扫描电镜SEM制样步骤

扫描电镜观察制样步骤

固定：

1、用灭菌镊子挑出少量的的样品（碳粒/碳毡）,放入5ml 的离心管中,

2、加入2.5%戊二醛, 加量为淹没碳粒/碳毡样品为宜,室温固定1小时

3、置于4℃冰箱中固定12小时。

冲洗：

用0.2mol pH 7.4的磷酸缓冲溶液冲洗3 次，每次10 分钟。每次冲洗时先用注射器缓慢吸走上一步骤的冲洗液。Or 离心

脱水：

分别用浓度为30%，50%，75%，90%, 95%, 100% v/v 的乙醇进行脱水，每次10分钟，

干燥：

将样品放在离心管里，置入干燥器中干燥12 小时。粘样：用双面胶将样品观察面向上粘贴在扫描电镜铜板上

预处理好的样品放入干净离心管中待检。

SEM上机测样--测定条件参数设置

分子克隆实验指南第三版，1568页：

25度下0.1mol/L磷酸钾缓冲液的配制；

先配0.1mol/L K2HPO4，0.1mol/L KH2PO4

配PH7.4，100ml磷酸钾缓冲液需：

0.1mol/L K2HPO4，80.2ml

0.1mol/L KH2PO4，19.8ml

混合即是，不用酸碱调PH。

参考文献：

DOI: 10.1021/es902165y

Microbial fuel cell based on Klebsiella pneumoniae biofilm

Selecting anode-respiring bacteria based on anode potential: phylogenetic, electrochemical, and microscopic characterization

A severe reduction in the cytochrome C content of Geobacter sulfurreducens eliminates its capacity for extracellular electron transfer