生物化学：第十章 生化分离技术与应用-习题

第十章生化分离技术和应用

一、选择题

⒈下列哪种方法可用于测定蛋白质的分子量（）

A、SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法；

B、280/260nm紫外吸收比值；

C、凯氏定氮法；

D、荧光分光

光度法；E、Folin酚试剂法

⒉氨基酸和蛋白质共有的理化性质为（）

A、胶体性质；

B、两性性质；

C、沉淀性质；

D、变性性质；

E、双缩脲性质

⒊蛋白质溶液的稳定因素为（）

A、蛋白质溶液为真溶液；

B、蛋白质在溶液中做布朗运动；

C、蛋白质分子表面带有水化膜和

同性电荷；D、蛋白质溶液的黏度大；E、以上都不对

⒋关于蛋白质在等电点时的特性描述，哪项是错误的？（）

A、导电性最小；

B、溶解度最小；

C、黏度减小；

D、电泳迁移率最小；

E、以上都不对

⒌今有①、②、③、④、四种蛋白质的混合液，等电点分别为：5.0、8.6、6.8和9.2 ，在pH8.6的

条件下进行电泳分离，四种蛋白质电泳区带自正极的排列顺序为：（）

A、①、③、②、④；

B、①、②、③、④；

C、④、②、③、①；

D、③、②、①、④；

E、②、

④、③、①；

⒍盐析沉淀蛋白质的原理为（）

A、中和电荷，破坏水化膜；

B、与蛋白质结合成不溶性盐；

C、次级键断裂，蛋白质构象改变；

D、调节蛋白质溶液的等电点；

E、以上都不是

⒎关于下列多肽Glu-His-Arg-Val-Lys-Asp的叙述，哪个是错的？（）

A、在pH12时，在电场中向阳极移动；

B、在pH3时，在电场中向阴极移动；

C、在pH5时，

在电场中向阴极移动；D、在pH11时，在电场中向阴极移动；E、该肽的等电点大约在pH8

⒏用下列方法测定蛋白质含量，哪一种方法需要完整的肽键（）

A、双缩脲反应；

B、凯氏定氮；

C、紫外吸收；

D、茚三酮；

E、奈氏试剂

⒐蛋白质用硫酸铵沉淀后，可选用透析法除去硫酸铵，要确定硫酸铵是否从透析袋中除净，你选用

下列哪一种试剂检查（）

A、茚三酮试剂；

B、奈氏试剂；

C、双缩脲试剂；

D、Folin-酚试剂；

E、斐林试剂

⒑将抗体固定在层析柱的载体上，使抗原从流经此柱的蛋白质样品中分离出来，这种技术属于（）

A、吸附层析；

B、离子交换层析；

C、分配层析；

D、亲和层析；

E、凝胶过滤

⒒若用电泳分离Gly-Lys、Asp-Val和Ala-His三种二肽，在下列哪个pH值条件下电泳最合适（）

A、pH2以下；

B、pH2-4；

C、pH7-9；

D、pH10-12；

E、pH12以上；

⒓进行疏水层析时，以下哪种条件比较合适？（）

A、在有机溶剂存在时上柱，低盐溶液洗脱；

B、在有机溶剂存在时上柱，高盐溶液洗脱；

C、

在低盐条件下上柱，高盐溶液洗脱；D、在高盐条件下上柱，按低盐、水和有剂溶剂顺序洗脱；

E、低盐缓冲液上柱，低盐洗脱

⒔对一个富含His残基的蛋白质，在使用离子交换层析时应优先考虑（）

A、严格控制蛋白质上样液的浓度；

B、严格控制盐浓度；

C、严格控制NaCl的浓度；

D、严格

控制洗脱液的pH值；E、严格控制洗脱液的体积

⒕定性鉴定20种氨基酸的双向纸层析是（）

A、交换层析；

B、亲合层析；

C、分配层析；

D、薄层层析

二、判断是非

⒈用凝胶过滤法分离蛋白质时，总是分子质量大的蛋白质首先被洗脱下来。

⒉盐析法可使蛋白质沉淀，但不引起变性，所以盐析法常用于蛋白质的分离和纯化。

⒊测定别构酶的相对分子质量可以用十二烷基硫酸钠（SDS）-聚丙烯酰胺（SDS）-聚丙烯酰胺凝

胶电泳。

⒋等电点不是蛋白质的特征参数。

⒌蛋白质的SDS-聚丙烯酰胺电泳和圆盘电泳是两种完全不同的技术。

⒍逆流分溶和纸层析这两个分离氨基酸的方法是基于同一原理。

⒎某蛋白质在pH6时向阳极移动，则其等电点小于6。

⒏蛋白质带电荷为0的pH值为蛋白质的等电点。

三、填空题

⒈蛋白质是稳定的亲水胶体，其稳定因素是和。

⒉有一种蛋白质，说明此蛋白质含有个

电泳均显示一条带，说明蛋

⒊这是因为蛋白质分子中的、和三

⒋当蛋白质溶液中盐离子低时，可增加蛋白质的溶解度，这种现象称；当溶液中盐离子强

⒌DEAE-

⒍pH值和

离子强度的缓冲液，才能将此蛋白质洗脱下来。

⒎测定蛋白质浓度的方法主要有、、和。

⒏利用蛋白质不能通过半透膜的特性，使它和其它小分子物质分开的方法有和。

⒐利用分配层析的原理进行氨基酸分析，常用的方法有、、和。

⒑实验室常用的测定蛋白质相对分子量的方法有、和等。

四、名词解释

⒈蛋白质等电点；⒉凝胶过滤；⒊分配层析；⒋离子交换层析；⒌疏水层析；⒍亲和层析；

⒎聚丙烯酰胺凝胶电泳；⒏双向电泳；⒐蛋白质组

五、问答题

⒈根据给定的条件，回答问题：

⑴一个Ala、Ser、Phe、Leu、Arg、Asp和His的混合液在pH3.9时进行纸电泳，指出哪种氨基酸

向阳极移动？哪种氨基酸向阴极移动？

⑵带相同电荷的氨基酸如Gly和Leu在纸电泳时常常稍能分开，解释其原因？

⑶假如有一个Ala、Val、Glu、Lys和Thr的混合液，在pH6.0进行电泳，然后用茚三酮显色，画出

电泳后氨基酸的分布图。