除草剂讲义生物测定技术

然后计算每一浓度处理的抑制指数： Σ（级别X各级代表株数）
抑制指数＝――――――――――――X100 总株数X最高级别
将抑制指数（抑制百分数）转换为机率值，浓度 （剂量）以对数值表示，求出EC50。
3.高梁法简介
本法是Parker于1966年首先报道 的，后经改进，缩短测定时间。高 粱法适宜于测定非光合作用抑制剂， 它具有操作简便，培养期间不用管 理、周期短，测定范围广等优点。 还可改用燕麦、黄瓜等为材料来扩 大测试范围。
2.小杯法
1
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4
5
CK
该法是上海植物生理研究所于1972年建立的。 可以测定二苯醚类，酰胺类和氨基甲酸酯类、氯 代脂肪酸类等除草剂的活性，但对抑制植物光合 作用的除草剂则几乎不能采用。
该法具有操作简便，测定周期短、范围较广的 优点。
试材选用小麦、油菜、水稻、稗草等。以 直径3.5 cm，高5.0cm的玻璃杯为容器（亦可 用50ml 的小烧杯代替）。杯底放一张圆滤纸 片，吸取一定量的有机溶剂溶解的待测药液 倒入杯内，挥发干溶剂。若以水稻、稗草等 水生杂草种子为试材，则在小烧杯中加入2ml 蒸馏水；3d后分别记载株高或测定鲜重。计 算抑制生长50％所需要的浓度（LC50）。
除草剂生物测定技术
精品jing
一、除草剂生物测定的意义
❖生物测定是除草剂研究种不可缺少的手段 ❖某种化合物是否具有杀草活性 ❖为特定杂草筛选一种除草剂 ❖除草剂作用方式的研究
二、除草剂生物测定的基本原理
➢试验均在同一控制条件下 ➢必须设对照，每一处理重复3－4次 ➢试材应该健壮、整齐、随机排列 ➢测定结果应进行统计学分析 ➢在一定范围内，生物试材与除草剂浓度
主要测定参数
▪种子发芽率 许多除草剂可抑制敏感种子的
发芽及胚根和芽鞘的生长、因此，可以利用观 察种子的萌发率来测定某种药剂的存在与否。
▪ 植株生长量 在生物测定中，试材重量
的测定是最常用的。
▪生理生化指标 在肉眼可见的反应出
现之前，试材的生理生化的变化往往可 以测定出来。植物呼吸和光合作用以及 所含成分或新陈代谢物质的变化等都可 以作为测定的指标。
Y=a+bx
目测的分级标准
0级——同对照 1级——抑剂生长25％以下 2级——抑制生长50％以下 3级——抑制生长75％以下 4级——抑制生长75％以上 5级——死亡
四、除草剂常用的生物测定方法
❖黄瓜幼苗法 ❖小杯法 ❖小球藻法 ❖去胚乳小麦幼苗法 ❖浮萍法
种子发芽测定法
种子发芽测定法是一种常用的除草剂 活性测定方法，种子发芽率、根与茎的生 长量或作长度在一定范围内与药剂剂量呈 相关性，因此可用作除草剂的定量测定， 有较高的灵敏度。
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▪症状 有些除草剂可引起试材的典型
症状，因此，可以利用此种反应来鉴定除 草剂。
▪特殊技术 Parker以青萍为试材，以百
草枯和脲类除草剂的拮抗作用来测青萍的 浓度；若以愈伤组织为试材，则测愈伤组 织的生长量。
测定结果表达方法
正确地评价某一药剂的生物测定结果是很重要的 。
常用地上部鲜重减少50％（ED50）、地上部干重减 少50％〔CR50〕、株高减少50％（LD50。或ED50）及 覆盖面积减少50％（EC50）所需要的除草剂量来表 示这一类试验结果。
1.黄瓜幼苗形态法
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1
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CK
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100mg/L
10mg/L
1mg/L
1mg/L
0.01mg/L
CK
57%2,4D丁酯乳油对黄瓜种苗的抑制作用
本方法是测定激素类除草剂及其他 植物生长调节剂活性的常用方法，具 有反应灵敏、测定范围大 （ 0.1~1000ppm ） ， 操 作 简 便 等 优 点 。
成比例的伤害反应
三、除草剂生物测定技术的程序和原则
（－）生物测定材料的选择 试材的选 择应兼备对药剂较感性高和具有一定的 可测范围以及大量易得的均一材料。
（二）测定参数的选择 试材对除草剂的反 应可以通过各种参数来评价。除草剂对植物 的影响一般为非专一性的，因此，各种器官 均能作为某一除草剂的活力指标。
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高梁种子 黄砂＋除草剂
培养皿
上海植生所的方法是：用直径9cm的培养皿，装满 干燥黄砂并刮平，每皿加人30ml药液，正好使全皿黄砂 浸透，然后用有十个齿的齿板在皿的适当位置压孔（或 用 细 玻 棒 均 匀 压 10 个 孔 ） 以 便 每 皿 能 排 10 位 根 长 1 － 2mm（根尖尚未长出根鞘）的萌发高粱种子（一般于试 验前的一天在25℃温箱内催芽）。为了缩短测试时间， 在排种培养的前一天，将上述培养好的培养皿、置于 34℃恒温箱中过夜，以提高砂温（室温低时尤为重要）， 排种工作在恒温室中进行，然后放在34℃恒温箱内培养， 隔8小时左右，就可划道标记每一株根尖位置起点，过 14－16h，对照根长30mm左右，即可测量，求出抑制生 长50％的除草剂浓度。
若以小麦、油菜种子为试材、则在滤纸 片下放一层直径约为0.5cm大小的玻璃珠 （短玻棒也可）再加入3ml蒸馏水。选择刚 萌动的种子10粒，排放到滤纸片上，置28℃ 恒温箱培养，白天给予日光灯照。培养期间 每天加入一定量蒸馏水来补充挥发掉的水份。
药效的分级标准为
0级——同对照 1级——抑制生长25％以下 2级——抑制生长50％以下 3级——抑制生长75％以下 4级——抑制生长75％以上
调查项目
1．发芽率
调查对照处理和药剂处理种子的发芽数量，然后 计算发芽率。
药剂处理的发芽数 发芽率（％）＝一一――――――――X 100
对照处理的发芽数
2．生长抑制率
测定发芽以后芽或根的长度，或者是测量鲜 重或干重（较少）。
对照处理一药剂处理 生长抑制率（%）＝－－－―――――――X100
对照处理
此法对高粱种子要求严格，杂交高粱种 子因生长势不整齐不适于作试材，农家品 种生长势整齐。可采用。此外，培养皿内 装砂量要适合，少了会使植物材料与药剂 接触不良，砂多则使植物生长受阻碍，这 都会影响到测定结果的精确性
4.稗草胚轴中胚轴法