醛固定穿刺标本，石蜡包埋，连续制成3 μm石蜡切片，分别用HE染色及网状纤维染色，诊断标准按照《病毒性肝炎方案》进行肝脏纤维化分期，每张切片由两位病理科医生双盲读片。

B超检查方法由一位超声医生，于每位患者肝脏活检术前当日清晨，使用GE超声显像仪，进行空腹B超监测，包括MPV、SPV宽度和脾脏肋间厚度。

MPV内径>1.4 cm为增宽，SPV内径≥1.0 cm为增宽，脾脏肋间厚度>4.0 cm为脾脏增厚。

血清MMP2、TIMP-2的测定采用ELISA方法检测严格按照试剂盒说明书进行。

1.3 统计学方法
将所得患者检测结果录入电脑，使用SPSS15.0统计学软件进行处理。

计量资料以均数±标准差表示，计数资料采用率的形式。

计量资料包括两组肝脏的MPV、SPV宽度及脾脏肋间厚度血清MMP-2、TIMP-2水平的均数比较采用方差分析，MMP-2、TIMP2分别与肝纤维化程度作秩相关分析，计数资料脾脏增厚发生率采用χ2检验，可信区间α取0.05，P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果
2.1 肝组织纤维化分期结果
慢性乙肝患者肝组织纤维化分期结果为：S0期21例，S1期14例，S2期15例，S3期17例，S4期9例。

2.2 肝脏纤维化分期与MPV、SPV的宽度及脾脏肋间厚度的相关性
根据方差齐性检验，四组方差齐，计量资料呈正态分布，可以进行进一步统计学检验。

慢性乙肝各纤维化分期脾脏厚度同脾静脉间存在差异，从S2～S4期，MPV、SPV宽度及脾脏厚度增加，各个分期间的厚度、宽度差异具有统计学意义，脾脏增厚程度各期差异明显，S4期脾脏增厚发生率较高达到51.56%，而MPV、SPV增宽发生率相对低，分别为23.7%
（18/76），15.8%（12/76）。

见表1。

2.3 慢性乙肝患者血清MMP-2、TIMP-2水平与肝脏纤维化程度的关系
慢性乙肝患者随肝脏纤维化严重程度的增高，MMP-2、TIMP-2水平逐渐升高，S2～S4期升高幅度不断增大，同对照组比较具有显著统计学差异（P < 0.05），相关性分析显示血清
MMP-2、TIMP-2水平同肝脏纤维化程度具有明显正相关，r值分别为0.805、0.771，P <
0.05。

见表2。

3 讨论
慢性乙型肝炎是由HBV病毒引起的慢性肝脏炎症，病理基础是肝脏纤维化，它可以发展成为肝硬化直至癌变，B超可以将失代偿性肝硬化诊断出，且相应诊断价值也较高，但对于慢性肝炎患者肝纤维化程度以及门静脉高压诊断价值无明显定论。

肝脏纤维化对于门静脉系统小分支以及肝血窦会造成不同程度的压迫[9，10]，导致肝脏内部血管阻力的增加，门静脉血流量增加，最终导致门静脉高压，临床表现为门静脉和脾静脉增宽、脾脏增大。

本研究中选择无明显失代偿期肝硬化表现的慢性乙肝患者，比较不同肝脏纤维化分期中，门静脉及脾静脉内径、脾脏肿大之间的关系，结果表明，门静脉、脾静脉内径、脾脏厚度之间的关系为门静脉脾静脉内径、脾脏肋间厚度随肝脏纤维化程度的增加而逐渐升高，其中脾脏厚度增加在各期中差异较显著，这也说明脾脏的增厚是肝纤维化分期较为敏感的指标，尤其对于中、重度肝脏纤维化诊断具有重要意义。

肝脏纤维化实质以Ⅰ、Ⅲ型胶原为主的ECM合成与降解失衡[11-13]，最终导致ECM肝内沉积过度。

MMPS、TIMPS平衡于ECM合成降解中发挥重要作用。

MMPS是一类含锌离子的肽链内切酶，几乎可以水解所有细胞外基质。

TIMPS是近年被发现的能够特异性抑制MMPS 活性蛋白质，为小分子多肽，分为N端、C端两个功能区，N端的半胱氨酸残基同MMPS活性中心相结合，而C端与MMPS另外部位结合，以非共价键形式构成复合体，而阻断MMPS 同底物结合的过程。

正常肝脏中MMPS、TIMPS处于平衡状态[14，15]，二者可共同维护肝脏微环境稳态。

一旦有致病因子将这种平衡打破，会促进肝脏纤维化发生。

有研究表明，
MMP2、MMP9以及MMP3可以对正常肝脏基质降解。

其中MMPS特异性底物是Ⅳ型胶原，TIMP2可以调节MMP2活性，所以MMP2、TIMP2在肝纤维化发生发展中期重要作用，故对于MMP-2及其抑制物TIMP2于肝脏纤维化病理损害中的变化过程进行分析很有必要，我们的研究中发现，随慢性乙型肝炎患者肝脏纤维化程度的增加，MMP2、TIMP2于血清中含量逐渐增高，幅度不断加大，二者的相关性分析说明同肝脏纤维化程度呈正相关，说明MMP2、TIMP2血清水平可以作为肝脏纤维化的诊断指标。

综上所述，肝脏B超形态学改变以及血清MMP-2、TIMP2水平对慢性乙型肝炎患者的肝脏纤维化程度具有良好的诊断价值及重要临床意义，对于条件欠缺的医院由于缺乏对MMPS-TIMP2水平的监测能力，故通过肝脏B超形态学检查评估肝脏纤维化程度的具有重要的辅助诊断价值。

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（收稿日期：2013-03-15）。