HN禽流感病毒-实验室检测PPT课件

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标本采集、运送
➢ 对符合卫生部发布的《人感染H7N9禽流感疫 情防控方案（第二版）》 中规定的病例定 义的病人进行采样。
➢ 上呼吸道标本（如咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取 物、咽漱液和鼻洗液）
➢ 下呼吸道标本（如气管吸取物、肺洗液、肺组 织标本）
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标本采集、运送
➢ 血清标本：发病7天内急性期血清以及间隔2-4 周的恢复期血清
➢ 尸检标本
➢ 环境标本：禽类粪便、笼具涂拭标本和环境污 水等标本
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标本采集
要求
➢呼吸道标本：发病早期采样，采集的呼吸道标本每 份分为3 管，每份不少于1ml。 ➢血清标本：每份分为2管，每管不少于0.5ml。
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标本采集、运送
标本采集、包装、运送等应当严格按照《可感 染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样 本运输管理规定》（卫生部第45号令）等生物 安全相关规定执行。
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实验室检测
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流感样病例强化监测
尚未发生人感染H7N9禽流感病例的地区，在 既往流感样病例监测工作基础上，要提高监测 强度。增加标本采集和检测数量，南方省份每 家流感监测哨点医院每周采集流感样病例和人 感染H7N9禽流感相关病例标本20份，送当地 流感监测网络实验室开展检测。
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人感染H7N9禽流感病毒标本采集及实 验室检测策略
应当尽量采集病例发病早期的呼吸道标本（尤 其是下呼吸道标本）和发病7天内急性期血清 以及间隔2-4周的恢复期血清。如病人死亡， 应当尽可能说服家属同意尸检，及时进行尸体 解剖，采集组织（如肺组织、气管、支气管组 织）标本。医疗机构采集的呼吸道标本每份不 少于3ml。血清标本每份分为2管，每管不少 于0.5ml。
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人感染H7N9禽流感强化监测实施方案
适用范围 本方案适用于各地在已发生人感染H7N9禽流
感确诊病例的县（区）开展强化监测工作。仅 发现动物或环境H7N9禽流感病毒检测阳性结 果的地区可参考此方案，自行决定是否开展强 化监测工作。
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人感染H7N9禽流感强化监测实施方案
发生人感染H7N9禽流感确诊病例的县（区） ，应当从病例确诊后次日开始在所有二级及以 上医疗机构门急诊开展为期2周的流感样病例 （ILI）和住院严重急性呼吸道感染（SARI） 强化监测。
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人感染H7N9禽流感强化监测实施方案
.严重急性呼吸道感染（SARI）病例
（1）5岁以上儿童及成人。
新收入院患者具有以下4项临床表现：
①急性起病；
②腋下体温≥38℃；
③咳嗽或咽痛；
④气促（呼吸频率≥25次/分钟）或呼吸困难
正在住院治疗的患者如出现上述4项临床表现，也视 为严重急性呼吸道感染病例。
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人感染H7N9禽流感病毒标本采集及实 验室检测策略
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人感染H7N9禽流感病毒标本采集及实 验室检测策略
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人感染H7N9禽流感病毒标本采集及实 验室检测策略
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人感染H7N9禽流感病毒标本采集 及实验室检测策略
➢ 当地流感监测网络实验室收到标本后24 小时内，立即对 呼吸道标本开展甲、乙型流感病毒通用引物，H5、H7亚 型的检测。
➢ 若当地流感监测网络实验室检测结果为H5、H7核酸检测 阳性时，应当于12小时内将其中2管呼吸道相关原始标本 送至省级疾控中心流感网络实验室。
➢ 若当地流感监测网络实验室检测到甲通阳性，不能分亚型 的标本，要12小时内送省级疾控中心流感网络实验室。
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人感染H7N9禽流感病毒标本采集及实 验室检测策略
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相关技术文件
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人感染H7N9禽流感病毒标本采集及实 验室检测策略
标本采集 为进行病例诊断，医疗机构应尽早采集病人的 相关临床样本。采集的临床标本包括病人的上 呼吸道标本（如咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物 、咽漱液和鼻洗液）、下呼吸道标本（如气管 吸取物、肺洗液、肺组织标本）和血清标本等 。
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人感染H7N9禽流感病毒标本采集及实 验室检测策略
对人感染H7N9禽流感确诊病例可能暴露的禽 类饲养或交易等场所，由疾控机构采集禽类粪 便、笼具涂拭标本和环境污水等标本，技术要 求参考《职业暴露人群血清学和环境高致病性 禽流感监测方案（2011年版）》。（ /jkzt/crb/rgrgzbxqlg_5 295/rgrglgyh/）
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H7N9流感病毒检测方法
将新合成的引物探针在开盖前短暂离心 用RNase Free Water溶解，管上标记为Xul/100pmol ,引
物加上X的2.5倍体积的水，探针加上X的5倍体积的水， 变成为使用浓度。 引物/探针未溶解前（干粉状态）4℃保存。 引物/探针溶解之后 -20℃或 -20℃以下保存（注意：反复 冻融易导致引物/探针降解，建议分装保存）。
标本分装：
流感网络实验室收检的呼吸道标本每份分为3管，每 管应不少于1ml。1管用于检测，另外2管用于复核和 病毒分离。标本储存应在-70℃或以下温度，避免反 复冻融。
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H7N9禽流感病毒检测方法：
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H7N9禽流感病毒检测方法：
Realtime PCR检测方法：
➢ 引物探针、阳性对照由国家流感中心和四川省疾控中心统 一下发 请认真阅读引物探针说明。
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标本采集、运送：
H7N9禽流感病毒实验室活动和样本运输按照《人间传染的病 原微生物名录》中高致病性禽流感病毒进行管理。
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实验室检测
有条件开展核酸检测的医疗机构要对呼吸道标 本开展H7N9病毒核酸检测，进行病例诊断， 并指导早期应用抗病毒药物；没有条件开展核 酸检测的医疗机构应当尽快利用快速抗原检测 试剂进行甲型流感病毒抗原检测，并将甲型流 感病毒抗原检测阳性的标本送当地流感监测网 络实验室进一步开展H7N9病毒核酸检测。
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病例定义
人感染H7N9禽流感疑似病例与确诊病例定义 参照《人感染H7N9禽流感诊疗方案（2013年 第2版）》（卫发明电〔2013〕17号）。
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标本采集、运送
当医务人员怀疑病人感染H7N9禽流感病毒时 ，应当尽早采集其上、下呼吸道标本（尤其是 下呼吸道标本）和发病7天内急性期血清以及 与急性期血清采集时间间隔2-4周的血清等。