实验九尿有形成分分析仪

实验九尿有形成分分析仪

实验原理

尿沉渣分析仪综合运用流式细胞术和电阻抗法，可定量检测非离心尿中的有形成分。一定量尿样，经稀释、加温和染色后，靠液压作用吸入鞘液流动池，尿中有形成分被鞘液包绕，以单个纵列的形式沿中心竖轴线依次通过流动池。该过程中，每个粒子通过时都产生电压脉冲，即电阻抗信号；被染色的粒子在氩激光束照射下发出散射光和荧光。将前向散射光、荧光和电阻抗信号转换成数字信号后经微电脑分析处理，即可显示和输出有关颗粒的定性、定量结果。

电阻抗脉冲数与大小分别与总粒子数和体积成正比。前向散射光强度（, ）反映细胞的横截面积，前向散射光脉冲宽度（）反映细胞长度；荧光强度（, ）反映染色的敏感性，荧光脉冲宽度（, ）反映染色部分长度。综合分析上述参数差异，可进一步对不同粒子定性和定量。报告散点图（）或频数直方图（）和各相关检测项目的具体量化结果。

尿样的电导率是与渗透压密切相关的临床参数。尿样经稀释加温去除一些非晶型磷酸盐和尿酸盐结晶，使尿样电导率稳定。在进入流动池前，通过控制两极间的直流电可测量稀释尿样的电导率，根据这个电导率，检测电流会有所补偿使电压稳定。这样不仅可以测定电导率，而且可减小其对电阻抗信号的影响。

仪器组成

．液压系统鞘流液形成液体通道，尿有形成分在此中间穿过。这种流动原理可提高细胞计数的精密度，防止错误脉冲波的产生，减少细胞受损的可能。

．检测系统

（）光学检测系统：由氩激光光源（）、激光反射系统、流动池、前向光收集器和前向光检测仪组成。收集器收集前向光送至图像检测器，细孔板移走无规则的偏斜光，二色过滤器把前向散射光从前向荧光中分离。前向散射光信号通过两极真空管转化为电信号，前向荧光通过光电倍增管转化。

（）电阻抗检测系统：电极位于流动池入口两端，电极间有恒定的直流电。当尿有形成分通过时，电阻发生变化，两极间的电压上升被记录下来，这种电压变化转化为电信号，发送至微处理器，还可得到尿样的电导率，通过传导性感受器接受电导率电信号，并将其放大传送到微处理器。

．电路系统波形处理器测量和处理电信号后，由微处理分析和存储。散射光和荧光的强度和脉冲波宽度，阻抗值在平面坐标上综合设计，画出散点图。红细胞和白细胞的前向光强度和阻抗脉冲数量用直方图表示。

试剂器材

．试剂商品化试剂盒（含鞘液、稀释液、染料、质控品）。

．器材商品化尿沉渣分析仪

操作步骤

．开机按顺序打开激光装置、空气压缩机、主机的电源。仪器自检，按顺序检查微处理器、程序、温度气压测试、机械部分测试、稳定激光和本底测试。

．质控分析对质控程序进行设置包括质控方法、监测参数、靶值或极限值。质控品分析：在样本编号窗口选中[]键，输入编号。充分混匀质控品，将其试管放到吸样针中，按下启动开关，听到提示音移走试管，仪器自动分析，数据保存到质控文档中。

．样品检测

（）手动模式：在样本信息屏幕，输入编号、收集时间等信息，按[]，储存数据，退出程序。彻底混合样本，将试管放到吸样针中，按下启动开关，样本自动吸入，听到提示音后，移开试管。分析完成后，结果自动显示并输出。

（）自动模式：将样本（至少）倒入试管，确定条形标签位置正确，放在试管架上，放入试管架槽；若无条形标签，应先输入试管架编号和第一管样本编号。按[]键后，仪器自动混匀、吸样、分析，直到显示输出结果。

．关机吸入清洗液，执行关机程序。

报告格式

全自动尿沉渣分析仪结果报告显示见图，报告项目的中文说明见表。

图尿液沉渣分析报告

图全自动尿沉渣分析仪结果报告显示

表全自动尿沉渣分析仪报告项目的中文说明

项目说明项目说明

红细胞平均

白细胞以下为红细胞分析参数

上皮细胞. 红细胞信息

管型? 小红细胞？

细菌? 正常红细胞？

总计数? 未分类红细胞？

. 病理管型的未溶解强度

’ 结晶强度分布宽度

小圆细胞高强度的数

精子高强度的比例

类酵母菌平均

未分类的细胞平均

电导率＞，分布宽度性能评价

．优点

（）方法统一，可比性高，便于质控。

（）检测速度快。

（）同时完成多项检测。

（）弥补干化学法的不足，见表。

表尿沉渣仪法和干化学法部分检测项目比较

干化学法尿沉渣仪法

细菌革兰氏阴性杆菌定性细菌总数定量

隐血定性或半定量定量，红细胞分类

中性粒细胞定性或半定量定量所有白细胞总数．不足

（）不能检出滴虫、药物结晶，不能鉴别异常细胞。

（）不能对病理管型分类。

（）大量细菌、酵母和结晶会干扰计数。

（）不能检出影红细胞。

（）粘液丝会被误认为管型。

（）应用时间短，尚未建立公认的参考范围。

质量控制

．质量控制步骤参照尿干化学仪。

．严格的质量控制是保证全自动沉渣仪与手工计数符合的关键。参照仪器说明，用商品化质控品，每天对仪器进行质量控制。仪器可自动生成质控图，根据质控极限判断是否失控。

临床意义

．尿液中多种有形成分定量分析的重要方法，有助于血尿和尿路感染患者的诊断疗效监测。

．红细胞的形态分类有助于临床了解泌尿系统出血部位。在频数分布直方图中，的≥为均一性红细胞尿；≤称非均一性红细胞尿为非均一性红细胞；介于二者之间称为混合性红细胞。

．区别白细胞活性，存活白细胞强而较低，活力降低或死亡后弱而强。

．报告电导率。尿液电导率持续高值，应警惕发生结石的可能。

方法评价

目前尿沉渣分析仪大致分为两类，分别基于流式细胞术和影像分析。后者将尿沉渣染色后吸入计数池，通过显微镜摄像装置，在屏幕上显示清晰的彩色尿沉渣图像，根据操作者选定的范围可对其进行识别和技术，它是将手工流程的自动化、规范化。临床上使用更多的是基于流式细胞术的沉渣分析仪。

尿沉渣分析仪性能稳定，效率高（检测个样品），重复性好（～，～，上皮细胞～，管型～），线性范围宽，互染率低，与手工法相比符合率高（，，