趋化素样因子1研究进展

临床和实验医学杂志 2013 年 1 月 第 12 卷 第 2 期
趋化素样因子 1 （ CKLF1） 是北京大学医学部科学 家通过抑制性减数杂交（ SSH） 技术［1］克隆 U937 细胞中 被 PHA 刺激并被 IL － 10 抑制的 cDNA 中发现的细胞因 子。其存在 CKLF2、3、4 三种不同的变异体［2］。重组蛋 白 CKLF1 具有趋化淋巴细胞、粒细胞和单核细胞的广 谱趋化活性，已证明重组蛋白 CKLF1 功能受体之一为 CCR4［3］。 1 CKLFl 的特殊生物学结构
趋化因子家族是一类由免疫或非免疫细胞分泌的 一级结构相似的小分子蛋白，在机体的免疫调节、过敏 反应、炎症反应、细胞增殖分化等过程中发挥重要作用。 趋化因子超家族成员具有一定的同源结构，根据一级结 构中保守的 4 ～ 6 个 Cys 的前 2 个 Cys 的排列方式，可将 趋化因子超家族分为 CXC（ α） 、CC（ β） 、C（ γ） 和 CX3C（ ） 四个亚家族，它们的功能除趋化活性外，还具有细胞活 化等多种生物学效应。这些趋化因子与七次跨膜的 G 蛋白偶联受体特异结合，通过 G 蛋白转导信号至细胞 内，发挥其生物学活性。目前已发现 28 种 CCL、16 种 CX － CL、2 种 CL 和 1 种 CX3CL。
近来有学者研究 CKLFl 的时间和空间的表达与胎 鼠神经系统发育的关系，提示 CKLFl 对胎鼠大脑皮质的 神经元细胞的增值、迁移、定位有重要作用。胎鼠大脑 皮质中 CKLFl mRNA 及蛋白质的表达具有时间依赖性， 而且，CKLF1 的免疫反应信号与轴突细胞的迁移、髓鞘 的形成、定位有关［7］。 2． 2 具有很强的促增殖分化能力 2． 2． 1 对造血干 /祖细胞有明显的促增殖分化能力 与大多数 CC 家族趋化因子对造血干细胞的增殖抑制 作用不同，CKLFl 对人低密度骨髓细胞和小鼠骨髓细胞 有明显的增殖调控作用，并与 GM － CSF 有协同作用，能 促进骨髓细胞的集落形成［8］。 2． 2． 2 对肌肉组织具有很强的促增殖分化能力 CKLFl 在小鼠骨骼肌中表达可以促进 C2C12 细胞增殖分 化 加 速，增 加 生 肌 素 的 表 达 水 平 及 一 些 生 长 因 子 的 活 性，促进骨骼肌细胞的增殖［2，9］。
有学者构建人 CKLF1 质粒，转染 293T 细胞，以转
基金项目: 国家自然科学基金资助项目，项目编号: 81171498 * 通讯作者: 杨高云，E － mail: gaoyun668@ yahoo．Hale Waihona Puke Baiducom． cn
染后上清刺激人大动脉内皮细胞 HAEC，应用 transwell 法检测 48 h 后迁移细胞数量，结果发现转染 CKLF1 组 上清 6 h、24 h、48 h 增殖率均升高，提示人趋化素样因 子可促进大动脉内皮细胞的增殖和迁移，对新生血管的 形成可能有一定作用［6］。
经微量细胞培样噻唑蓝（ MTT） 法检测显示，CKLF1 具有促大鼠主动脉平滑肌细胞增殖的作用。电镜下经 CKLFl 刺激后的平滑肌细胞亚细胞器、肌丝及致密体增 多，是平滑 肌 细 胞 增 殖 活 跃 的 表 现［12］。 有 研 究 通 过 MTT 法，观察经真核细胞 293T 细胞表达的 CKLF1 对体 外培养的人动脉平滑肌细胞（ ASMCs） 的增殖作用，首次 发现了 CKLF1 对体外培养的人 ASMCs 具有促增殖作 用［13］。提示 CKLF1 可能参与动脉粥样硬化血管内膜增 厚的过程。 2． 3 对软骨细胞有抑制增殖的作用 有研究发现 CKLF1 能促进兔软骨细胞诱生型一氧化氮合酶（ iNOS） 的 转录，iNOS 表达上调促进炎症发展； CKLF1 能抑制软骨 细胞 DNA，胶原及蛋白质多糖的合成［14］。 3 CKLF1 参与的疾病
肌肉电转 CKLF1 质粒能动员骨髓 CD34 + 细胞，在 心肌梗死情况下增加外周血 CD34 + 细胞的数量［10］，从 而提高左心室射血分数、左心室短轴缩短率、左心室压 力上升最大速率、左心室压力下降最大速率，减少心肌 梗死面积［11］。提示 CKLF1 可能是一个能够修复损伤心 肌的细胞因子，CKLF1 基因转移可能缩小大鼠心肌梗死 面积并改善其心功能。
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Journal of Clinical and Experimental Medicine Vol． 12，No． 2 Jan． 2013
趋化素样因子 1 研究进展
综述
孙雅纯 钟珊 杨高云* ( 首都医科大学附属北京友谊医院皮肤性病科 北京 100050)
【关键词】 细胞因子 趋化素样因子 1 研究进展
CKLFl 基因位于染色体 16q22，由 4 个外显子和 3 个内含子组成。CKLF1 cDNA 全长包括 530 个碱基，有 一个编码 99 个氨基酸的完整开放读码框架。CKLF1 具 有分泌形式，其蛋白分子量为 10． 9KDa，是高度疏水的 碱性蛋白质，与 CC 家族趋化因子 TARC 和 STCP － 1 低 水平同源，并共用功能性趋化因子受体 CCR4。经 N 端 测序，得到两种 CKLF1 分泌多肽，命名 C19、C27 多肽。 利用化学合成的 CKLF1 的 C 端肽 C19 进行研究，发现 CKLF1 的 C 端肽 C19 可结合受体 CCR4［4］。有学者用 毛细管区带电泳法研究了趋化素样因子 1C 端活性多肽 C19 与肝素之间的相互作用，推测 C19 可能抑制炎症反 应［5］。 2 CKLF1 的生物学功能 2． 1 具有广谱的趋化活性 用真核表达载体 pcDI － CKLFl 转染 COS － 7 细胞，发现 CKLFl 可以明显趋化中 性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞。同时将 pcDI － CKLFl 裸质粒注射到 BALB / c 小鼠肌肉中，注射质粒 10 d 后， pcDI － CKLFl 组小鼠肌肉切片中炎性细胞浸润明显增 多，其体内实验与体外实验结果一致［2］。