中性粒细胞吞噬功能测定 ppt课件
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中性粒细胞吞噬功能测定 PPT课件
(1)仔细消毒后，每个班取5ml静脉血于肝素抗凝管内（轻轻摇匀）。
合液”置于洁净载玻片上，用另一载玻片推片，制成血涂片。
(4)待血涂片自然凉干后，用瑞氏染液染色。
瑞氏染色
瑞氏染液数滴覆盖血涂片上 染色1min 再加等量的
PH6.8 PBS与染液混合，染色10~15minΒιβλιοθήκη 用蒸馏水冲洗自然干燥
（平持玻片，在一端加水，使染料“漂走” ）
中性粒细胞：
A.在抗化脓性细菌感染中起重要防御作用；
B.引起感染部位急性炎症反应； C.参与超敏反应（如III型超敏反应），引 起机体免疫病理损伤。
细菌计数法测定中性粒细胞吞噬功能 ——小吞噬实验
将新鲜血液和细菌混合，经合适时间后涂片 染色，即能观察到被吞噬到中性粒细胞内但还未 被消化掉的细菌。
擦镜纸擦去残留的二甲苯，后将镜体全部复原。
油镜观察
首先寻找中性粒细胞——观察胞质中有无吞噬的细菌。如染
色正确，可见细胞核及被吞噬的细菌染成紫色，而中性粒细
胞胞浆染成淡红色。
计算吞噬百分率和吞噬指数
注意事项
(1) 人类白细胞的吞噬活性在 37 ℃时最好，温度过高过低均 会使其吞噬能力减低。 (2)个体差异、年龄、健康状况的不同，其吞噬能力亦不同。 (3)掌握好细菌与中性粒细胞的作用时间。 中性粒细胞对细菌的吞噬是一个非常迅速的过程，吞噬5min 时吞噬率达45%，10min时接近80%，20min 即达平台。 (4)取“细菌－全血”涂片时，要混匀后再取；制作血涂片要 求推出尾部，过厚或过薄，均不利观察。
生命周期短，不能分裂，靠“造血”补充；
胞核呈多叶状；胞质内有多种颗粒；
内含髓过氧化物酶、防御素、溶菌酶、组织蛋白酶、乳铁 蛋白、碱性磷酸酶等。 中性粒细胞特有，巨噬细胞没有这种酶， 为中性粒细胞在细胞化学上的标志。
中性粒细胞吞噬功能测定_PPT幻灯片
实验的
熟悉中性粒细胞的生物学特性及其意义、观察 机体的非特异性免疫现象
掌握血液中的中性粒细胞体外吞噬异物能力的 测定方法及用途
小吞噬细胞
即是中性粒细胞； 来源于骨髓造血干细胞； 占白细胞总数的60%~70%； 生命周期短，不能分裂；
中性粒细胞生物学特性：
A、在抗化脓性细菌感染中起主要 防御作用
B、引起感染部位急性炎症反应 C、参与超敏反应（如Ⅲ型超敏反 应），引起机体免疫病理损伤。
细胞核呈多叶状，胞质内含多种颗 颗粒粒内：含髓过氧化物酶、防御素、溶菌酶、
组蛋白酶、乳铁蛋白、碱性磷酸酶等。
中性粒细胞所特有，巨噬细胞没有这种酶， 为中性粒细胞在细胞化学法上的标志。
实验原理
吞噬细胞可以通过趋化、调理、吞入和杀菌等 步骤，能吞噬和消化衰老、损伤及病原微生物 等异物，是机体固有免疫的重要组成部分。在 一定条件下，将白细胞悬液与细菌混合，保持 一段时间后，取样涂片染色镜检，可以测定中 性粒细胞吞噬细菌的百分率和吞噬指数。该实 验可助诊断吞噬细胞功能障碍的疾病。
That’s all. Thank you!
注意事项
1、中性粒细胞吞噬活性在37℃时最好，温度过 高或者过低均会使其吞噬能力减低；
2、个体差异、年龄、健康状况的不同，其吞噬 能力不同；
3、掌握好中性粒细胞与细菌的作用时间（中性 粒细胞对细菌吞噬非常迅速，5min左右吞噬率 达45%，10min左右接近80%，20min左右即达平 台）。
4、制片之前要混匀，涂片过薄、过厚都会影响 观察。
实验结果
在油镜下可细胞核及被吞噬的细菌被染成紫色， 而中性粒细胞的胞浆被染成淡红色。
被 吞 入 细 菌
指标检测
1、吞噬百分率= 100个中性粒细胞中吞噬了细菌的细胞数 100
熟悉中性粒细胞的生物学特性及其意义、观察 机体的非特异性免疫现象
掌握血液中的中性粒细胞体外吞噬异物能力的 测定方法及用途
小吞噬细胞
即是中性粒细胞； 来源于骨髓造血干细胞； 占白细胞总数的60%~70%； 生命周期短，不能分裂；
中性粒细胞生物学特性：
A、在抗化脓性细菌感染中起主要 防御作用
B、引起感染部位急性炎症反应 C、参与超敏反应（如Ⅲ型超敏反 应），引起机体免疫病理损伤。
细胞核呈多叶状，胞质内含多种颗 颗粒粒内：含髓过氧化物酶、防御素、溶菌酶、
组蛋白酶、乳铁蛋白、碱性磷酸酶等。
中性粒细胞所特有，巨噬细胞没有这种酶， 为中性粒细胞在细胞化学法上的标志。
实验原理
吞噬细胞可以通过趋化、调理、吞入和杀菌等 步骤，能吞噬和消化衰老、损伤及病原微生物 等异物，是机体固有免疫的重要组成部分。在 一定条件下，将白细胞悬液与细菌混合，保持 一段时间后，取样涂片染色镜检，可以测定中 性粒细胞吞噬细菌的百分率和吞噬指数。该实 验可助诊断吞噬细胞功能障碍的疾病。
That’s all. Thank you!
注意事项
1、中性粒细胞吞噬活性在37℃时最好，温度过 高或者过低均会使其吞噬能力减低；
2、个体差异、年龄、健康状况的不同，其吞噬 能力不同；
3、掌握好中性粒细胞与细菌的作用时间（中性 粒细胞对细菌吞噬非常迅速，5min左右吞噬率 达45%，10min左右接近80%，20min左右即达平 台）。
4、制片之前要混匀，涂片过薄、过厚都会影响 观察。
实验结果
在油镜下可细胞核及被吞噬的细菌被染成紫色， 而中性粒细胞的胞浆被染成淡红色。
被 吞 入 细 菌
指标检测
1、吞噬百分率= 100个中性粒细胞中吞噬了细菌的细胞数 100
医学免疫学实验课件-实验五 中性粒细胞吞噬检测
瑞氏染色
油镜观察
目 录 末页
肝素抗凝血：
外周血2ml + 肝素少量
目 录 末页
推血片：
1.左手的拇指和中指夹持载玻片的边缘，血滴 在离载玻片一端中4～5毫米处。
2.另取一边缘光滑平整的玻片作推片，将推片 一角置于血滴，向下使之接触到载玻片，使血液 均匀分散在推片与载片的接触处。
3.使推片与载玻片呈30～40°角，向另一端平 稳地推出。
目 录 末页
中性粒细胞吞噬功能的检测
吞噬细 菌的中 性粒细 胞
目 录 末页
光学显微镜油镜的使用和保护
一、油镜头的识别 镜头下缘有一圈白线，
并刻有100×、或oil字样。
目 录 末页
二、油镜的使用
检查染色标本时，光度宜强。 显微镜亮度开关调至最亮，光圈完全打开， 集光器上升与载物台相平。
目 录 末页
——细胞免疫检测技术
天然免疫功能测定
检测机体天然免疫功能的状态，是评价机体 免疫功能的重要组成部分。
目 录 末页
天然免疫功能测定
常用方法：
中性粒细胞吞噬功能检测 巨噬细胞吞噬功能检测 溶菌酶的测定 补体参与的反应
目 录 末页
中性粒细胞吞噬功能的检测
中性粒细胞吞噬细菌的现象称为小吞噬现 象，可以通过体外实验观察其吞噬细菌的情 况并测定吞噬功能。
目 录 末页
四、显微镜的维护
1.精密仪器要注意爱护，勿随意拆卸和碰撞。 2.细调节器是显微镜最精细的部分，不能往返 连续回转。 3.显微镜使用过程中，如发现问题应及时向老 师报告并进行登记，以便检修。
目 录 末页
三、油镜的使用原理
光线通过玻片与油镜头之 间的空气时，因介质密度不 同发生折射，使物象显现不 清。
油镜观察
目 录 末页
肝素抗凝血：
外周血2ml + 肝素少量
目 录 末页
推血片：
1.左手的拇指和中指夹持载玻片的边缘，血滴 在离载玻片一端中4～5毫米处。
2.另取一边缘光滑平整的玻片作推片，将推片 一角置于血滴，向下使之接触到载玻片，使血液 均匀分散在推片与载片的接触处。
3.使推片与载玻片呈30～40°角，向另一端平 稳地推出。
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中性粒细胞吞噬功能的检测
吞噬细 菌的中 性粒细 胞
目 录 末页
光学显微镜油镜的使用和保护
一、油镜头的识别 镜头下缘有一圈白线，
并刻有100×、或oil字样。
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二、油镜的使用
检查染色标本时，光度宜强。 显微镜亮度开关调至最亮，光圈完全打开， 集光器上升与载物台相平。
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——细胞免疫检测技术
天然免疫功能测定
检测机体天然免疫功能的状态，是评价机体 免疫功能的重要组成部分。
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天然免疫功能测定
常用方法：
中性粒细胞吞噬功能检测 巨噬细胞吞噬功能检测 溶菌酶的测定 补体参与的反应
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中性粒细胞吞噬功能的检测
中性粒细胞吞噬细菌的现象称为小吞噬现 象，可以通过体外实验观察其吞噬细菌的情 况并测定吞噬功能。
目 录 末页
四、显微镜的维护
1.精密仪器要注意爱护，勿随意拆卸和碰撞。 2.细调节器是显微镜最精细的部分，不能往返 连续回转。 3.显微镜使用过程中，如发现问题应及时向老 师报告并进行登记，以便检修。
目 录 末页
三、油镜的使用原理
光线通过玻片与油镜头之 间的空气时，因介质密度不 同发生折射，使物象显现不 清。
中性粒细胞吞噬功能测定
中性粒细胞生物学特性：
A、在抗化脓性细菌感染中起主要 防御作用
B、引起感染部位急性炎症反应 C、参与超敏反应（如Ⅲ型超敏反 应），引起机体免疫病理损伤。
细胞核呈多叶状，胞质内含多种颗粒
：颗粒内含髓过氧化物酶、防御素、溶菌酶、
组蛋白酶、乳铁蛋白、碱性磷酸酶等。
中性粒细胞所特有，巨噬细胞没有这种酶， 为中性粒细胞在细胞化学法上的标志。
置于pH=6.4 PB中， 3min后取出。
置于瑞氏液中，1min后取 出。
取凹玻片一张，在凹孔中加1 滴（0.4ml）3.8%枸缘酸钠或
者肝素（25U/ml）
酒精棉球消毒左手无名指后，用 采血针在消毒部位取血2~3滴
（约0.2ml），加入凹孔中混匀。
加表皮葡萄糖液1滴 （0.02~0.04ml），后用牙签轻轻
1、菌液：表皮葡萄球菌菌液（9亿/ml）
2、抗凝剂：3.8%枸缘酸钠或肝素（25U/ml）
3、毛细吸管、凹玻片、载玻片、牙签、甲醇、瑞特-吉姆萨 染料、pH=6.4 PB、酒精棉球、采血针、显微镜、香柏油 、洗镜油等。
实验流程
蒸馏水洗（平持玻片，在一端加 水，使染液“漂走”），待干，
镜检。
置于吉姆萨染液中， 5~10min后取出
实验原理
吞噬细胞可以通过趋化、调理、吞入和杀菌等步骤，能吞噬 和消化衰老、损伤及病原微生物等异物，是机体固有免疫 的重要组成部分。在一定条件下，将白细胞悬液与细菌混 合，保持一段时间后，取样涂片染色镜检，可以测定中性 粒细胞吞噬细菌的百分率和吞噬指数。该实验可助诊断吞 噬细胞功能障碍的疾病。
实验材料
小吞噬细胞吞噬功能测定 ——细菌计数法
2014级麻醉学1班——张先刚 学号：1410550160
中性粒细胞功能测定
实验一、中性粒细胞吞噬功能测定Assay for Phagocytosis of Polymorphonuclear Leukocyte 【实验目的】•掌握中性粒细胞吞噬功能试验的原理；•熟悉中性粒细胞吞噬功能试验的操作方法；•通过本实验理解机体的非特异性免疫机制。
【实验原理】血液中的中性粒细胞通称小吞噬细胞，具有吞噬细菌和异物颗粒的能力，在体外将中性粒细胞与细菌或异物颗粒在一定条件下共同孵育后，显微镜观察可见中性粒细胞内有细菌或异物颗粒。
计数吞噬率和吞噬指数，可反映中性粒细胞的吞噬功能。
有助于对疑有吞噬细胞功能障碍的疾病作出诊断。
【材料和试剂】1.待测样本新鲜抗凝静脉血2.被吞噬物灭活白色葡萄球菌菌液（6×108/ml）。
3.试剂无菌生理盐水，甲醇，瑞氏－吉姆萨染液。
4.器材EP管，75%酒精棉球、载玻片，微量移液器、恒温箱，显微镜（香柏油，二甲苯）等。
【操作步骤】1.白色葡萄球菌液制备。
（已制备好）2.待测血标本制备：静脉采血5ml。
3.在EP管内加40微升血液，20微升菌液，混匀。
4.将EP管置37℃温育30min，每隔10min混匀一次。
5.取一小滴上述混合液，置于载玻片上，推成薄血片，晾干。
6.甲醇固定4-5min，滴加瑞氏-吉姆萨染液A液2-3滴，染色1-2min，再B液2-3滴，染色5-10min，水洗，晾干。
7.油镜下计数中性粒细胞(＞100个)、吞噬的细菌总数。
【推血片方法】取血混合液一小滴，放于载玻片的右端。
将推片置于血滴前端，与载玻片接触，成30°～40°角 向后拉动推片，使与血液接触 •待血液扩散形成一条线之后，以均速轻轻向前推动推片，则血液均匀地被涂于载玻片上而形成一薄膜。
取两张无油脂的洁净玻片，左手拇指及中指夹持载玻片，右手持推片。
30°血滴越大，速度越快、角度越大--血膜越厚良好的血片，血液应分布均匀，厚度适当。
对光观察时呈霓红色，血膜应位于玻片的中央，血膜两端留有空隙，以便注明病例编号、日期等。
吞噬细胞PPT课件
免疫系统吞噬细胞中性粒细胞单核细胞与巨噬细胞免疫系统免疫器官免疫细胞免疫分子吞噬细胞b细胞t细胞免疫球蛋白补体细胞因子粘附分子等作用过程小吞噬细胞是外周血中的大吞噬细胞是血中的和多种器官组织中的中性粒细胞中性粒细胞来源于骨髓具有分叶形或杆状的核胞浆内含有大量既不嗜碱也不嗜酸的中性细颗粒中性粒细胞中性粒细胞具有活跃的变形运动和吞噬功能起重要的防御作用
单核细胞
单核细胞能吞噬异物，在机体损伤治愈、抗御病 原的入侵和对疾病的免疫方面起着重要的作用。
单核细胞可以通过毛细血管的内皮间隙，从血管 内渗出，在组织间隙中游走。它们吞噬侵入的细 菌、病毒、寄生虫等病原体和一些坏死的组织碎 片。
由于细菌体或死亡的细胞所产生的化学刺激，诱 发单核细胞向该处移动。组织发炎时产生一种活 性多肽，也是单核细胞游动的诱发物质之一。机 体发生炎症或其他疾病都可引起单核细胞总数百 分比发生变化
巨噬细胞
巨噬细胞
巨噬细胞
巨噬细胞属免疫细胞，有多种功能，是研究细胞 吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。
是一种位于组织内的白血球，主要功能是以固定 细胞或游离细胞的形式对细胞残片及病原体进行 噬菌作用（即吞噬以及消化），并激活淋巴球或 其他免疫细胞，令其对病原体作出反应。
吞噬抗原后将所携带的抗原决定簇转交给淋巴细 胞，诱导淋巴细胞的特异性免疫反应
巨噬细胞是对付细胞内致病细菌和寄生虫的主要 细胞防卫系统，还具有识别和杀伤肿瘤细胞的能 力。
吞噬细胞
完全吞噬
吞
噬
不完全吞噬
现
象Hale Waihona Puke 对人体不利的免疫病理性损伤
2019/11/14
.
16
中性粒细胞
中性粒细胞来源于骨髓，具有分叶形或杆状的核，胞浆 内含有大量既不嗜碱也不嗜酸的中性细颗粒 。
单核细胞
单核细胞能吞噬异物，在机体损伤治愈、抗御病 原的入侵和对疾病的免疫方面起着重要的作用。
单核细胞可以通过毛细血管的内皮间隙，从血管 内渗出，在组织间隙中游走。它们吞噬侵入的细 菌、病毒、寄生虫等病原体和一些坏死的组织碎 片。
由于细菌体或死亡的细胞所产生的化学刺激，诱 发单核细胞向该处移动。组织发炎时产生一种活 性多肽，也是单核细胞游动的诱发物质之一。机 体发生炎症或其他疾病都可引起单核细胞总数百 分比发生变化
巨噬细胞
巨噬细胞
巨噬细胞
巨噬细胞属免疫细胞，有多种功能，是研究细胞 吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。
是一种位于组织内的白血球，主要功能是以固定 细胞或游离细胞的形式对细胞残片及病原体进行 噬菌作用（即吞噬以及消化），并激活淋巴球或 其他免疫细胞，令其对病原体作出反应。
吞噬抗原后将所携带的抗原决定簇转交给淋巴细 胞，诱导淋巴细胞的特异性免疫反应
巨噬细胞是对付细胞内致病细菌和寄生虫的主要 细胞防卫系统，还具有识别和杀伤肿瘤细胞的能 力。
吞噬细胞
完全吞噬
吞
噬
不完全吞噬
现
象Hale Waihona Puke 对人体不利的免疫病理性损伤
2019/11/14
.
16
中性粒细胞
中性粒细胞来源于骨髓，具有分叶形或杆状的核，胞浆 内含有大量既不嗜碱也不嗜酸的中性细颗粒 。
中性粒细胞吞噬功能试验ppt课件
干燥物镜A与油浸物镜B的光线通路 注：使用完毕后清洁油镜！！！9
此课件下载可自行编辑修改，供参考！ 感谢您的支持，我们努力做得更1
• 实验原理
中性粒细胞具有吞噬杀菌功能，当与颗粒性物质（如 葡萄球菌等）混合孵育一定时间后，颗粒性物质被吞噬杀 灭，根据吞噬率、吞噬指数可反映该细胞的吞噬功能。
2
3
• 实验方法
1、取样
2、孵育
① 肝素 0.02ml ② 无菌采血 0.04ml ③ 菌液 0.02ml
3、制片
4、镜检
单凹玻片
370C孵育30分 钟
湿盒
恒温箱
4
3、制片 •取一小滴上述混合液，置于载玻片上，用另一载玻片推 成薄血片，待干。 •滴加甲醇固定5min，水洗。 •加碱性美蓝染色5min，水洗印干。
5
4、镜检
红细胞 中性粒细胞 葡萄球菌
6
7
8
• 油镜的使用 以香柏油为观察介质，微生物图像更清晰明亮。
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• 实验原理
中性粒细胞具有吞噬杀菌功能，当与颗粒性物质（如 葡萄球菌等）混合孵育一定时间后，颗粒性物质被吞噬杀 灭，根据吞噬率、吞噬指数可反映该细胞的吞噬功能。
2
3
• 实验方法
1、取样
2、孵育
① 肝素 0.02ml ② 无菌采血 0.04ml ③ 菌液 0.02ml
3、制片
4、镜检
单凹玻片
370C孵育30分 钟
湿盒
恒温箱
4
3、制片 •取一小滴上述混合液，置于载玻片上，用另一载玻片推 成薄血片，待干。 •滴加甲醇固定5min，水洗。 •加碱性美蓝染色5min，水洗印干。
5
4、镜检
红细胞 中性粒细胞 葡萄球菌
6
7
8
• 油镜的使用 以香柏油为观察介质，微生物图像更清晰明亮。
医学检验·检查项目：中性炎症细胞吞噬试验_课件模板
医学检验·各论 中性炎症细胞吞噬试
验 内容课件模板
医学检验·各论：中性炎症细胞吞噬试验 >>>
简介：
中性粒细胞是机体免疫系统的重要组 成部分，可直接吞噬和杀灭多种病原微生 物、抗原抗体复合物。本试验主要用于诊 断中性粒细胞吞噬功能障碍性疾病。
医学检验·各论：中性炎症细胞吞噬试验 >>>
临床意义：
医学检验·各论：中性炎症细胞吞噬试验 >>>
相关疾病：
慢性细菌性前列腺炎、细菌性角膜炎、志 贺菌病、枸橼酸杆菌肺炎、细菌协同性坏 疽、老年人细菌性脑膜炎、肾皮质化脓性 感染、外阴炎、脓疱性细菌疹、新生儿化 脓性脑膜炎、细菌性阴道炎、小儿细菌性 痢疾、小儿细菌感染性口炎、细菌性肺炎、 细菌性肝脓肿、细菌性角膜溃疡、细菌性 痢疾、小儿尿路感染、膜性口炎、盲襻综 合征。
吞噬与杀菌功能缺陷，常见于慢性肉 芽肿、肌动蛋白功能不全症、膜糖蛋白缺 陷症、G6PD高度缺陷症、ChediakHigashi综合征等。对白色假丝酵母菌的 吞噬与杀菌缺陷，也见于较严重的白色假 丝酵母菌感染与恶性肿瘤患者。
医学检验·各论：中性炎症细胞吞噬试验 >>>
正常值： 吞噬率(n=50);(91.04±5.77)% 杀菌
率(n=50)：(32.72±7.83)% 最好根据本 实验室条件，自行调查。
医学检验·各论：中性炎症细胞吞噬试验 >>>
相关检查： 中性粒细胞核鼓槌小体、中性粒细胞杀菌 试验、中性粒细胞趋化试验。
医学检验·各论：中性炎症细胞吞噬试验 >>>
相关症状： 烧灼性疼痛、发热伴有腹痛、腹泻、恶心、 呕吐、发热伴尿频、尿急、尿痛、腰疼、 发热伴寒战、发热伴
验 内容课件模板
医学检验·各论：中性炎症细胞吞噬试验 >>>
简介：
中性粒细胞是机体免疫系统的重要组 成部分，可直接吞噬和杀灭多种病原微生 物、抗原抗体复合物。本试验主要用于诊 断中性粒细胞吞噬功能障碍性疾病。
医学检验·各论：中性炎症细胞吞噬试验 >>>
临床意义：
医学检验·各论：中性炎症细胞吞噬试验 >>>
相关疾病：
慢性细菌性前列腺炎、细菌性角膜炎、志 贺菌病、枸橼酸杆菌肺炎、细菌协同性坏 疽、老年人细菌性脑膜炎、肾皮质化脓性 感染、外阴炎、脓疱性细菌疹、新生儿化 脓性脑膜炎、细菌性阴道炎、小儿细菌性 痢疾、小儿细菌感染性口炎、细菌性肺炎、 细菌性肝脓肿、细菌性角膜溃疡、细菌性 痢疾、小儿尿路感染、膜性口炎、盲襻综 合征。
吞噬与杀菌功能缺陷，常见于慢性肉 芽肿、肌动蛋白功能不全症、膜糖蛋白缺 陷症、G6PD高度缺陷症、ChediakHigashi综合征等。对白色假丝酵母菌的 吞噬与杀菌缺陷，也见于较严重的白色假 丝酵母菌感染与恶性肿瘤患者。
医学检验·各论：中性炎症细胞吞噬试验 >>>
正常值： 吞噬率(n=50);(91.04±5.77)% 杀菌
率(n=50)：(32.72±7.83)% 最好根据本 实验室条件，自行调查。
医学检验·各论：中性炎症细胞吞噬试验 >>>
相关检查： 中性粒细胞核鼓槌小体、中性粒细胞杀菌 试验、中性粒细胞趋化试验。
医学检验·各论：中性炎症细胞吞噬试验 >>>
相关症状： 烧灼性疼痛、发热伴有腹痛、腹泻、恶心、 呕吐、发热伴尿频、尿急、尿痛、腰疼、 发热伴寒战、发热伴
上课 免疫细胞观察PPT课件
16
结束语
当你尽了自己的最大努力时，失败也是伟大的， 所以不要放弃，坚持就是正确的。
When You Do Your Best, Failure Is Great, So Don'T Give Up, Stick To The End 演讲人：XXXXXX 时 间：XX年XX月XX日
17
13
淋巴细胞
14
E花环(电子显微镜）
15
学习总结
经常不断地学习,你就什么都知道。你知道得越多,你就越有力量 Study Constantly, And You Will Know Everything. The More
You Know, The More Powerful You Will Be
免疫学实验
1
免疫细胞观察
❖ 一、大吞噬现象 ❖ 二、小吞噬现象 ❖ 三、E玫瑰花环现象
2
巨噬细胞
3
巨噬细胞的伪足
4
5
巨噬细胞正在吞噬衰老的红细胞
6
单核巨噬细胞吞噬过程示意图
7
大吞噬现象
腹腔注射淀粉肉汤
1ml/次/天(3天)
诱生巨噬细胞
腹腔注射1％鸡RBC悬液 轻揉小鼠腹部
0.5~1ml
30min
颈椎 脱臼
腹腔注入生理盐水
处死
0.5~1ml
取材、滴片 盖片、镜检
8
大吞噬现象：油镜观察
9
中性粒细胞
10
中性粒细胞吞噬细菌
11
二、小吞噬现象
耳垂取血 吸出0.4ml
混匀于含抗 凝剂的试管
Байду номын сангаас
加入一滴葡萄球菌菌液 涂片
加染液
1min后加蒸馏水
结束语
当你尽了自己的最大努力时，失败也是伟大的， 所以不要放弃，坚持就是正确的。
When You Do Your Best, Failure Is Great, So Don'T Give Up, Stick To The End 演讲人：XXXXXX 时 间：XX年XX月XX日
17
13
淋巴细胞
14
E花环(电子显微镜）
15
学习总结
经常不断地学习,你就什么都知道。你知道得越多,你就越有力量 Study Constantly, And You Will Know Everything. The More
You Know, The More Powerful You Will Be
免疫学实验
1
免疫细胞观察
❖ 一、大吞噬现象 ❖ 二、小吞噬现象 ❖ 三、E玫瑰花环现象
2
巨噬细胞
3
巨噬细胞的伪足
4
5
巨噬细胞正在吞噬衰老的红细胞
6
单核巨噬细胞吞噬过程示意图
7
大吞噬现象
腹腔注射淀粉肉汤
1ml/次/天(3天)
诱生巨噬细胞
腹腔注射1％鸡RBC悬液 轻揉小鼠腹部
0.5~1ml
30min
颈椎 脱臼
腹腔注入生理盐水
处死
0.5~1ml
取材、滴片 盖片、镜检
8
大吞噬现象：油镜观察
9
中性粒细胞
10
中性粒细胞吞噬细菌
11
二、小吞噬现象
耳垂取血 吸出0.4ml
混匀于含抗 凝剂的试管
Байду номын сангаас
加入一滴葡萄球菌菌液 涂片
加染液
1min后加蒸馏水
实验八中性粒细胞吞噬功能检测PPT课件
• 中性粒细胞具有吞噬细菌和异物颗粒的能力。 此法操作简便，不需特殊设备，省时，费用低廉。
参考区间：吞噬率（91 + 5. 恒温箱、显微镜等。 实验八中性粒细胞吞噬功能检测 计数的中性粒细胞吞噬细菌总数 准备被检测标本：枸橼酸钠抗凝血1ml。 制备细胞推片，瑞-吉染色：
参准考备区 被间检：测吞标•噬本率：在（枸橼9体1酸+钠5外.抗凝将血1m中l。 性粒细胞与细菌或异物颗粒共同孵育后，
此法操作简便，不需特殊设备，省时，费用低廉。 准备被检测标本：枸橼酸钠抗凝血1ml。
准备被检测标本：枸橼酸钠抗凝血1ml。
但光学显微镜分辨率低，有时难以计数吞入的细菌
颗粒。
五、结果判断
中性粒细胞核深染且分叶，胞浆淡红色，细菌呈紫色
-
吞噬细菌的中性粒细胞数
吞噬百分率（%）=
×100％
计数的中性粒细胞总数
吞噬指数=
计数的中性粒细胞吞噬细菌总数 计数的中性粒细胞总数
参考区间：吞噬率（91 +- 5.8）%；吞噬指数大于1
六、注意事项
准备被检测标本：枸橼酸钠抗凝血1ml。
实验八中性粒细胞吞噬功能检测
实验八 中性粒细胞吞噬功能检测
临床微生物及免疫学检验教研室
一、实验目的
1. 掌握中性粒细胞吞噬功能试验的原理。 2. 熟悉中性粒细胞吞噬功能试验的操作方法。
二、实验原理
被吞噬物 ： 金黄色葡萄球菌 试剂：瑞－吉氏染液、无菌生理盐水 试剂：瑞－吉氏染液、无菌生理盐水 准备被检测标本：枸橼酸钠抗凝血1ml。
被吞噬物 ： 金黄色葡萄球菌
参考区间：吞即噬率可（91被+ 5. 中性粒细胞吞噬、摄入，显微镜观察可见中
性粒细胞内有细菌或异物颗粒。
参考区间：吞噬率（91 + 5. 恒温箱、显微镜等。 实验八中性粒细胞吞噬功能检测 计数的中性粒细胞吞噬细菌总数 准备被检测标本：枸橼酸钠抗凝血1ml。 制备细胞推片，瑞-吉染色：
参准考备区 被间检：测吞标•噬本率：在（枸橼9体1酸+钠5外.抗凝将血1m中l。 性粒细胞与细菌或异物颗粒共同孵育后，
此法操作简便，不需特殊设备，省时，费用低廉。 准备被检测标本：枸橼酸钠抗凝血1ml。
准备被检测标本：枸橼酸钠抗凝血1ml。
但光学显微镜分辨率低，有时难以计数吞入的细菌
颗粒。
五、结果判断
中性粒细胞核深染且分叶，胞浆淡红色，细菌呈紫色
-
吞噬细菌的中性粒细胞数
吞噬百分率（%）=
×100％
计数的中性粒细胞总数
吞噬指数=
计数的中性粒细胞吞噬细菌总数 计数的中性粒细胞总数
参考区间：吞噬率（91 +- 5.8）%；吞噬指数大于1
六、注意事项
准备被检测标本：枸橼酸钠抗凝血1ml。
实验八中性粒细胞吞噬功能检测
实验八 中性粒细胞吞噬功能检测
临床微生物及免疫学检验教研室
一、实验目的
1. 掌握中性粒细胞吞噬功能试验的原理。 2. 熟悉中性粒细胞吞噬功能试验的操作方法。
二、实验原理
被吞噬物 ： 金黄色葡萄球菌 试剂：瑞－吉氏染液、无菌生理盐水 试剂：瑞－吉氏染液、无菌生理盐水 准备被检测标本：枸橼酸钠抗凝血1ml。
被吞噬物 ： 金黄色葡萄球菌
参考区间：吞即噬率可（91被+ 5. 中性粒细胞吞噬、摄入，显微镜观察可见中
性粒细胞内有细菌或异物颗粒。
中性粒细胞：免疫ppt课件
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7
嗜中性白细胞抗体的临床影响
非溶血性输血反应发热 输血相关的急性肺损伤(TRALI) 新生儿同种免疫性嗜中性白血球减少症 自身免疫嗜中性白血球减少症 骨髓移植后嗜中性白血球减少症
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8
嗜中性白细胞抗体的实验室诊断
粒细胞免疫荧光试验(GIFT) 粒细胞凝集试验(GAT) 淋巴细胞免疫荧光试验(LIFT) 单克隆抗体固定粒细胞抗原法(MAIGA) ELISA
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40
嗜中性粒细胞血清蛋白蛋白酶
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41
NB1 在中性粒细胞移行过程中的作用
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42
嗜中性粒细胞胞外的凝血酶受体激活肽
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43
感谢亲观看此幻灯片，此课件部分内容来源于网络， 如有侵权请及时联系我们删除，谢谢配合！
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34
抗-NB1细胞
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35
由抗NB1 诱导的TRALI ： 小鼠肺模型
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36
抗NB1 阻止中性白细胞移行
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37
中性白细胞通过血小板-内皮细胞粘 附分子在脐静脉内皮细胞移行
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38
血小板-内皮细胞粘附分子亚型
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39
PR3 和CD177 复合物形成
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9
嗜中性粒细胞同种抗体
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10
粒细胞免疫荧光试验(GIFT)
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11
粒细胞免疫荧光试验(GIFT)
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12
粒细胞凝集试验(GAT)
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13
粒细胞凝集试验(GAT)
小吞噬细胞实验幻灯片课件
2. 个体差异、年龄、健康状况的不同，其吞噬能 力亦不同。
3. 掌握好细菌与中性粒细胞的作用时间。中性粒 细胞对细菌的吞噬是一个非常迅速的过程，吞 噬5min时吞噬率达45%，10min时接近80%， 20min 即达饱和。
4. 取“细菌－全血”涂片时，要混匀后再取；制 作血涂片要求推出尾部，过厚或过薄，均不利 观察。
料
pH6.4PB、酒精棉球、采血针等。
1、取样
2、孵育
3、制片
4、镜检
实 验 步 骤
① 3.8%枸橼酸钠或肝素 0.4ml ② 无菌采血 0.2ml ③ 菌液 0.02-0.04ml
单凹玻片
370C孵育30-45min
湿盒
孵箱
制 片
1. 取一小滴上述混合液，置于载玻片上，用另一载玻片推 成薄血片，自然干燥。
小吞噬实验
一．掌握血液中的中性粒细胞体外吞
实 噬异物能力的测定方法。 二．观察机体的非特异性免疫现象。
验 目 的
一．人外周血中性粒细胞吞噬功能检
实 测（体外实验）。 二．小鼠腹腔中性粒细胞吞噬功能的
验
检测（体内实验）。
内
容
• 来 源： 骨髓。
• 存在部位： 血液 、 炎症部位（全
小 身）。 吞 • 功能基础：溶酶体，过氧化物酶及
1. 诱导：实验前一天给小白鼠腹腔注射无菌肉汤0.51.0ml，轻揉腹部。
2. 实验前4-5h给小白鼠腹腔注射无菌肉汤0.5-1.0ml，
轻揉腹部。
实 3. 注射：实验时给小白鼠腹腔内注射表皮葡菌菌液
验
0.5ml，轻揉腹部。
步 4. 取样： 注射后35 -45min处死小白鼠，用毛细吸管 骤 抽取腹腔液滴片或直接涂片
免疫细胞及其功能检验技术—吞噬细胞功能检测(免疫学检验课件)
方法： 1.抗凝血 + 硝基蓝四氮唑（NBT），温育25min； 2.推片染色、镜检（含甲臜颗粒的中性粒细胞）。
正常值： NBT阳性细胞率应7%~15%
二、巨噬细胞功能检测
• 炭粒廓清试验：主要用于动物实验 • 吞噬功能检测：（吞噬鸡红细胞或白假丝酵母等） • 促凝血活性测定：
（一）炭粒廓清试验
在受检者前臂屈侧中央3㎜范围内，搔刮皮肤后， 用盖玻片压紧固定，在第2，5，8，12，24，36小时 各取样一次，染色观察中性粒细胞聚集开始时间、 聚集程度等。健康正常人一般2～3小时后开始聚集， 达50～100个，6小时可达1000个以上。
体外法--Boyden小室法
Boyden 小室
体外法--琼脂糖平板法
液混合，温育后涂片、固定和染色。在油镜下观察
中性粒细胞对细菌的吞噬情况，计数100个细胞中吞
噬和未吞噬细菌的中性粒细胞数，并记录吞噬的细
菌数。
吞噬率
吞噬细菌的中性粒细胞数 计数的中性粒细胞数
100%
吞噬指数
吞噬的细菌总数 吞噬细菌的中性粒细胞数
100%
（三）中性粒细胞杀伤功能检测 硝基蓝四氮唑（NBT）还原试验
正常小鼠肝中库普弗细胞可吞噬清除90％炭粒， 脾巨噬细胞约吞噬清除10％炭粒。据此给小鼠静脉注 射定量印度墨汁（炭粒悬液），间隔一定时间反复取 静脉血，测定血中炭粒的浓度，根据血流中炭粒被廓 清的速度，判断巨噬细胞的功能。
主要用于动物实验
（二）巨噬细胞吞噬功能检测
巨噬细胞
＋
鸡红细胞或 白假丝酵母
孵育
等），B细胞（增殖、分泌抗体能力），NK（杀伤）， 中性粒细胞（趋化、吞噬、杀伤），巨噬细胞（吞噬 功能--炭粒廓清、鸡红细胞吞噬实验）
正常值： NBT阳性细胞率应7%~15%
二、巨噬细胞功能检测
• 炭粒廓清试验：主要用于动物实验 • 吞噬功能检测：（吞噬鸡红细胞或白假丝酵母等） • 促凝血活性测定：
（一）炭粒廓清试验
在受检者前臂屈侧中央3㎜范围内，搔刮皮肤后， 用盖玻片压紧固定，在第2，5，8，12，24，36小时 各取样一次，染色观察中性粒细胞聚集开始时间、 聚集程度等。健康正常人一般2～3小时后开始聚集， 达50～100个，6小时可达1000个以上。
体外法--Boyden小室法
Boyden 小室
体外法--琼脂糖平板法
液混合，温育后涂片、固定和染色。在油镜下观察
中性粒细胞对细菌的吞噬情况，计数100个细胞中吞
噬和未吞噬细菌的中性粒细胞数，并记录吞噬的细
菌数。
吞噬率
吞噬细菌的中性粒细胞数 计数的中性粒细胞数
100%
吞噬指数
吞噬的细菌总数 吞噬细菌的中性粒细胞数
100%
（三）中性粒细胞杀伤功能检测 硝基蓝四氮唑（NBT）还原试验
正常小鼠肝中库普弗细胞可吞噬清除90％炭粒， 脾巨噬细胞约吞噬清除10％炭粒。据此给小鼠静脉注 射定量印度墨汁（炭粒悬液），间隔一定时间反复取 静脉血，测定血中炭粒的浓度，根据血流中炭粒被廓 清的速度，判断巨噬细胞的功能。
主要用于动物实验
（二）巨噬细胞吞噬功能检测
巨噬细胞
＋
鸡红细胞或 白假丝酵母
孵育
等），B细胞（增殖、分泌抗体能力），NK（杀伤）， 中性粒细胞（趋化、吞噬、杀伤），巨噬细胞（吞噬 功能--炭粒廓清、鸡红细胞吞噬实验）
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搅拌混匀。
将凹玻片放在湿盒内，置于 37℃孵箱30~45min。
取一滴于载玻片上，制成薄涂片，自 然干燥。
实验结果
在油镜下可细胞核及被吞噬的细菌被染成紫色， 而中性粒细胞的胞浆被染成淡红色。
被 吞 入 细 菌
指标检测
1、吞噬百分率= 100个中性粒细胞中吞噬了细菌的细胞数 100
×100%
人吞噬百分率正常参考值：62%~76%
小吞噬细胞吞噬功能测定 ——细菌计数法
2014级麻醉学1班—— 学号：1410550160
实验目的
熟悉中性粒细胞的生物学特性及其意义、观察 机体的非特异性免疫现象
掌握血液中的中性粒细胞体外吞噬异物能力的 测定方法及用途
精品资料
• 你怎么称呼老师？ • 如果老师最后没有总结一节课的重点的难点，你
中性粒细胞生物学特性：
A、在抗化脓性细菌感染中起主要 防御作用
B、引起感染部位急性炎症反应 C、参与超敏反应（如Ⅲ型超敏反 应），引起机体免疫病理损伤。
细胞核呈多叶状，胞质内含多种颗 颗粒粒内：含髓过氧化物酶、防御素、溶菌酶、
组蛋白酶、乳铁蛋白、碱性磷酸酶等。
中性粒细胞所特有，巨噬细胞没有这种酶， 为中性粒细胞在细胞化学法上的标志。
实验原理
吞噬细胞可以通过趋化、调理、吞入和杀菌等 步骤，能吞噬和消化衰老、损伤及病原微生物 等异物，是机体固有免疫的重要组成部分。在 一定条件下，将白细胞悬液与细菌混合，保持 一段时间后，取样涂片染色镜检，可以测定中 性粒细胞吞噬细菌的百分率和吞噬指数。该实 验可助诊断吞噬细胞功能障碍的疾病。
实验材料
4、制片之前要混匀，涂片过薄、过厚都会影响 观察。
1、菌液：表皮葡萄球菌菌液（9亿/ml）
2、抗凝剂：3.8%枸缘酸钠或肝素（25U/ml）
3、毛细吸管、凹玻片、载玻片、牙签、甲醇、 瑞特-吉姆萨染料、pH=6.4 PB、酒精棉球、采 血针、显微镜、香柏油、洗镜油等。
实验流程
蒸馏水洗（平持玻片，在一端加 水，使染液“漂走”），待干，
镜检。
置于吉姆萨染液中， 5~10min后取出
是否会认为老师的教学方法需要改进？ • 你所经历的课堂，是讲座式还是讨论式？ • 教师的教鞭 • “不怕太阳晒，也不怕那风雨狂，只怕先生骂我
笨，没有学问无颜见爹娘 ……” • “太阳当空照，花儿对我笑，小鸟说早早早……”
小吞噬细胞
即是中性粒细胞； 来源于骨髓造血干细胞； 占白细胞总数的60%~70%； 生命周期短，不能分裂；
2、吞噬指数= 100个中性粒细胞吞噬的细菌总数 ×100% 100
人吞噬指数正常参考值：1.32~1.72
注意事项
1、中性粒细胞吞噬活性在37℃时最好，温度过 高或者过低均会使其吞噬能力减低；
2、个体差异、年龄、健康状况的不同，其吞噬 能力不同；
3、掌握好中性粒细胞与细菌的作用时间（中性 粒细胞对细菌吞噬非常迅速，5min左右吞噬率 达45%，10min左右接近80%，20min左右即达平 台）。
置于pH=6.4 PB中， 3min后取出。
置于瑞氏液中，1min后取 出。
取凹玻片一张，在凹孔中加1 滴（0.4ml）3.8%枸缘酸钠或
者肝素（25U/mቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ）
酒精棉球消毒左手无名指后，用 采血针在消毒部位取血2~3滴
（约0.2ml），加入凹孔中混匀。
加表皮葡萄糖液1滴 （0.02~0.04ml），后用牙签轻轻
将凹玻片放在湿盒内，置于 37℃孵箱30~45min。
取一滴于载玻片上，制成薄涂片，自 然干燥。
实验结果
在油镜下可细胞核及被吞噬的细菌被染成紫色， 而中性粒细胞的胞浆被染成淡红色。
被 吞 入 细 菌
指标检测
1、吞噬百分率= 100个中性粒细胞中吞噬了细菌的细胞数 100
×100%
人吞噬百分率正常参考值：62%~76%
小吞噬细胞吞噬功能测定 ——细菌计数法
2014级麻醉学1班—— 学号：1410550160
实验目的
熟悉中性粒细胞的生物学特性及其意义、观察 机体的非特异性免疫现象
掌握血液中的中性粒细胞体外吞噬异物能力的 测定方法及用途
精品资料
• 你怎么称呼老师？ • 如果老师最后没有总结一节课的重点的难点，你
中性粒细胞生物学特性：
A、在抗化脓性细菌感染中起主要 防御作用
B、引起感染部位急性炎症反应 C、参与超敏反应（如Ⅲ型超敏反 应），引起机体免疫病理损伤。
细胞核呈多叶状，胞质内含多种颗 颗粒粒内：含髓过氧化物酶、防御素、溶菌酶、
组蛋白酶、乳铁蛋白、碱性磷酸酶等。
中性粒细胞所特有，巨噬细胞没有这种酶， 为中性粒细胞在细胞化学法上的标志。
实验原理
吞噬细胞可以通过趋化、调理、吞入和杀菌等 步骤，能吞噬和消化衰老、损伤及病原微生物 等异物，是机体固有免疫的重要组成部分。在 一定条件下，将白细胞悬液与细菌混合，保持 一段时间后，取样涂片染色镜检，可以测定中 性粒细胞吞噬细菌的百分率和吞噬指数。该实 验可助诊断吞噬细胞功能障碍的疾病。
实验材料
4、制片之前要混匀，涂片过薄、过厚都会影响 观察。
1、菌液：表皮葡萄球菌菌液（9亿/ml）
2、抗凝剂：3.8%枸缘酸钠或肝素（25U/ml）
3、毛细吸管、凹玻片、载玻片、牙签、甲醇、 瑞特-吉姆萨染料、pH=6.4 PB、酒精棉球、采 血针、显微镜、香柏油、洗镜油等。
实验流程
蒸馏水洗（平持玻片，在一端加 水，使染液“漂走”），待干，
镜检。
置于吉姆萨染液中， 5~10min后取出
是否会认为老师的教学方法需要改进？ • 你所经历的课堂，是讲座式还是讨论式？ • 教师的教鞭 • “不怕太阳晒，也不怕那风雨狂，只怕先生骂我
笨，没有学问无颜见爹娘 ……” • “太阳当空照，花儿对我笑，小鸟说早早早……”
小吞噬细胞
即是中性粒细胞； 来源于骨髓造血干细胞； 占白细胞总数的60%~70%； 生命周期短，不能分裂；
2、吞噬指数= 100个中性粒细胞吞噬的细菌总数 ×100% 100
人吞噬指数正常参考值：1.32~1.72
注意事项
1、中性粒细胞吞噬活性在37℃时最好，温度过 高或者过低均会使其吞噬能力减低；
2、个体差异、年龄、健康状况的不同，其吞噬 能力不同；
3、掌握好中性粒细胞与细菌的作用时间（中性 粒细胞对细菌吞噬非常迅速，5min左右吞噬率 达45%，10min左右接近80%，20min左右即达平 台）。
置于pH=6.4 PB中， 3min后取出。
置于瑞氏液中，1min后取 出。
取凹玻片一张，在凹孔中加1 滴（0.4ml）3.8%枸缘酸钠或
者肝素（25U/mቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ）
酒精棉球消毒左手无名指后，用 采血针在消毒部位取血2~3滴
（约0.2ml），加入凹孔中混匀。
加表皮葡萄糖液1滴 （0.02~0.04ml），后用牙签轻轻