最新6协和讲课1012-简

基因工程药物质量控制
生产过程 有其固有的易变性 —生物材料 —生物学过程：发酵、细胞培养、分离、纯化 目的产物 —化学成分 多肽和蛋白质等生物大分子 —生物活性 容易受酸、碱、高温甚至是常温的影响 —化学结构 比较复杂 —成品特点 比活性高、含量较低，有些须加蛋白做稳定剂
无法在成品中对制品进行全面的质量检定，为有效地控制 产品质量，必须对原液进行检定。
三、各类生化药物分析概况
（一）氨基酸及其衍生物 鉴别：茚三酮显色法：因所有的氨基酸均能与茚三酮显蓝紫色。
红外吸收光谱：与中国药典的标准图谱比较定性。 紫外吸收图谱：酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸。 高效液相色谱法：比较供试品与对照品的保留时间是否一致
特殊杂质检查：其他氨基酸：薄层色谱法—限量
热原—细菌内毒素：Gly Ala Met Val Ile Leu The Ser Tyr Phe Pro 乙 酸赖氨酸 盐酸赖氨酸 比色法测定抗氧剂：亚硫酸盐 ：亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、亚硫酸氢钾、 焦亚硫酸钾、焦亚硫酸钠
（一）单一成分多组分混合物 1．肽类混合物：科博肽注射液及粉针、注射用纯化胸腺活性 多肽、缩宫素注射液（猪牛脑垂体后叶，含升压素） 2．蛋白质类混合物：人尿、蛇毒、蜂毒提取物、口服水解蛋 白、口服水解蛋白粉（低苯丙氨酸）、水解蛋白口服溶液、蜂 毒注射液、琥珀酰明胶注射液、细胞色素C注射液（猪或牛心， 没控制纯度，细胞代谢改善药）、注射用细胞色素C、注射用 胰蛋白酶（猪、牛、羊胰）、注射用糜蛋白酶（猪、牛胰）、 注射用玻璃酸酶（哺乳动物睾丸，水解粘多糖）、注射用门冬 酰氨酶、注射用尿激酶（新鲜人尿，高分子UK大于90%）、 注射用绒促性素(孕妇女尿，hCG)、注射用尿促性素（绝经妇 女尿，hMG=FSH,LH）、注射用抑肽酶（牛胰、牛肺）、硫 酸鱼精蛋白注射液（鱼新鲜成熟精子，抗肝素药）
二、生化药物分析与质控特点
—动、植物组织、微生物提取 单组分 多组分
—微生物发酵与提纯
单组分 多组分
—化学合成与提纯
单组分
—基因工程菌或细胞培养与提纯 单组分
(重
组DNA技术 )
原料来源：动、植物组织和微生物、哺乳动物细胞
质控要求：若要保证终产品质量安全有效，必须对原材料、 培养过程和纯化工艺过程的中间体、最终产品进行全面的质 量分析与控制。
3．多糖类混合物：低分子肝素注射液、肝素钠注射液（硫 酸氨基葡聚糖钠盐）、右旋糖苷40氯化钠注射液（葡萄糖聚 合物）、右旋糖苷20葡萄糖注射液、右旋糖苷铁注射液、右 旋糖苷20氯化钠注射液、右旋糖苷70葡萄糖注射液、右旋糖 苷70氯化钠注射液、右旋糖苷40葡萄糖注射液、
右旋糖苷（蔗糖经肠膜状明串珠菌L-M-1226菌株发酵产生 高分子葡萄糖聚合物，重均分子量：2、4、7万）
亚硫酸盐在酸性条件下与含甲醛的碱性品红溶液发生反应，生成的紫 红色络合物在578nm波长处有最大吸收。
含量测定： 原料药：非水酸碱滴定法
溶剂—冰醋酸；标准滴定液—高氯酸 确定终点—电位法或指示剂法 复方氨基酸制剂：高效液相色谱法 衍生试剂：异硫氰酸苯酯（ PITC）； 邻苯二甲醛（OPA）、9-芴甲氧基羰酰氯（Fmoc）； 6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基氨基甲酸酯(AQC)； 2,4 -二硝基氟苯(DNFB) ； 茚三酮（Ninhydrin）；
4．脂类混合物：脂肪乳注射液、多烯磷脂酰胆碱及其胶囊、 海狗油W-3不饱和脂肪酸及胶丸、卵磷脂及其片剂（卵磷脂 含有磷脂酰胆碱和磷脂酰乙醇胺以及磷）、
5．核酸与多核苷酸类混合物：聚脱氧核苷酸注射液、核糖 核酸I及其粉针、核糖核酸II及其粉针、核糖核酸III及其粉针、 脱氧核苷酸钠及其粉针、片剂和注射液、注射用抗肿瘤免疫 核糖核酸、注射用抗乙肝免疫核糖核酸、转移因子免疫核糖 核酸等。
（二）多成分混合物
1．氨基酸与肽类混合物：脑蛋白水解物(注射液，注射用粉 针)、芦丁脑蛋白水解物注射液、猪心提取物原液及其注射 液、小牛血去蛋白提取物注射液及滴眼液、猪血去蛋白提取 物原液及其注射液、氨肽素、氨碘肽滴眼液、眼氨肽注射液 和滴眼液、肝水解肽注射液、肝浸膏及其片和复方胶囊、骨 肽注射液、鹿瓜多肽注射液、促肝细胞生长素及其注射用粉 针、小牛血去蛋白提取物注射液及其肠溶片（爱维治）
2 柱后OPA衍生的自动分析仪法 （15 ng）
2．氨基酸、核苷酸与肽类混合物：小牛脾提取物溶液及其 注射液、牛胎肝提取物及其复方片剂、脑苷肌肽注射液、肌 氨肽苷注射液、注射用心肌肽素
3．肽类与其他成分混合物：胸腺肽溶液及其注射液、注射 用胸腺肽、胸腺肽氯化钠注射液、 甲状腺素粉及其片剂， 垂体后叶粉及其注射液、尿多酸肽注射液
脏器提取的多组分生化药物质量控制
氨基酸分析方法
柱前衍生法： ① PITC衍生法 ② OPA-FMOC衍生法 ③ AQC衍生法 ④ DNFB衍生法
柱后衍生法: ① 茚三酮衍生检测法 ② OPA衍生检测法
直接分析法： ① 电化学检测法 ② 蒸发光散射检测法
方法及灵敏度的比较：
1 柱后茚三酮衍生的自动分析仪法 （50-100 ng）
1）研究建立原材料的质量标准，包括动物的种属 、健康状况、饲养环境（封闭饲养）、年龄、采 集时间和采集方法等。
2）进行动物源性病毒的灭活和验证，研究建立原 液（或半成品）的质量标准。
3）制订成品的质量标准。
只有严格控制原材料的来源和工艺过程，再加上 原液和/或终产品的质量标准，才有可能较好的控 制产品的质量，保证临床应用的安全和有效。
6协和讲课20091012-简
内容提纲
一、生化药品概述 二、生化药物分析与质控特点 三、各类生化药物分析概况 四、生化药物分析研究热点
相关指导原则（SFDA新药审评中心）Βιβλιοθήκη Baidu
化学药物原料药制备和结构确证研究技术指导原则 化学药物质量控制分析方法验证技术指导原则 生物组织提取制品和真核细胞表达制品病毒安全性评价技 术评审一般原则 化学药物稳定性研究技术指导原则 化学药物质量标准建立的规范化过程技术指导原则 生物制品质量控制分析方法验证技术评审一般原则 治疗用生物制品非临床安全性评价技术评审一般原则