第十章氨基酸多肽和讲义蛋白质类药品检验
氨基酸、多肽及蛋白质类药物分析方法
氨基酸、多肽及蛋白质类药物分析方法1. 引言氨基酸、多肽及蛋白质类药物是一类重要的生物大分子，广泛应用于医学、生物学和药物研发领域。
分析方法的研发和优化对于确保药物的质量和安全性至关重要。
本文将介绍氨基酸、多肽及蛋白质类药物分析方法的原理、常用技术和应用。
2. 氨基酸分析方法2.1 色谱法色谱法是最常用的氨基酸分析方法之一。
其中，离子交换色谱法（Ion-exchange chromatography）和高效液相色谱法（High-performance liquid chromatography, HPLC）是最常用的技术。
离子交换色谱法基于氨基酸的电荷性质，通过固定相上的阴离子交换树脂将氨基酸分离。
而HPLC则利用溶液中氨基酸的亲水性质，通过不同流动相的梯度洗脱将氨基酸分离。
2.2 光谱法光谱法基于氨基酸的吸光特性，常用的有紫外-可见光谱法（UV-Vis spectroscopy）和红外光谱法（Infrared spectroscopy, IR）。
紫外-可见光谱法利用氨基酸在特定波长下的吸光度差异进行分析，而红外光谱法则通过氨基酸吸收、发射或散射红外光的特性进行定性和定量分析。
3. 多肽分析方法3.1 质谱法质谱法是多肽分析的主要方法之一。
质谱法利用质谱仪对多肽进行分析，可以进行结构鉴定、定性和定量分析。
常用的质谱方法包括基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization Time-of-Flight Mass Spectrometry, MALDI-TOF-MS）和液相色谱-质谱联用（Liquid Chromatography-Mass Spectrometry, LC-MS）。
3.2 磁共振波谱法磁共振波谱法（Nuclear Magnetic Resonance, NMR）提供了多肽的结构信息。
通过分析多肽所产生的NMR信号，可以揭示多肽的空间构象和相互作用等重要信息。
氨基酸、多肽、蛋白质和酶类药品检验.
一氨基酸类药品检验
氨基酸类药物由于其结构上有羧基和氨， 故在进行含量测定时常用下列几种分析方 法。
**1、酸碱滴定法
谷氨酸(glutamic acid)、门冬氨酸(aspartic acid)和赖氨酸(lysine)等氨基酸，其分子结 构中均有羧基，故对其原料药一般采用氢 氧化钠滴定液滴定。
**4、碘量法或溴量法
示例一盐酸半胱氨酸水合物( cysteine hydrochloride hydras)的测定 因其分子结构中含有-SH基，可用碘量法测定。 例二 ，胱氨酸( L-cystine)的测定 因其分子结构中含有-S-S-基，可用溴量法测 定。
5、HPLC或氨基酸自动分析仪
根据蛋白质的性质和结构选用不同 的测定方法。
1、定氮法 2、电泳法 3、生物检定法P183
四常用的酶类药物
常用的酶类药物有胰酶( pancretin)、胃蛋 白酶(pepsin)、尿激酶(urokinase)、糜蛋白 酶( chymotrysin)、弹性酶(elastase)等。
**2、非水溶液滴定法
甘氨酸(glycine)、丝氨酸(serine)、缬氨酸(valine)、亮 氨酸(leucine)、精氨酸(arinine)、丙氨酸(alanine)和色氨 酸(tryptophen)等氨基酸，因其分子结构含有氨基，故对 其原料药，中国药典和卫生部以及地方药品标准一般采用 在非水溶剂中高氯酸滴定液测定含量。 **根据酸碱的质子学说：一切能给出质子的物质为酸，能 接受质子的物质为碱。弱碱在酸性溶剂中碱性显得更强， 而弱酸在碱性溶剂中酸性显得更强，因此本来在水溶液中 不能滴定的弱碱或弱酸，如果选择适当的溶剂使其强度增 加，则可以顺利滴定。氨基酸有氨基和羧基，在水中呈现 中性，假如在冰醋酸中就显示出碱性，因此可以用高氯酸 进行滴定。
氨基酸、多肽及蛋白质类药物
氨基酸、多肽及蛋白质类药物氨基酸、多肽及蛋白质类药物山东药品食品职业学院张慧婧第一部分氨基酸、多肽及蛋白质基本知识一、蛋白质基本知识蛋白质是一切生命的物质基础，是生物体的重要组成成分之一。
无论是病毒、细菌、寄生虫等简单的低等生物，还是植物、动物等复杂的高等生物，均含有蛋白质。
蛋白质占人体重量的16%～20%，约达人体固体总量的45%，肌肉、血液、毛发、韧带和内脏等都以蛋白质为主要成分的形式存在；植物体内蛋白质含量较动物偏低，但在植物细胞的原生质和种子中蛋白质含量较高，如大豆中蛋白含量约为38%，而黄豆中高达40%；微生物中蛋白质含量也很高，细菌中的蛋白质含量一般为50%～80%，干酵母中蛋白质含量也高达46．6%，病毒除少量核酸外几乎都由蛋白质组成，疯牛病的病原体——朊病毒仅由蛋白质组成。
这些不同种类的蛋白质，具有独特的生物学功能，几乎参与了所有的生命现象和生理过程，可以说一切生命现象都是蛋白质功能的体现。
1．生物催化作用作为生命体新陈代谢的催化剂——酶，是被认识最早和研究最多的一大类蛋白质，它的特点是催化生物体内的几乎所有的化学反应。
生物催化作用是蛋白质最重要的生物功能之一。
正是这些酶类决定了生物的代谢类型，从而才有可能表现出不同的各种生命现象。
2．结构功能第二大类蛋白质是结构蛋白，它们构成动、植物机体的组织和细胞。
在高等动物中，纤维状胶原蛋白是结缔组织及骨骼的结构蛋白，α-角蛋白是组成毛发、羽毛、角质、皮肤的结构蛋白。
丝心蛋白是蚕丝纤维和蜘蛛网的主要组成成分。
膜蛋白是细胞各种生物膜的重要成分，它与带极性的脂类组成膜结构。
3.运动收缩功能另一类蛋白质在生物的运动和收缩系统中执行重要功能。
肌动蛋白和肌球蛋白是肌肉收缩系统的两种主要成分。
细菌的鞭毛或纤毛蛋白同样可以驱动细胞作相应的运动。
4.运输功能有些蛋白质具有运输功能，属于运载蛋白，它们能够结合并且运输特殊的分子。
如脊椎动物红细胞中的血红蛋白和无脊椎动物的血蓝蛋白起运输氧的功能，血液中的血清蛋白运输脂肪酸，β-脂蛋白运输脂类。
氨基酸多肽和蛋白质类药物课件
水解法 发酵法
以糖为碳源，以氨或尿素为氮源，通过微生物的 发酵繁殖，直接生产氨基酸，或利用菌体的酶系， 加入前体物质合成特定氨基酸的方法。
菌种的培养、接种发酵、产品的提取及分离纯化
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氨基酸药物 二、氨基酸药物生产
半必需氨基酸 精氨酸和组氨酸
基本知识
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二、氨基酸基本知识
氨基酸 功能
合成蛋白质
氮平衡作用
转变为糖或脂肪
参与酶、激素及部分维 生素的组成
基本知识
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三、多肽基本知识
氨酸对肝细胞内三羧酸循环代谢过程的间接促 进作用，促进了肝细胞的能量生成，使得被损 伤的肝细胞的各项功能得以迅速恢复。
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个
中国药科大学生物制药专业
人
山东大学制药工程硕士
山东药品食品职业学院制药工程
简 系生物制药教研室主任 副教授
介 生物制药技术专业负责人
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目 录
01 / 氨基酸、多肽及 蛋白质基本知识
水解法 发酵法 化学合成法
化学合成法是利用有机合成和化学工程相结合的 技术生产氨基酸的方法。
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氨基酸药物 二、氨基酸药物生产
多肽与蛋白质类药物-氨基酸多肽蛋白质108页PPT
37、我们唯一不会改正的缺点是软弱。——拉罗什福科
xiexie! 38、我这个人走得很慢，但是我从不后退。——亚伯拉罕·林肯
39、勿问成功的秘诀为何，且尽全力做你应该做的事吧。——美华纳
40、学而不思则罔，思而不学则殆。——孔子
多肽与蛋白质类药物-氨基酸多肽蛋白 质
36、“不可能”这个字(法语是一个字 )，只 在愚人 的字典 中找得 到。--拿 破仑。 37、不要生气要争气，不要看破要突 破，不 要嫉妒 要欣赏 ，不要 托延要 积极， 不要心 动要行 动。 38、勤奋，机会，乐观是成功的三要 素。(注 意：传 统观念 认为勤 奋和机 会是成 功的要 素，但 是经过 统计学 和成功 人士的 分析得 出，乐 观是成 功的第 三要素 。
第十章 氨基酸、多肽和蛋白质类药品检验
第一节
氨基酸类药品检验
• 这三种氨基酸可以通过紫外 吸收光谱加以鉴别。 • 精密称取酪氨酸、色氨酸、 苯丙氢酸各适量。 • 用水制成每1mL含20μg（色 氨酸）、40μg（酪氨酸） 、200μg（苯丙氨酸）。 • 在波长230～300nm测定各氨 基酸的吸收光谱，如右图。
1：酪氨酸 2：色氨酸 3：苯丙氨酸。
OH
NH2 HC + NH (H2C)3 CHNH2 HOOC
O
+ NH3
2NH3 + 3NaBrO
N2 + 3H2O + 3NaBr
第一节
加热
氨基酸类药品检验
.S 20mgL 色氨酸样品10 mL水 2mL二甲氨基苯甲醛 T . （5）
蓝紫色溶液
第一节
氨基酸类药品检验
• 氨基酸为白色晶状体，熔点很高，多在熔融时分解， 都能溶解在强酸强碱中，形成的盐多能溶于水。 • 氨基酸在等电点（pI）时溶解度最小，最稳定。 • 中性pI值在5～6.3左右。 • 酸性pI值在2.8～3.2左右。 • 碱性氨基酸的pI值在7.6～10.8左右。
第一节
氨基酸类药品检验
第一节
氨基酸类药品检验
3、薄层色谱鉴别法 • 在薄层板上点样，通过与标准氨基酸对照而鉴别氨基 酸。 （1）薄层板的制备
2 5g微晶纤维素样品20mL无水乙醇，. 拌成糊状 5mL水
待用
均匀涂板
溶剂挥发完毕后
重氮试剂 H2 H C C C COOH NH2 HO3S N N C HN CH N N SO3H H2 H C C C COOH NH NH2
HC
NH2 NH2
第一节
(完整ppt)氨基酸、多肽及蛋白质类药物
氨基酸药物 二、氨基酸药物生产
水解法 发酵法
以糖为碳源，以氨或尿素为氮源，通过微生物的 发酵繁殖，直接生产氨基酸，或利用菌体的酶系， 加入前体物质合成特定氨基酸的方法。
菌种的培养、接种发酵、产品的提取及分离纯化
氨基酸药物 二、氨基酸药物生产
水解法 发酵法 化学合成法
化学合成法是利用有机合成和化学工程相结合的 技术生产氨基酸的方法。
氨基酸药物 三、典型氨基酸药物
单一氨基酸药物
用药于理肝作脏用疾：病体的外氨实基验酸表明：谷氨酰胺对胃、肠 粘膜损伤具有保护和修复作用，其原因为谷氨
用酰于胺消对化胃道、疾肠病粘氨膜基上酸皮成分已糖胺及葡萄糖胺 的生化合成有促进作用。
氨基酸药物 三、典型氨基酸药物
单一氨基酸药物
用于肝脏疾病的氨基酸 用于消化道疾病氨基酸
氨基酸药物 三、典型氨基酸药物
单一氨基酸药物
碳酸钙甘氨酸胶囊 用成于份肝：脏本疾品病为的复氨方基制酸剂，每粒含碳酸钙210毫 用克于，消甘化氨道酸疾9病0毫氨克基。酸
适应症：用于缓解胃酸过多引起的胃痛、胃灼 热感（烧心）、反酸。
用于肝脏疾病的氨基酸
氨基酸药物 三、典型氨基酸药物
蛋单氨一酸氨片基酸药物
用适于应肝症脏：疾用病于的脂氨肪基肝酸，以及酒精和磺胺等药物 引起的肝损害。 用法用量：口服，一次1～3g，一日3次，饭 后服。
氨基酸药物 三、典型氨基酸药物
单一氨基酸药物
药理毒理：氨基酸类药，是体内胆碱生物合成 用的于甲肝基脏供疾体病，的能氨放基出酸活性甲基，促进磷酯酰胆
基本知识 二、氨基酸基本知识
蛋白质基本结构单位 氨 基 酸
基本知识 二、氨基酸基本知识
必需氨基酸
甲硫氨酸、缬氨酸、赖 氨酸、异亮氨酸、苯丙 氨酸、亮氨酸、色氨酸、 苏氨酸
氨基酸、多肽及蛋白质类药物
氨基酸药物 三、典型氨基酸药物
单一氨基酸药物
用于肝脏疾病的氨基酸 用于消化道疾病氨基酸 用于脑病的氨基酸
氨基酸药物 三、典型氨基酸药物
单一氨基酸药物
用左于旋肝多脏巴疾片病的氨基酸 用成于份消：化左道旋疾多病巴氨基酸 功能主治：用于帕金森病及帕金森综合征。 用于脑病的氨基酸
基本知识 一、蛋白质基本知识
动物
植物
微生物
生命 物质基础
人体
基本知识 一、蛋白质基本知识
蛋白质 功能
生物催化 结构功能 运动收缩 运输功能 代谢调节 保护防御
其他功能
基本知识
定氮法
一、蛋白质基本知识
多数蛋白质含氮量相对 固定，约为16%，这是 蛋白质的一个重要特点。 因为氮元素容易通过凯 氏定氮法进行测定，故 蛋白质的含量可以由氮 的含量乘以6.25 （100/16）计算得到。
基本知识 三、多肽基本知识
多肽是α－氨基酸以肽键连
多 肽
接在一起而形成的化合物， 它也是蛋白质水解的中间产 物。
肽与蛋白质
02
氨基酸类药物
氨基酸药物 一、氨基酸药物分类
治疗消化道疾病 治疗肝病 治疗脑及神经系统疾病 用于肿瘤治疗 其他氨基酸药物
氨基酸药物 二、氨基酸药物生产
水解法
以毛发、血粉及废蚕丝等为原料，通过酸、碱或 蛋白水解酶水解成氨基酸混合物，经分离纯化获 得各种药用氨基酸的方法称为水解法。 分离、精制和结晶 胱氨酸、亮氨酸、酪氨酸等
氨基酸药物 二、氨基酸药物生产
水解法 发酵法 化学合成法 酶合成法
酶合成法是以化学合成法配 制基质，利用酶促反应（即 酶的水解、裂解、合成作用） 直接制备各种氨基酸。 特别是固定化酶和固定细胞 等技术的迅速发展，解决了 酶合成法中较为突出的缺点， 从而促进了在生产实际中的 应用。
氨基酸、多肽、蛋白质和酶类药品检验
1、碘滴定法(也称直接碘量法)
电位比EӨI2/I—低的还原性物质，可以直接用I2的 标准溶液滴定的并不多，只限于较强的还原剂，如：
S2-、SO32-、Sn2+、S2O32医-、学ppAt sO32-、SbO33-等。
8
剩余碘量法
在供试品中先加入一定量、过量的碘滴定液， 待I2与测定组分反应完全后，再用硫代硫酸 钠滴定液滴定剩余的碘，根据与药物作用的 碘的量来计算药物含量的方法。
此外，加入过量的KI，可以加快反应的速度和 提高反应的完全程度。
2.反应时溶液的温度不能高，一般在室温下进行。 因度的分升。解高保。温存度Na增2S大2OI23的溶挥液发时性，，室降温低升淀高粉，指加示速剂Na的2S灵2O敏3
3.析出碘的反应最好在带塞的碘量瓶中进行，滴
定切勿剧烈摇动。
医学ppt
医学ppt
3
非水溶液滴定法
非水溶液滴定法是在非水溶剂中进行滴定的方法。 主要用来测定有机碱及其氢卤酸盐、磷酸盐、硫酸 盐或有机酸盐，以及有机酸碱金属盐类药物的含量。 也用于测定某些有机弱酸的含量。
非水溶剂的种类 (1) 酸性溶剂 有机弱碱在酸性溶剂中可显著地增强其相对碱
度，最常用的酸性溶剂为冰醋酸。 (2) 碱性溶剂 有机弱酸在碱性溶剂中可显著地增强其相对酸
I2十2S2O32—＝2I—+S4O62—
本法可测定矿石中0.5%以上的铜。
医学ppt
14
2.钡盐中钡的测定
能 涤将后B，a在2用+H沉A稀淀c-H为NCaBAla溶cC缓r解O冲4，。溶加沉液淀入中经过，过量C滤rKO、I42，洗—
医学ppt
9
2、滴定碘法(间接碘量法)
电位比EӨI2/I—高的氧化性物质，可在一定的条件 下，用碘离子来还原，产生相当量的碘，然后用 Na2S2O3标准溶液来滴定析出的I2，这种方法叫做间 接碘量法或称为滴定碘法。例如K2Cr2O7在酸性镕液 中与过量的KI作用，析出的I2用Na2S2O3标准溶液滴 定。
4氨基酸、多肽、蛋白质类药品检验
仪
碘量法
原理：半胱氨酸分子中含有－SH， 在酸性
条件下，与过量的碘作用，剩余的碘用硫代 硫酸钠溶液滴定。由硫代硫酸钠溶液所消耗 的量，间接求出硫化物的含量。
注意：滴定条件，指示剂，碘滴定液，
Na2S2O3 标液配制
碘量法的背景知识 (一) 方法简介 碘量法也是常用的氧化还原滴定方法之一。它 是以I2的氧化性和I-的还原性为基础的滴定分析法。 因此，碘量法的基本反应是 I 2 +2e - =2I - E IO/I- =0.535 V
定氮法
样品与浓硫酸共热,含 氮有机物即分解产生氨 （消化），氨又与硫酸 作用，变成硫酸氨。经 强碱碱化使之分解放出 氨，借蒸汽将氨蒸至酸 液中，根据此酸液被中 和的程度可计算得样品 之氮含量。
4.碘量法或溴量法 5.HPLC法
示例一：盐酸 示例一：三氨
基酸注射液-341 半胱氨酸水合物 的测定 示例二：六氨 示例一：L-胱氨 基酸注射液400 酸的测定 6.氨基酸自动分析
效价单位U
效价:指某一物质引起生物反应的功效单位,可用理 化方法检测,也可用生物检测方法测定，通常以重量 单位或效价单位来计量。不同的药物有各自的效价 的定义。
某些生化药物，其药物中含有一些杂质，不可能是 纯品。故不能以重量单位准确表示其含量，只能依 靠生物检定的方法与标准品进行比较来测定药物的 效价剂量。因此，采用特定的“单位”——“U”来 计量。产生相同效应药品的剂量比较时，所需剂量 越小，药物的效价就越高，反之效价就低。
第4章
氨基酸、多肽、蛋白质类 药品检验
易庆平
2010年5月6日
氨基酸类药物含量测定常用的方法 1.酸碱滴定法
示例1：谷氨酸的
2.非水溶液滴定法
氨基酸、多肽及蛋白质类药物分析方法 (2)
氨基酸、多肽及蛋白质类药物分析方法
氨基酸、多肽和蛋白质类药物的分析方法通常涵盖以下几
个方面：
1. 色谱分析方法：氨基酸、多肽和蛋白质类药物的分析常
常使用色谱技术，如高效液相色谱（HPLC）和气相色谱（GC）。
对于氨基酸和小肽的分析，常采用反相或离子交
换柱进行分离，并使用紫外或荧光检测器进行检测。
对于
大肽和蛋白质的分析，常采用尺寸排阻色谱（SEC）或离子交换色谱（IEC）进行分离，同时结合质谱进行定性与定量分析。
2. 质谱分析方法：质谱是氨基酸、多肽和蛋白质类药物研
究中常用的分析技术之一。
常用的质谱技术包括质谱成像（MSI）、质谱测定（MS）、质谱显微镜（MSM）等。
3. 免疫分析方法：免疫分析方法常用于蛋白质的定量分析，如酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫层析等。
免疫分析方
法依赖于特异性抗体与目标蛋白结合形成复合物，通过测定复合物的信号强度或荧光强度来定量。
4. 生化分析方法：利用酶促反应对氨基酸、多肽和蛋白质进行定量分析的方法，如酶标记法、比色法、发光法等。
5. 其他分析方法：还有一些特殊的分析方法，如核磁共振（NMR）、电泳等，也可以用于氨基酸、多肽和蛋白质类药物的分析研究。
需要根据具体的药物、样品和分析目的选择合适的分析方法，并结合这些方法的优势和特点进行分析。
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SO3H SO3H
HO
-H2O HO + HCHO
H2
C
OH -H HO
H2 C
O-
HO
HO
OH
HO
OH
SO3H
SO3H HO3S
SO3H HO3S
第一节 氨基酸类药品检验
（8）5mg丙 L 氨酸 5 m 样 水 L 品 1 m 氯 L T胺 溶 液 水 浴 加热
亚 硝 基 铁 T .S.浸 氰 润 化 过 钠 的 1 滤 滴 5 % 0 纸 二 乙 胺 溶液 蓝紫色 3m斑 内 in点 不， 消失
精品jing
第十章氨基酸多肽和蛋白质类药品 检验
第九章 抗生素类药物分析与生物检 定法
• 基本要求：
• 掌握氨基酸定性鉴别的方法，熟悉氨基酸特殊杂质及 安全性检查，掌握氨基酸含量测定方法，掌握多肽因 子类药物的定性鉴别方法，熟悉多肽因子类药物的检 查方法，掌握多肽因子类药物生物效价的测定方法， 掌握蛋白质类药物的鉴别和检查方法，掌握蛋白质含 量测定和效价测定方法，了解几种氨基酸、多肽因子 和蛋白质药物的质量分析过程。
取 上 述 2 滴 0溶 置 液 蒸 发 水 皿 浴 中 蒸 干 放 冷 1 m 变 L 色 T .S.酸 加 热紫色溶液
NH2CH2COOH + HNO2
HOCH2COOH+ N2 + H2O
HOCH2COOH
HCHO + CO2 + H2O
SO3H
SO3H SO3H
NC
H
O
O
+ H2O
第一节 氨基酸类药品检验
（2）在室温下氨基酸与亚硝酸反应，生成氮气。在标 准条件下测定生成氮气体积，即可计算氨基酸的量。
• 注：生成的氮气只有一半来自氨基酸。
0.3g样品 1 m 0 水 L 加 热 1 滴 0 稀 盐酸 4 m 亚 L 硝 T 酸 .S. 钠N2
5m样 g 品 5 m 水 L 1 m 茚 L 三 T .S酮 . 加 3热 m i n
2 m 0 水 L 静 1置 m 5 i n蓝紫色溶液
O
COOH
OH
+ H-C-NH2
OH
O
R
O
OH
O
+ NH3 + CO2 + R C
H
O
O
O
OH
HO
+ NH3 +
H
HO
O
O
O
O
茚三酮显蓝紫色。 • 采用茚三酮显色法，中国药典（2010年）二部对所
收载的氨基酸类药物大多采用此方法进行鉴别。 • 如要对某种氨基酸加以鉴别，可借助于一些特定的显
色反应。
第一节 氨基酸类药品检验
（1）茚三酮反应 茚三酮在酸性溶液中与α-氨基酸共热
，引起氨基酸氧化脱氢、脱羧反应，最后生成紫色物 质。
NH2
R CHCOOH + HNO2
OH
R CHCOOH + N2 + H2O
第一节 氨基酸类药品检验
（3） 5m 0 g苯 L 丙氨 酸 5 m 水 L 样 3 品 滴 铬 T 酸 .S. 钾 煮 沸苯乙醛，有香气
H2 NH2
煮沸
C C COOH
H
H2CrO4
H2 CCO
H
CH2
C
H
R
第一节 氨基酸类药品检验
（6）2m 0 g色 L 氨酸 3 m 样 水 L 品 1 m 1L% 0 漂 白 精 溶 加 热 红色溶液
第一节 氨基酸类药品检验
（7）0.1g甘氨酸 5 m 样 水 L 品 5 滴 稀 盐 酸 1 m 1L% 0 亚 硝 酸 钠溶
H2 H
重 氮 试 剂 HO3S
HC C C C COOH
NH2 NH2 NH2
H2 H N N C C C C COOH
HN NH NH2 CH
NN
SO3H
第一节 氨基酸类药品检验
（10） 5mgL苏氨酸 样 1 m L 碳 品 酸 ， 少 量 二 化 苯 亚 胺 锡 和 固氰 体
NH2
氯胺T
H3C C COOH H
CH3CHO + CO2 + N2 + H2O
乙醛蒸气接触亚硝基铁氰化钠和二乙胺时蓝紫色
第一节 氨基酸类药品检验
（9）组氨酸的侧链咪唑基也能与重氮苯磺酸反应形成 与Pauly反应相似的化合物，呈棕红色。
5mg组 L 氨酸 1 m 样 水 L 品 1 m 重 L 氮 试剂 1 m 2L% 0 N a 溶 O H 液橘黄色溶液
• 氨基酸在等电点（pI）时溶解度最小，最稳定。 • 中性pI值在5～6.3左右。 • 酸性pI值在2.8～3.2左右。 • 碱性氨基酸的pI值在7.6～10.8左右。
第一节 氨基酸类药品检验
一、氨基酸的定性鉴别 • 旋光度、熔点、溶解度、纸层析、氨基酸自动化分析
、气相色谱等均可作为氨基酸鉴别的依据。 1、化学鉴别法 • 氨基酸的鉴别最常用的方法是根据所有氨基酸均能与
第一节 氨基酸类药品检验
（4） 50mgL精氨酸 样 1 m L 水 品 0 .5m L 次 溴 酸 T. S.钠 ， 0 .5m L 萘 酚 溶 红 液 色溶液
NH2 C NH
NH
(H2C)3
+
CHNH2 HOOC
NH2
HC
O
OH
NH
(H2C)3
+ NH3
CHNH2
HOOC
2NH3 +3NaBrO
第九章 抗生素类药物分析与生物检 定法
• 基本内容 第一节 氨基酸类药品检验 第二节 多肽因子类和蛋白质类药品检验 第三节 几种氨基酸、多肽因子和蛋白质药物的质量分析
第一节 氨基酸类药品检验
• 氨基酸是治疗蛋白质代谢紊乱、蛋白质缺损所引起的 一系列疾病的重要生化药物，也是具有高度营养价值 的蛋白质补充剂，有着广泛的生化作用和临床疗效。
N2 + 3H2O + 3NaBr
第一节 氨基酸类药品检验
（5）2m 0 g色 L 氨酸 1 0 m 样 水 L 品 2 m 二 L 甲 氨 基 T .S. 苯甲
加 热蓝紫色溶液
H2 H
C C COOH +
NH2
R CHO
COOH
NH2
CH HOOC CH
H2C NH2
• 目前氨基酸及其衍生物临床应用不断发展和扩大，创 制了一些新的生化药物。
• 如甲基酪氨酸治疗嗜铬细胞瘤 • 氧苯丙氨酸用于类癌瘤综合征 • 偶氮丝氨酸治疗白血病 • 乙酰羟脯氨酸用于治疗类风湿关节炎
第一节 氨基酸类药品检验
• 氨基酸为白色晶状体，熔点很高，多在熔融时分解， 都能溶解在强酸强碱中，形成的盐多能溶于水。