乙型副伤寒沙门菌志贺菌属

高压蒸汽灭菌法
压力：1.05kg/㎡
或103.425KPa 温度: 121.3℃ 时间：15-20min 完全杀灭细菌的繁殖体和芽孢
用途：适用于耐高温、高压，不怕潮湿的物品， 如敷料、 手术器械、药品、细菌培养基等。
2)使用方法
①加水至锅内达规定的水平面，放入欲灭菌物品， 把锅盖按对称的螺旋先后对称用力（切勿单个依次） 扭紧，使锅盖确实均匀密闭。 ②用电炉加热，同时打开排气阀门，使器内冷空气 逸出，待空气全部排出后，关闭排气阀。 ③继续加热并观察压力表，器内压力又逐渐升高， 直到压力表指在所需数字（例如15磅）即调节热源， 维持20～30min．可完全杀死细菌的繁殖体和芽胞。 ④灭菌时间到达后，停止加热，待压力自行下降至 零时方可徐徐开放排气阀，排尽余气，打开锅盖，取 出灭菌物品。
室，传染病房的空气消毒及不耐热物品消毒。
紫外线对细菌的影响 方法：取一个平皿，用密涂法将细菌涂布于培养皿中，
然后按图所示揭开平皿盖，臵于紫外线下照射30分钟， 然后盖好盖子，臵37℃培养24h后取出观察结果。
纸片
（每2个同学1个平板） 滤纸片用后需要用火烧掉
平皿盖
密涂接种
分三次接种， 每次取一环。第 一次密涂接种后 旋转60度二次密 涂接种，然后同 方向旋转60度后 再次密涂接种。
化学消毒剂对细菌的影响
（每个实验室18个平皿，2人/平板）） 方法：取一普通平皿 培养基，一部分写上 “前”，另一部分写 上“后”，然后将手 指在写有“前”的部 分沾一下，再将手指 用消毒液进行消毒， 在写有“后”的部分 沾一下。放入37℃温 箱培养24小时后观察。
肥皂 70% 酒精 碘伏
新洁儿灭
牛肉浸粉 蛋白胨 乳糖 硫代硫酸钠 枸橼酸钠 煌绿 胆盐 中性红 琼脂 胆盐抑制G+,枸橼酸钠和煌绿能部分抑制大 肠杆菌,致病的沙门菌和志贺菌能大量生长。 中性红指示剂和乳糖,中性红遇酸变粉红。
常用于培养肠道致病菌。
Salmonella -Shigella Medium
主要成分 基础营养 乳糖 指示剂 抑制剂 不分解乳糖 无明显变化 志贺菌、沙门菌 无色半透明小菌落 分解乳糖 产酸
实验二
一. 消毒灭菌 二. 肠道致病菌的分离培养 三. 抗酸染色
一、消毒灭菌
1. 物理因素对细菌的影响
2. 化学因素对细菌的影响
（一） 物理因素对细菌的影响
高压蒸汽灭菌法 紫外线对细菌的影响
高压蒸气灭菌法
原理：蒸汽被限制在密闭容器内，随着热力 的作用压力不断升高，蒸汽的温度也 相应升高，在103.4kPa蒸汽压力下 时，温度可达121.3℃。维持15-20分 钟后可杀死细菌包括芽孢在内的所有 微生物。
（二） 化学因素对细菌的影响
1. 促进菌体蛋白质变性或凝固; 2. 干扰细菌酶系统和代谢; 3. 损伤细菌的细胞膜，影响细菌的化学组成， 物理结构和生理活动。
有些化学药品浓度高时能杀灭病原微生物，称 为化学消毒剂；浓度低时能抑制细菌生长，称为防 腐剂。（只能外用，对细菌的敏感性不同）
化学消毒剂分类
肠道杆菌的生物学性状
2.活泼的生化反应 乳糖发酵试验
初步鉴别肠道致病菌和肠道非致病菌
肠道致病菌 多数不发酵乳糖
肠道非致病菌
多数发酵乳糖
肠道杆菌的生物学性状
2.活泼的生化反应
菌名
大肠杆菌
葡萄糖
乳糖
硫化氢
-
⊕
+
+
⊕
-
痢疾杆菌
伤寒杆菌
-/+
SS培养基的特性 （Salmonella -Shigella Medium）
高效消毒剂：杀灭细菌芽孢在内的所有微生物，适用于 不耐热力灭菌但要进入人体内部的物品，如内窥镜等。 如：次氯酸钠、过氧化氢、甲醛、环氧乙烷等 中效消毒剂：不能杀灭芽孢，但能杀灭繁殖体（包括结 核杆菌），真菌和大多病毒，适用于喉镜，麻醉器材等。 如：碘酊、乙醇等


低效消毒剂：能杀灭大多细菌繁殖体，但不能杀灭芽 孢，结核杆菌及某些抵抗力强的真菌和病毒。 如：新洁尔灭、洗必泰、高锰酸钾等
两个相邻胸腺嘧啶以共价键结合成二聚体，从而 干扰DNA的复制与转录导致细菌变异或死亡。对 病毒也有破坏作用。
特点：紫外线杀菌作用强，而穿透能力弱。普通
玻璃、纸张、水蒸气、尘埃等均能阻挡。 紫外线中波长为240-300nm者具有杀菌能 力，其中265-266nm的杀菌作用最强。
用途：常用于消毒物体表面，手术室无菌实验
大肠杆菌等
PH下降
指示剂变红色 红色大菌落
大肠杆菌
痢疾杆菌
SS培养基的特性及用途
SS平板 大肠杆菌 痢疾杆菌 伤寒杆菌 粉红色大菌落 无色细小 半透明菌落 无色细小 半透明菌落
二、肠道致病菌的分离培养
1. 肠道致病菌的生物学性状
2. SS培养基的特性及用途
3. 分离培养方法
肠道杆菌的生物学性状
肠杆菌科重要菌属及代表菌种
埃希菌属：大肠埃希菌 沙门菌属：伤寒沙门菌 甲型、乙型副伤寒沙门菌 志贺菌属：痢疾志贺菌
百度文库
肠道杆菌的生物学性状
1.相似的形态染色—从形态上无法区别
多 有 鞭 毛 、 菌 毛 中等大小的G-杆菌
实验材料
1.抗酸染色：玻片每人1张；卡介苗（加蛋清）（1套/班）。 2.肠道致病菌的分离培养：SS培养基（2个平板/组，18个 /室）。 细菌：大肠、伤寒混合物(1个/组，8个/室)。 3.消毒灭菌： 物理：紫外线（2个平板/组，18个/室；无菌三角纸片及 镊子等1套/室）。 化学：化学消毒剂碘伏、新洁尔灭、70%酒精三种消毒 剂各1瓶/室；平板（2个平板/组， 18个/室） 4.胶布，记号笔，1套/室。
全 自 动 高 压 蒸 汽 灭 菌 锅
台式蒸汽灭菌器 BA-30
Systec D-200 2D 双门高压灭菌器
电热卧式圆形压力蒸汽灭菌器(型号YXQ-WY21-600)
全自动喷淋式高温高压调理杀菌锅
电 脑 全 自 动 水 浴 式 串 联 杀 菌 锅
紫外线对细菌的影响
原理：紫外线主要作用于DNA，使一条DNA链上的
高压蒸气灭菌器
1) 构造 高压蒸气灭菌器是一个双层的金属圆筒，两层之间盛水， 外层坚厚，其上或前方有金属厚盖。盖旁附有螺栓，借以紧 闭盖门，使蒸气不能外溢。 高压蒸气灭菌器上装有排气阀、安全阀，以调节器内压 力，装有的温度计及压力表以示内部温度和压力。 器内装有带孔的金属搁板，用以放臵欲灭菌对象。